총 20개
-
재조합 플라스미드 DNA 클로닝 예비2025.05.011. 플라스미드 DNA 플라스미드는 주 염색체와 분리되어 있어 독자적으로 복제가 가능한 환형 DNA이다. 대부분은 세균에 존재하며 생존에 필수적이진 않지만 특정 상황에 유용한 유전자를 포함한다. 플라스미드는 클로닝 벡터로 많이 이용되며 재조합된 플라스미드를 세균에 유입 후 증식시켜 DNA양을 늘린다. 또는 발현벡터로 세포내의 전사,번역기구를 이용해 재조합 유전자를 발현시켜 단백질을 대량 생산시킬 때도 이용 가능하다. 2. 클로닝 생명공학에서 cloning은 세포나 DNA조각을 복제하는 과정이다. 목적DNA조각을 다량 생산하거나 DN...2025.05.01
-
생화학 13단원 생물체 내에서 효소의 작동 예시 요약정리2025.04.301. 효소의 특이성 바이러스가 세포에 감염되면 바이러스 유전체를 숙주 세포 내에 삽입한다. 이후 바이러스 DNA는 숙주 세포 유전체 내로 들어가거나 숙주 세포의 효소 등을 이용해 새로운 바이러스를 생산하여 숙주 세포를 파괴한다. 숙주 세포는 제한 endonuclease를 이용하여 바이러스 DNA를 파괴함으로써 살아남으려 한다. 제한 endonuclease는 바이러스 DNA에 있는 인식 서열을 찾아 그 부분 또는 주변을 절단한다. 제한 endonuclease는 바이러스 DNA를 파괴해야 하지만 자신의 DNA를 파괴해서는 안 되므로 매...2025.04.30
-
분자생물학 및 유전공학의 실험방법2025.05.101. Restriction endonuclease DNA의 specific short sequences를 인식하고 쪼갤 수 있는 enzyme입니다. Cloning vectors는 host cell에 외래 DNA를 삽입하기 위해 사용할 수 있는 DNA로, selectable markers와 replication origins을 가지고 있습니다. 2. Nucleases Nucleases(핵산가수분해효소)는 phospho diester bond의 ester bond를 Hydrolyze하는 enzyme이며, Phosphatases(인산분해...2025.05.10
-
[유전학] transfection method와 T7E12025.05.031. Transfection 방법 Transfection은 세포 내로 외부의 DNA나 RNA가 인위적으로 전달되는 과정을 의미한다. 핵산이 세포 내부로 들어가려면 세포막을 통과해야 하는데 이 방법에는 화학적, 생물학적, 물리학적 방법들이 이용된다. 대표적인 물리학적 방법으로는 Electroporation과 biolistics(유전자 총)이 있으며, 화학적 방법으로는 cationic lipid transfection이 있다. 각각의 방법들은 장단점이 있어 실험 목적과 이용하는 세포에 따라 선택하게 된다. 2. 새로운 Transfect...2025.05.03
-
A+ 생화학실험 <9주차. DNA Digestion & Gel Extraction> 레포트2025.01.201. 제한효소 (Restriction enzyme) 제한 효소는 DNA 사슬의 중간 부분에서 특정한 절단 부위(restriction site)를 인식하여 절단하는 endonuclease 범주에 속하며, restrictase라 부르기도 한다. 이들은 주로 박테리아나 고세균에서 바이러스로부터의 침입을 방어하는 메커니즘의 일부로 작용하며, 원핵 생물에서는 이들이 외부 DNA만을 선택적으로 절단하는 restriction digestion을 수행한다. 제한효소는 DNA modification과 molecular cloning 분야에서 중요한...2025.01.20
-
[화공생물공학실험]DNA 제한효소2025.04.281. 제한효소 제한효소는 핵산의 분해요소 중 하나로 DNA의 특정 염기배열을 식별하고 2중 사슬을 절단하는 endonuclease이다. 유전공학 분야에서 재조합 DNA를 만들기 위해 사용되는 효소이다. 제한효소는 소단위체의 구성형태, 절단 위치, 절단 서열의 특이성 및 효소의 구성에 따라 3가지 형으로 분류할 수 있다. 제한효소가 DNA를 절단하는 부위는 두 종류로 분류 가능하다. 하나는 점착성 말단, 다른 하나는 비점착성 말단이다. 점착성 말단은 잘린 부위가 돌출되어 있는 부분이 있는 말단을 말하고 비점착성 말단은 돌출부위가 없는...2025.04.28
-
[생명공학 레포트] gDNA isolation 및 T7E1 assay를 통한 genome editing 확인2025.05.031. gDNA isolation gDNA는 plasmids와 같은 extra-chromosomal DNAs와는 다르게 chromosomal DNA를 의미한다. gDNA를 분리하는 단계에서는 cell과 CLS(Cell Lysis Solution), proteinase K를 섞어 DNA 추출을 위해 cell을 파괴하는 역할을 한다. CLS에는 SDS, Tris-HCl, EDTA 등이 들어가 있으며, SDS는 cell membrane의 lipid를 제거하고, Tris-HCl은 pH 변화를 방지하며, EDTA는 세포 내의 DNases의 역...2025.05.03
-
인천대학교 나노바이오실험(1) A 자료) 5. Restriction Enzyme Cutting2025.01.041. Restriction Enzyme Cutting 이번 실험은 지난 실험에서 E.coli 배양액에서 Alkaimen Lysis mothod으로 추출한 plasmid DNA를 restriction enzyme을 사용하여 절단하였다. 그리고 gel electrophoresis를 통해, 절단된 plasma DNA를 확인하는 것을 목표로 하였다. 실험 결과, 5,000~6,000 bp의 band와 700~1,000 bp의 bnad로 2개의 주요한 DNA band를 관찰할 수 있었다. 추가로, gel 아랫부분에 몇 개의 DNA band가...2025.01.04
-
제한효소에 의한 DNA 절단 예비 레포트2025.01.031. 제한효소 제한효소는 세포 내로 침입하는 바이러스나 외래 DNA를 절단하고 제거하는 박테리아의 자기방어 기구입니다. 제한효소는 자신의 DNA를 메틸화시켜 외부 DNA와 구분하여 보호하며, 핵산내부가수분해효소(endonuclease)의 역할을 합니다. 제한효소의 종류는 다양하지만 크게 I, II, III형으로 분류할 수 있으며, 각각 알맞은 반응 조건을 가지고 있습니다. 제한효소는 DNA 재조합 기술에서 널리 사용되는데, 특히 II형 제한효소가 가장 일반적으로 사용됩니다. 2. 제한효소의 절단 제한효소가 DNA를 절단하면 잘린 부...2025.01.03
-
[건국대학교] 유전체학 DNA_replication 리포트2025.01.151. DNA 복제 개시 ORC(Origin Recognition Complex)는 이중가닥 DNA를 열어 Helicase를 불러오는 역할을 한다. Helicase는 DNA의 이중가닥을 단일가닥으로 풀어주는 효소이며, ATP를 사용한다. Topoisomerase는 Helicase가 풀어준 DNA의 꼬임 현상을 해소해준다. 2. 단일가닥 DNA 보호 SSB 단백질(Single-Strand Binding Protein)은 단일가닥 DNA가 다시 이중가닥으로 붙는 것을 막고 DNA를 endonuclease로부터 보호한다. 진핵생물에서는 R...2025.01.15
1 / 2
