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생화학 실험/실습 보고서 (DNA Gel electrophoresis)2025.01.231. 제한효소 제한효소는 DNA의 특정한 염기배열을 식별하고 이중사슬을 절단하는 엔도뉴클레아제로서 재조합 DNA를 만들기 위해서 사용하는 특수한 효소이다. 제한효소의 종류에는 1형, 2형, 3형, 4형, 5형 등이 있으며, 각각 인식하는 염기서열과 절단 방식이 다르다. 하나의 플라스미드는 여러 제한효소에 의해 자를 수 있다. 2. 전기영동 Agarose gel에서의 DNA pattern은 smear, 용해되지 않은 물질과 고분자량의 DNA, RNA cloud, supercoiled plasmid, relaxed 또는 nicked c...2025.01.23
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Bradford법을 이용한 단백질의 정량 분석2025.01.151. 단백질 정량 분석 실험 목적은 Bradford법을 이용하여 단백질 정량을 하고 Standard curve를 그리는 것입니다. Bradford법은 산성용액에서 Coomassie brilliant blue 염료가 단백질과 결합하여 최대 흡광도가 595 ㎚로 이동하는 원리를 이용합니다. 따라서 595 ㎚에서의 흡광도가 단백질 농도와 비례합니다. 이 방법은 빠르고 비단백질성분들에 의한 방해도 거의 없어 실험실에서 가장 자주 사용하는 단백질 정량법입니다. 2. 단백질 정량의 중요성 단백질 정량은 생화학 실험에서 기본이 되는 과정입니다....2025.01.15
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A+ 생화학실험 <5주차. Transformation> 레포트2025.01.201. Competent cell (DH5α) DH5α는 recA1 유전자의 160번 아미노산이 glycine에서 aspartic acid로 변이되는 돌연변이로 인하여 endonuclease의 기능을 상실하고 재조합 효소의 활성을 억제되었다. 이에 삽입된 plasmid DNA가 세포 내에서 안정적으로 유지되고 분해되지 않도록 하여, 높은 transformation efficiency(1×10^8 cfu/μg)를 가진다. 2. Plasmid DNA Plasmid DNA는 박테리아의 chromosomal DNA와 물리적으로 분리되어 있으...2025.01.20
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A+ 생화학실험 <10주차. Cloning> 레포트2025.01.201. Molecular Cloning Molecular cloning은 분자 생물학에서 recombinant DNA를 생성하고 숙주 내에서 replication을 수행하는 실험적인 기법입니다. 이 기법의 주된 목적은 target 유전자(insert)를 plasmid DNA(vector)에 넣어 대량의 target 유전자 또는 해당 유전자로 인해 발현되는 단백질을 얻는 것입니다. 일반적으로, 서로 다른 유기체에서 얻은 DNA sequence를 사용하며, 하나의 유기체는 cloning되는 DNA의 source 역할을 하며, 다른 유기체...2025.01.20
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생화학 실험 보고서 - 박테리아 형질전환2025.01.271. 박테리아 형질전환 이번 실험에서는 화학적 방법을 사용하여 박테리아 세포에 재조합 DNA를 도입하는 형질전환 실험을 수행하였다. 실험에 사용된 competent cell은 CaCl2와 glycerol 처리를 통해 세포막의 투과성을 높여 DNA 도입을 용이하게 하였다. 또한 heat shock 과정을 거쳐 세포막의 유동성을 증가시켰다. 형질전환 효율은 colony 수를 통해 계산하였으며, 실험 결과와 고찰을 통해 competent cell 농도와 희석 과정이 형질전환 효율에 영향을 미치는 것을 확인하였다. 1. 박테리아 형질전환 ...2025.01.27
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생화학 실험/실습 보고서 (아미노산의 적정)2025.01.231. 아미노산 적정 이 실험의 목적은 미지의 아미노산 용액을 염기성 용액으로 적정하여 적정 곡선을 통해 어떤 아미노산인지 확인하는 것입니다. 실험 방법은 0.2M NaOH 용액을 제조하고 pH 미터를 보정한 후, 0.1M 미지 아미노산 용액 A 10mL에 NaOH 용액을 0.5mL씩 떨어뜨리면서 pH를 측정하여 적정 그래프를 그리고 대략적인 pKa값과 당량점, 사용한 아미노산이 Lysine, Phenylalanine, Aspartic acid 중 하나인지 확인하는 것입니다. 1. 아미노산 적정 아미노산 적정은 아미노산의 농도를 정확...2025.01.23
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박테리아의 형질전환 실험 보고서2025.01.231. 박테리아의 형질전환 이 보고서는 생화학 실험실에서 수행한 박테리아의 형질전환 실험에 대한 내용을 다루고 있습니다. 실험의 목적은 클로닝 기술을 이해하고, 박테리아의 유전형질을 형질전환시켜 형질전환 효율을 구하는 것입니다. 보고서에는 박테리아의 특성, 클로닝과 형질전환의 원리, 실험에 사용된 시약 및 기구, 실험 방법과 결과, 고찰 등이 자세히 설명되어 있습니다. 1. 박테리아의 형질전환 박테리아의 형질전환은 매우 중요한 생물학적 과정입니다. 박테리아는 자신의 유전자를 다른 박테리아에게 전달할 수 있는데, 이를 통해 유용한 유전...2025.01.23
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A+ 생화학실험 <퀴즈&기말고사 대비 정리노트>2025.01.201. Pipette Pipette는 액체의 부피를 정확히 측정하고 이동하기 위한 도구입니다. 다양한 종류의 pipette이 있으며, 사용 시 주의사항이 있습니다. 예를 들어 사용 전후로 pipette tip을 교체하여 샘플 간 교차오염을 방지해야 하며, 지정된 범위 내에서 적정 부피의 액체를 취급해야 합니다. 2. Micropipette 사용법 Micropipette 사용법은 다음과 같습니다. 1) 옮기고자 하는 용액의 부피에 적합한 pipette 선택 후, plunger를 돌리며 용량 조절. 2) Top holder에 적합한 멸균...2025.01.20
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탄수화물과 지질의 검출 실험 결과 보고서2025.11.171. 탄수화물의 분류 및 기능 탄수화물은 유기생명체에서 에너지원으로 사용되며 광합성을 통해 합성된다. 단당류(포도당, 과당, 갈락토즈, 리보스), 이당류(설탕, 엿당, 젖당), 다당류(녹말, 셀룰로스, 글리코겐)로 분류된다. 생물학적 기능으로는 에너지 저장, 유전물질 구성, 세포벽 형성, 신호전달 등이 있다. 2. 지질의 종류와 구조 지질은 물에 용해되지 않는 분자들을 포괄하며 중성지방, 인지질, 스테로이드로 분류된다. 중성지방은 글리세롤과 지방산으로 구성되어 에너지를 저장하고, 인지질은 친수성 머리와 소수성 꼬리를 가지며, 스테로...2025.11.17
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산성탈인산가수분해효소의 분리 및 정제 결과보고서2025.01.231. 산성 탈인산가수분해효소 이 실험의 목적은 세포 또는 조직(맥아)으로부터 산성 탈인산가수분해효소를 추출하고 정제하여 효소 활성도를 측정하는 것입니다. 산성 탈인산가수분해효소는 주로 리소좀에서 작용하며 다양한 생리적 과정에서 중요한 역할을 합니다. 이 효소는 특정 기질(PNPP)로부터 인산기를 떼어내는 가수분해 반응을 촉매합니다. 실험에서는 원심분리와 여과를 통해 효소를 포함한 상층액을 분리하고, MgCl2와 (NH4)2SO4를 이용한 염석 효과로 효소를 정제하였습니다. 2. 원심분리기 사용 원심분리기 사용 시 주의할 점은 로터의...2025.01.23
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