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단백질 발현 실험 목적2024.09.261. 단백질 발현과 정제 1.1. 실험 목적 단백질 발현의 목적은 특정 유전자를 통해 얻고자 하는 단백질을 대량 생산할 수 있기 때문이다. 또한 단백질 정제의 목적은 단백질을 순도 높게 분리 및 정제함으로써 수많은 단백질 중 원하는 단백질만을 얻기 위함이다. 1.2. 실험 이론 및 원리 단백질 발현의 재조합 DNA 기법은 외부 유전자를 플라스미드 벡터에 삽입하여 숙주 세포에 도입하면 마치 숙주 세포의 유전자처럼 발현되는 기법이다. 알로락토오스와 유사한 IPTG를 이용해 Lac repressor와 결합하게 함으로써 lac opera...2024.09.26
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단백질정제 및 정량2024.09.281. 서론 1.1. eGFP의 정의 및 특성 eGFP(enhanced Green Fluorescent Protein)는 Aequorea victoria에서 발견된 GFP(Green Fluorescent Protein)를 변형시킨 단백질이다. eGFP는 GFP의 아미노산 중 64번째 phenylalanine이 leucine으로, 65번째 serine이 threonine으로 변이된 돌연변이체이다. eGFP는 GFP보다 더 많은 빛을 흡수할 수 있어 단백질 정량 실험에서 더 높은 효율을 보인다. eGFP는 293개의 아미노산으로 구...2024.09.28
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5X His tagged2024.09.281. 실험 개요 1.1. 단백질 정제 기술 단백질 정제 기술은 목적 단백질을 다른 불순물들로부터 분리하여 순수하게 얻어내는 방법이다. 이를 위해 다양한 크로마토그래피 기술이 사용되며, 그중에서도 친화성 크로마토그래피(Affinity chromatography)가 널리 사용된다. 친화성 크로마토그래피는 특정 리간드와 단백질 사이의 결합 특이성을 이용하여 목적 단백질을 분리하는 방법이다. 그 중 하나가 금속이온 친화성 크로마토그래피(Immobilized metal ion affinity chromatography, IMAC)이다. ...2024.09.28
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특정 유전자를 선택하여 T-Vector에 삽입시키고 이를 E-Coli 내에 transformation 시켜 형질전환 박테리아를 선택적으로 배양2024.11.161. Transformation 조 1.1. 실험 목적 재조합된 DNA(eGFP DNA)를 Competent cell에 넣고, 배양된 Colony를 대조군과 비교함으로써 형질전환(Transformation)에 관하여 고찰해보는 것이 이 실험의 목적이다. 수용세포에 노출된 DNA가 흡수, 통합, 발현되는 과정을 나타내는 형질전환은 몇몇 박테리아 사이에서 자연적으로 일어나는 현상이다. 그러나 대장균을 포함한 다른 종들은 외부 DNA를 흡수할 능력이 없기 때문에 인공적인 방법으로 형질전환을 유도하게 된다. 이번 실험에서는 경쾌한 녹색...2024.11.16
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단백질 발현, 정제 보고서를 써줘2024.10.121. 생명과학실험Ⅰ 실험보고서 1.1. 실험배경 1.1.1. 세포 내 단백질 발현 세포 내 단백질 발현은 생명체의 기본적인 생명 활동을 이해하는 데에 매우 중요한 과정이다. 세포는 살아가기 위해 필요한 다양한 단백질을 끊임없이 합성하고 있으며, 이러한 단백질들은 세포 내에서 복잡한 네트워크를 이루며 상호작용하며 세포의 구조와 기능을 유지한다. 세포 내에서 원래부터 만들어지는 단백질을 내생적(endogenous) 단백질이라고 하며, 세포는 수만 개 이상의 다양한 내생적 단백질들을 끊임없이 생산해내고 있다. 이러한 내생적 단백질...2024.10.12
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연세대학교 레포트 표지2025.03.221. 연세대학교 레포트 표지 본 레포트는 Lab1에서 실험기본장치, Lab2에서 세포배양, Lab3-5에서 gene 관련 실험을 진행했다. Lab4에서는 특정 gene을 E.coli에 translation시켜 target gene을 복제하였다. 이 gene을 2가지 방법으로 활용할 수 있는데, 첫째는 gene 자체로만 활용하는 것이고, 둘째는 gene에 의해 발현된 protein을 활용하는 것이다. 본 레포트에서는 protein isolation을 다루며, 추가적으로 standard curve를 이용한 protein 농도 측정 방법...2025.03.22
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SDS page2025.03.151. SDS PAGE 1.1. SDS PAGE 개요 SDS PAGE는 단백질을 분리하는 기술이다. 핵산을 전기영동할 때는 아가로스 겔을 주로 이용하지만, 단백질 전기영동에는 폴리아크릴아마이드 겔을 사용한다. 아크릴아마이드 단량체가 ammonium persulfate와 TEMED 효소의 촉매 반응을 통해 폴리아크릴아마이드로 중합되어 겔 구조를 형성한다. 이 반응은 효소 촉매 반응이므로 비가역적이다. SDS는 음이온성 계면활성제로, 단백질과 비가역적으로 결합하여 균일한 음전하를 띠게 한다. 이로써 단백질의 고유한 전하와 입체 구조...2025.03.15
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닭 배아2025.03.161. 서론 1.1. 닭 배아 발생에 관한 실험의 필요성 닭 배아 발생에 관한 실험의 필요성은 다음과 같다. 닭은 발생 과정 중 외부에서 관찰이 가능하고 실험이 용이하여 배 발생 연구에 널리 활용되는 모델생명체이다. 닭의 배 발생은 사람의 발생과 유사하므로 닭을 대상으로 한 실험 결과를 통해 인간 발생의 근본 과정을 이해할 수 있다. 또한 배 발생 단계의 관찰을 통해 각 단계별 특징을 확인하고 이를 통해 정상적인 발생 과정을 이해할 수 있다. 이러한 배 발생 과정에 대한 이해는 다양한 질병이나 기형의 원인을 밝히는데 기여할 수 있다...2025.03.16
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닭 배아2025.03.161. 서론 1.1. 닭 배아의 발생과 구조 배아는 수정란으로부터 시작하여 세포분열을 거치면서 다양한 장기와 조직으로 발달한다. 닭의 배아 발생과정은 포유류와 매우 유사하여 그 과정을 이해하는데 유용하다. 닭의 배아는 수정 후 반할성 난할을 통해 다수의 세포로 분열하며, 이 과정에서 상실배와 포배단계를 거쳐 발생이 진행된다. 포배단계에서는 내배엽, 중배엽, 외배엽의 3개 배엽이 형성되는데, 이들은 후에 각각 소화기관, 근육 및 골격, 신경계와 피부 등으로 분화한다. 특히 중배엽에서는 척삭, 체절, 측판 등의 구조가 발생하는데...2025.03.16
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닭 배아 발생2025.03.161. 서론 1.1. 배아 발생 실험의 필요성 배아 발생 실험의 필요성은 다음과 같다. 배아는 하나의 수정란에서 출발하여 점차 분화와 성장을 거쳐 완전한 개체로 발달하게 되는데, 이러한 배아 발생 과정에 대한 관찰과 연구가 필요하다. 배아 발생 실험을 통해 세포의 분화, 장기의 형성, 유전자 발현 등 발생학적 기본 원리를 이해할 수 있고, 이는 의학적으로 중요한 기초 지식이 된다. 또한 배아 발생 과정의 이상을 통해 선천성 기형의 원인을 파악할 수 있어 발생학적 연구는 의학 분야에 기여할 수 있다. 한편 닭 배아는 실험 관찰이 용이...2025.03.16
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