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단백질 분석(SDS-PAGE & Fluorescence)2025.05.141. SDS-PAGE SDS-PAGE는 Sodium dodecyl sulfate - polyacrylamide gel eletrophoresis의 약자로, 5~250 kDa 사이의 단백질을 분리할 때 사용되는 방법입니다. SDS는 단백질에 결합하여 전하의 영향을 배제하고 크기에 의해 이동속도가 결정되도록 합니다. 또한 DTT와 같은 reducing agent는 단백질의 disulfide bond를 변성시켜 linear한 1차 구조로 만듭니다. SDS-PAGE 후 단백질을 확인하기 위해 Coomassie Briliant Blue, s...2025.05.14
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생화학 실험 보고서 - 동물세포 배양 및 관찰2025.01.271. 동물세포 배양 이 실험은 MCF-7 세포를 사용하여 동물세포의 배양 과정을 이해하고 관찰하는 것을 목적으로 합니다. 동물세포는 핵, 세포질, 세포막 등의 세포 내 구조를 가지고 있으며, 세포 간 상호작용을 통해 조직과 기관을 형성합니다. 동물세포 배양을 위해서는 적절한 배지, 온도, pH 등의 조건이 필요하며, 계대배양을 통해 세포를 지속적으로 증식시킬 수 있습니다. 이번 실험에서는 부착성 세포인 MCF-7 세포를 사용하여 배양 과정을 거치고, 현미경으로 세포의 변화를 관찰하였습니다. 2. 세포 배양 기술 세포 배양은 인공적으...2025.01.27
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A+ 생화학실험 <4주차. 세포배양법> 레포트2025.01.201. 세포 배양법 세포 배양이란 생물학과 의과학에서 많이 활용되는 기술로, 생물체에서 분리한 세포를 체내 환경이 아닌 액체 및 고체 배지를 비롯한 외부 환경에서 키우는 것을 말한다. 세포 배양은 특정 세포를 증식하거나 관찰하므로 세포에 따른 온도, pH를 비롯하여 적절한 생장 환경을 설정하는 것이 중요하다. 일반적으로, 배지에는 세포가 생명활동을 유지하기 위해 필요한 아세트산, 포도당 등의 영양분이 첨가된다. 필요에 따라, 목적한 세포를 제외한 나머지 세포들을 제거하기 위하여 항생물질을 넣기도 한다. 세포 배양 시, 변수를 제거하기...2025.01.20
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A+ 생화학실험 <3주차. Agarose Gel Electrophoresis> 레포트2025.01.201. 겔 전기영동 겔 전기영동은 분자의 크기나 전하에 따라 DNA, RNA, 단백질을 비롯한 생물학적 분자들을 분리하는 실험방법 중 하나입니다. 전기영동의 원리는 gel matrix (주로 agarose 혹은 polyacrylamide) 내에 시료를 넣고, 양극과 음극으로 전기장을 가하면 분자들이 전하의 성질에 따라 이동하게 되는 것입니다. 분자의 크기 및 전하밀도에 따라 이동 속도에 차이가 발생하기 때문에, 서로 다른 크기 혹은 전하를 가진 분자들을 분리할 수 있습니다. 겔 전기영동에서 분자의 이동속도에 영향을 미치는 요인에는 입...2025.01.20
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A+ 생화학실험 <2주차. Pipetting & 50X TAE buffer preparation> 레포트2025.01.201. Pipetting Pipet은 액체의 부피를 정확하게 측정하고, 이동하기 위해 사용하는 실험 기구이다. 일반적으로 pipet은 대기압과 실험자가 조작하는 압력의 차이를 활용한다. 실험자가 pipet의 상단을 조작하여 내부 압력을 조절함으로써, 액체가 pipet 내부로 들어오거나 나가게 된다. Pipet에는 다양한 유형과 용량이 있으며, 사용 목적에 맞게 선택할 수 있다. Pasteur pipet, Graduated pipet, Volumetric pipet, Micropipette 등이 있으며, 각각의 특징과 용도가 다르다. ...2025.01.20
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형광 염색과 형광 현미경을 통한 세포의 관찰(생화학실험)2025.01.161. 형광 염색 형광 염색 시약은 생물학적 샘플에 특정 형광 신호를 부여하여, 현미경 등의 장비를 통해 연구자들이 생물학적 샘플 내에서 특정 대상을 더 쉽게 식별하고 분석할 수 있게 돕는다. 형광 염색을 하는 이유는 형광 염색이 세포 내 특정 구조나 분자를 명확하게 식별하고, 그 위치와 양을 정량화하는 데 유용하기 때문이다. 예를 들어 핵산을 염색시키면 세포의 핵을 명확하게 식별할 수 있고 세포질의 단백질을 염색시키면 세포질을 명확히 식별할 수 있게된다. 또한 형광 염색을 통해 세포 분열, 단백질 발현, 세포 사멸 등과 같은 생물학...2025.01.16
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[만점 레포트] 연세대학교 생화학실험(1) 14주차 생쥐 비장에서 면역세포 분리 후 면역염색 및 유세포 분석2025.05.041. 면역세포 분리 생쥐 비장에서 면역세포를 분리하는 실험을 수행했습니다. 비장은 림프조직의 일종으로, 면역세포가 많이 존재하는 기관입니다. 이 실험에서는 비장에서 림프구, 대식세포, 수지상세포 등의 면역세포를 분리하고 이를 면역염색 및 유세포 분석을 통해 확인했습니다. 2. 면역염색 분리한 면역세포에 대해 면역염색을 실시했습니다. 면역염색은 세포 표면의 특정 단백질을 형광물질로 표지하여 세포를 구분하는 기법입니다. 이를 통해 B 림프구, T 림프구, 대식세포, 수지상세포 등 다양한 면역세포 아집단을 구분할 수 있습니다. 3. 유세...2025.05.04
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단백질 정량 분석 예비 레포트(A+)2025.05.061. 단백질 정량 분석 이 보고서는 단백질 정량 분석에 대한 내용을 다루고 있습니다. 다양한 단백질 정량 분석법(UV법, Lowry법, BCA법, Bradford법 등)에 대해 설명하고, Lowry법을 이용하여 단백질 시료를 정량하는 실험을 수행하였습니다. 또한 UV-Vis 분광광도계의 사용법을 숙지하고, 이를 통해 미지의 단백질 시료의 흡광도를 측정하였습니다. 실험 결과를 바탕으로 각 분석법의 장단점을 비교하고, 단백질 정량 분석의 원리와 응용에 대해 설명하고 있습니다. 1. 단백질 정량 분석 단백질 정량 분석은 생물학, 의학, ...2025.05.06
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산성탈인산가수분해효소의 분리 및 정제 결과보고서2025.01.231. 산성 탈인산가수분해효소 이 실험의 목적은 세포 또는 조직(맥아)으로부터 산성 탈인산가수분해효소를 추출하고 정제하여 효소 활성도를 측정하는 것입니다. 산성 탈인산가수분해효소는 주로 리소좀에서 작용하며 다양한 생리적 과정에서 중요한 역할을 합니다. 이 효소는 특정 기질(PNPP)로부터 인산기를 떼어내는 가수분해 반응을 촉매합니다. 실험에서는 원심분리와 여과를 통해 효소를 포함한 상층액을 분리하고, MgCl2와 (NH4)2SO4를 이용한 염석 효과로 효소를 정제하였습니다. 2. 원심분리기 사용 원심분리기 사용 시 주의할 점은 로터의...2025.01.23
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이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(DNA plasmid transfection, Immunoprecipitation)2025.01.231. DNA plasmid transfection DNA plasmid transfection 실험의 목적은 고분자-유전자 복합체를 이용하여 동물 세포에 plasmid DNA를 넣어 세포의 형질을 전환하는 것이다. 이를 위해 먼저 단백질 A에 대한 염기서열 옆에 epitope tag인 V5 폴리펩타이드에 대한 염기서열을 같이 붙여서 플라스미드 DNA를 세포 내에 넣어준다. 그러면 플라스미드가 핵내에 들어가서 DNA 역할을 할 수 있고, 이후 벡터 DNA가 mRNA로 전사되어 V5가 붙은 단백질 A가 발현된다. 2. Immunopre...2025.01.23