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단백질의 정성분석 실험 보고서2025.01.171. 단백질 정성분석 이 실험은 단백질의 정성분석을 위해 Biuret Test, 단백질 변성에 의한 침전반응, 단백질 유황반응, Xanthoprotein Test 등을 수행하였다. Biuret Test는 단백질이 Cu이온과 결합하여 청자색을 나타내는 반응이며, 단백질 변성에 의한 침전반응은 질산과 포화소금용액이 단백질 응고를 유도하는 반응이다. 유황반응은 단백질 내 시스틴 함유 여부를 확인하는 반응이고, Xanthoprotein 반응은 단백질 내 방향족 아미노산이 질산에 의해 니트로화되어 황색으로 변하는 반응이다. 이러한 정성분석 ...2025.01.17
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만점 단백질의 변성과 응집2025.05.061. 단백질의 구조 단백질은 하나 이상의 아미노산 사슬로 구성된다. 모든 아미노산(amino acid)은 중심이 되는 탄소에 4가지 서로 다른 작용기가 결합된 공통의 기본구조를 가진다. 아미노기(-NH2), 카르복실기(-COOH), 수소와 다양한 부분(R기로 표시)이 그것이다. 단백질에서 발견되는 아미노산은 서로 다른 작용기를 가지므로 화학적, 물리적 특성이 다르다. 따라서 단백질에서 아미노산의 연결은 단백질의 특징을 나타낸다. 단백질의 1차 구조는 폴리펩타이드 사슬 안에서 공유 결합으로 연결된 아미노산 서열이며, 2차 구조는 수소...2025.05.06
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BRADFORD 단백질 정량법을 이용한 온도변화에 따른 유청단백질의 농도 측정(추가실험)2025.05.121. Bradford 단백질 정량법 Bradford 단백질 정량법은 쿠마시블루와 단백질의 특정 아미노산의 결합력을 이용하여 단백질을 정량하는 방법입니다. 쿠마시블루 G-250 염색약이 산성 환경에서 단백질(염기성 및 방향족 곁 사슬을 갖는 아미노산)과 결합하면 푸른색으로 변하게 됩니다. 이 과정에서 단백질의 소수성 부위가 노출되어 염색약과 반데르발스 힘으로 비공유결합을 이루고, 양전하를 띠는 아민기와 염색약의 음전하 부위가 이온결합을 이루면서 단백질과 염색약의 결합이 더욱 강화됩니다. 2. 온도에 따른 단백질 변성 이 실험에서는 프...2025.05.12
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캐털레이즈의 반응속도2025.01.231. 효소 효소는 특정 반응에 직접 참여하지는 않으나 그 반응을 매개하여 반응속도를 빠르게, 또는 느리게 바꾸는 촉매물질이다. 효소는 아미노산 사슬, 즉 폴리펩타이드인 단백질이며, 이 단백질 구조에 따라 효소는 각각 특이적인 형태를 가진다. 따라서 효소가 기질(substrate)와 반응할 때, 기질은 효소의 활성 부위(active site)에 결합하는데, 이 활성 부위가 효소의 단백질 구조에 따라 결정되게 된다. 효소는 기질과 결합하여 효소-기질 복합체(ES)를 형성하며, 이 복합체가 다시 효소와 기질로 돌아오거나 빠르게 생성물을 ...2025.01.23
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실험조리-가열에 의한 우유의 변화와 산에 의한 우유 응고특성 비교2025.01.111. 우유 단백질 조성 우유의 단백질은 카세인과 유청단백질로 이루어져 있다. 카세인은 우유 단백질의 약 80%를 차지하며, 산과 레닌에 의해 응고된다. 유청단백질은 우유 단백질의 약 20%를 차지하며, 락토알부민과 락토글로불린으로 구성되어 있다. 65도 이상 가열 시 피막을 형성하며 응고되지만, 산과 레닌에 의해 응고되지 않는다. 2. 가열에 의한 우유의 변화 가열에 의해 유청단백질의 열변성으로 α-락토알부민, β-락토글로불린이 막의 형태로 모여 지방구와 혼합되어 응고되어 피막을 형성한다. 또한 락토알부민이 냄비 바닥에서 응고되어 ...2025.01.11
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생물학실험1_효소 반응2025.05.011. 물질대사 물질대사는 생물의 세포에서 생명을 유지하기 위해 일어나는 화학 반응으로, 효소에 의해 촉매된다. 이화작용은 복잡한 물질을 단순한 물질로 분해하는 과정이며, 동화작용은 단순한 물질로부터 복잡한 물질을 합성하는 과정이다. 2. 효소 효소는 생체 내의 화학반응을 매개하는 단백질 촉매이다. 효소는 특정 반응물과 결합하여 활성화에너지를 낮춰 반응을 촉진한다. 효소의 활성은 온도, pH, 보조인자 등의 요인에 의해 영향을 받는다. 3. 단백질 구조 단백질은 1차, 2차, 3차, 4차 구조로 이루어져 있다. 단백질의 구조가 변성되...2025.05.01
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DNA 추출2025.04.281. DNA 구조 DNA는 Deoxyribonucleic Acid의 약자로 nucleotide의 중합체인 두개의 긴 가닥이 서로 꼬여 이중나선 구조를 이루고 있는 고분자 화합물이다. DNA의 구조를 살펴보면 한 분자당 polynucleotide 사슬 2개로 구성되어 있으며, 각 가닥은 네가지 종류의 nucleotide로 구성되어 있고, 이 두 가닥은 nucleotide의 염기부위 간 수소결합을 통해 결합한다. 2. DNA 추출 과정 바나나를 소금, 물과 함께 믹서기로 갈아서 걸러주어 세포벽을 파괴하고 DNA가 중성을 띠게 만들어주어...2025.04.28
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대장균에서 재조합 단백질의 생산과 Western blot에 관한 실험2025.01.131. IPTG IPTG는 대장균 lactose operon의 효소합성을 유도하는 강력한 유도물질이다. 보통 유도물질은 operon의 활동에 의해 만들어지는 β-D-galactosidase에 의해 대사 이용하는 것이 많지만, IPTG는 분해되지 않아 비대사성 유도물질이라고도 불린다. 또한, 고농도로 사용시 galactoside permease가 없는 세포에도 투과할 수 있기 때문에 permease가 없는 균주에서의 유도실험에도 사용된다. 2. Buffer condition Tank buffer에는 glycine과 Cl-(Tris-ba...2025.01.13
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SDS-PAGE 이론2025.05.071. SDS-PAGE SDS-PAGE는 Sodium Dodecyl Sulfate- Polyacrylamide gel electrophoresis의 약자이다. SDS는 음이온성 계면활성제의 일종으로 단백질의 가용화제로서 이용되고 있으며 단백질의 전기영동에서 SDS-PAGE법이 가장 일반적인 방법으로 이용된다. SDS-PAGE의 원리는, 단백질을 구성하는 아미노산에 의해서 +,- 상관없이 어느쪽이건 전하를 띄지만 SDS가 결합함으로써 일시적으로 단백질이(-)하전을 띄어 모든 분자를 양극으로 이동시키고, gel의 pore 사이즈에 의해서...2025.05.07
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일반생물학실험 결과레포트 [실험8] 대장균에서 플라스미드 DNA 소량 분리2025.05.131. S1, S2, S3 buffer 성분 및 역할 S1 buffer(재부유, Resuspension buffer)에는 EDTA, RNase, glucose, Tris-Cl이 포함되어 있으며, 이들은 세포벽 파괴, RNA 분해 촉진, 삼투압 유지, pH 유지 등의 역할을 한다. S2 buffer(용해, Lysis buffer)에는 도데실황산나트륨(SDS)과 수산화 나트륨이 포함되어 있으며, 이들은 세포막 분해, DNA와 RNA 변성, 단백질 제거 등의 역할을 한다. S3 buffer(중화, Neutralization buffer)에...2025.05.13