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연세대학교 생화학실험(1) 6주차 Peptide Mass Fingerprinting In-gel Digestion2025.05.041. Peptide Mass Fingerprinting (PMF) Peptide Mass Fingerprinting (PMF)은 단백질 동정을 위한 기술로, 단백질을 효소로 절단하여 생성된 펩타이드의 질량을 측정하고 데이터베이스와 비교하여 단백질을 식별하는 방법입니다. 이 기술은 SDS-PAGE를 통해 분리된 단백질 밴드에서 시작되며, 밴드를 절단하고 효소로 소화하여 생성된 펩타이드의 질량을 질량분석기로 측정합니다. 이렇게 얻은 펩타이드 질량 데이터를 데이터베이스와 비교하여 단백질을 동정하게 됩니다. 2. In-gel Digesti...2025.05.04
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생화학 실험 보고서 - 단백질 분리2025.01.271. 단백질 분리 이번 실험에서는 MCF-7 세포를 이용하여 동물 세포에서의 단백질 분리 과정을 이해하고 단백질 분석 및 연구를 위한 준비를 하였습니다. 단백질 분리를 위해서는 세포를 깨뜨리고 안정적인 버퍼 환경을 만드는 것이 중요합니다. 다양한 방법으로 세포를 파괴할 수 있으며, 이번 실험에서는 scraper를 사용하여 MCF-7 세포를 깨뜨리고 RIPA 버퍼와 protease 억제제를 첨가하여 단백질을 추출하였습니다. 최종적으로 원심분리를 통해 상층액에 분리된 단백질을 -80°C에 보관하였습니다. 1. 단백질 분리 단백질 분리는...2025.01.27
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[만점 레포트] 연세대학교 생화학실험(1) 13주차 원심분리를 이용한 마우스 혈액면역세포 분리2025.05.041. 마우스 말초혈액 단핵세포 분리 마우스 말초혈액에서 단핵세포를 원심분리 방법을 이용하여 분리하는 실험 내용이 포함되어 있습니다. 말초혈액 단핵세포에는 림프구, 단핵구, 자연살해세포 등이 포함되며, 이를 분리하여 면역학 연구에 활용할 수 있습니다. 2. 림프구 아집단 분리 말초혈액 단핵세포에는 다양한 림프구 아집단이 포함되어 있습니다. 이 실험에서는 원심분리를 통해 림프구 아집단을 분리하는 방법이 설명되어 있습니다. 이를 통해 각 림프구 아집단의 특성을 연구할 수 있습니다. 3. 세포 생존율 측정 분리된 말초혈액 단핵세포의 생존율...2025.05.04
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[만점 레포트] 연세대학교 생화학실험(1) 2주차 pH와 완충용액2025.05.021. pH 측정 pH 측정을 위해 pH 미터를 사용하는 방법에 대해 설명하고 있습니다. pH 미터의 보정, 완충 용액 사용 등 pH 측정을 위한 기본적인 절차와 방법을 다루고 있습니다. 2. 완충 용액 인산염 완충 용액과 암모늄 완충 용액의 제조 방법과 특성에 대해 설명하고 있습니다. 완충 용액의 pH 조절 및 활용 방법 등을 다루고 있습니다. 3. 산-염기 평형 Henderson-Hasselbalch 방정식을 이용하여 pH와 pKa의 관계를 설명하고 있습니다. 이를 통해 산-염기 평형 상태에서의 pH 조절 방법을 다루고 있습니다....2025.05.02
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[만점 레포트] 연세대학교 생화학실험(1) 9주차 흡광광도법2025.05.041. absorption spectrophotometry 흡광광도법은 빛의 흡수 정도를 측정하여 물질의 농도를 분석하는 기술입니다. 이 방법은 320~800nm 범위의 파장에서 빛의 흡수를 측정하며, 흡광도(A)는 투과도(T)의 로그 값으로 계산됩니다. 베르-람버트 법칙에 따르면 흡광도는 물질의 농도, 경로 길이, 몰 흡광 계수의 곱에 비례합니다. 이를 이용하여 표준 검량선을 작성하고 미지 시료의 농도를 측정할 수 있습니다. 2. spectrophotometer 분광광도계는 특정 파장의 빛을 선택적으로 투과시켜 시료의 흡광도를 측정...2025.05.04
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TRIS 완충용액 제작 방법 및 특징2025.01.141. 완충용액 완충용액은 화학적으로 안정적인 pH 값을 유지하는 용액으로, 화학 실험, 생물학 연구, 의학 등 다양한 분야에서 중요한 역할을 한다. 완충용액은 주로 약한 산과 그 상응염기 조합으로 만들어지며, pH를 상대적으로 안정적으로 유지할 수 있게 한다. 2. Tris 완충용액 Tris 완충용액은 트리스(트리스아민)와 트리스염(트리스하이드록시메틸아미노메탄)을 혼합하여 만든 완충용액으로, pH 7.0에서 9.0까지의 범위에서 안정성을 유지할 수 있다. 트리스의 약한 산성 특성과 염기 특성을 활용하여 산과 염기의 중화 반응을 통해...2025.01.14
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완충용액과 산성도 (생화학실험)2025.01.161. 완충용액 완충용액은 일반적으로 산이나 염기를 가해도 수소 이온 농도(pH)가 크게 변하지 않는 용액을 말한다. 이번 실험에서는 아세트산과 아세트산 나트륨을 섞어 만든 완충용액의 특성을 확인하였다. 완충용액은 약산과 그 짝염기를 동일한 농도로 섞어서 제조할 수 있으며, 산을 넣으면 정반응에 의해 염기가 생기고 염기를 넣으면 역반응에 의해 산이 생기면서 수소 이온 농도의 변화가 완충되는 메커니즘을 가지고 있다. 2. pH pH는 수소 이온 농도 지수를 의미하며, 화학에서 물질의 산과 염기의 강도를 나타내는 척도로 사용된다. 중성 ...2025.01.16
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A+ 생화학실험 <5주차. Transformation> 레포트2025.01.201. Competent cell (DH5α) DH5α는 recA1 유전자의 160번 아미노산이 glycine에서 aspartic acid로 변이되는 돌연변이로 인하여 endonuclease의 기능을 상실하고 재조합 효소의 활성을 억제되었다. 이에 삽입된 plasmid DNA가 세포 내에서 안정적으로 유지되고 분해되지 않도록 하여, 높은 transformation efficiency(1×10^8 cfu/μg)를 가진다. 2. Plasmid DNA Plasmid DNA는 박테리아의 chromosomal DNA와 물리적으로 분리되어 있으...2025.01.20
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A+ 생화학실험 <6주차. Plasmid DNA Miniprep> 레포트2025.01.201. Plasmid DNA Plasmid DNA는 박테리아 내에 존재하는 extrachromosomal DNA로, 자체적 복제가 가능한 복제 기점을 가지고 있습니다. 생존에 필수적이지 않은 정보를 담고 있으며, 항생제 내성 유전자 같은 선택적 마커가 포함되기도 합니다. 이를 통해 항생제가 포함된 배지에서 cell-selection을 진행할 수 있으며, 이로부터 유전자 발현 여부를 조사할 수 있습니다. 또한 plasmid DNA는 super coiled 형태의 DNA로, 유전자 조작, 분리, cloning 등 유전공학 분야에 용이하게...2025.01.20
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A+ 생화학실험 <3주차. Agarose Gel Electrophoresis> 레포트2025.01.201. 겔 전기영동 겔 전기영동은 분자의 크기나 전하에 따라 DNA, RNA, 단백질을 비롯한 생물학적 분자들을 분리하는 실험방법 중 하나입니다. 전기영동의 원리는 gel matrix (주로 agarose 혹은 polyacrylamide) 내에 시료를 넣고, 양극과 음극으로 전기장을 가하면 분자들이 전하의 성질에 따라 이동하게 되는 것입니다. 분자의 크기 및 전하밀도에 따라 이동 속도에 차이가 발생하기 때문에, 서로 다른 크기 혹은 전하를 가진 분자들을 분리할 수 있습니다. 겔 전기영동에서 분자의 이동속도에 영향을 미치는 요인에는 입...2025.01.20
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