Recombinant DNA 를 mini-prep하고 mapping 한 후에 rosetta 2(DE3)pLysS 로 Transformation 하는 과정에 대해 알아보 ... 자.recombinant dna 를 mini-prep하는 이유는 이전 단계에서 얻은 colony가 실제로 우리가 원하는 recombinant dna 를 가지고 있는지 확인하기 위한 사전 단계 ... 로, recombinant plasmid를 추출하는 데 목적에 있다. 이를 위해 DH5alpha colony 를 LB broth 에 풀고 overnight culture 를 한 후
. Methods :① 50ug/ml ampicillin이 있는 5ml의 LBㅠ개소dp 형질전환된 DH5 alpha를 접종하고 shaking at 37℃ O/N② 배양된 균의 1ml ... , 7 April 2014Concentration 114.5 ng/ulPath length 0.5mmA230A260A280A3200.552.031.13-0.257A260/A280A ... 지만 손쉽게 회사들이 파는 kit를 통해 추출할 수가 있다. 보통 필자가 속한 연구실은 QIAGEN으로 하지만 이번 실험에서는 Nucleogene사의 Plasmid miniprep
는 것이다. 34%의 sucrose를 사용하는 것은 mini-prep시의 Solution I의 glucose와 비슷한 역할을 하며 세포형태를 유지시켜 주는 역할을 한다. EDTA ... 었기 때문일 것이다. 다른 곳에서 실험할 때는 genomic DNA(=chromosomal DNA)를 추출하는 경우가 거의 없었기 때문에 조금은 생소했지만 mini-prep과 비슷한 원리였기 때문에 쉽게 적응할 수 있었다. 다시 한다면 제대로 할 수 있을 것 같다. ... 1. 실험제목 (Title)E.coli(DH5α)에서의 Chromosomal DNA 추출 실험2. 개요 및 실험목적 (Objectives)E.coli의 genomic DNA(=c