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"크로마토그래피 이온" 검색결과 2,381-2,400 / 2,520건

  • [고분자실험] 스티렌과 디비닐벤젠의 가교 공중합
    의 치환 또는 촉매, 크로마토그래피 분석 방면에도 응용되는 등 그 용도가 매우 광범위하다.3. 실험기구 및 시약◇ 실험기구?시험관, septum 고무코크?주사기, 주사바늘?비이커◇ 시약 ... 는 방법은 ?화학적 방법이외에도 ?물리적 방법도 생각할 수 있다. 이 두 경우를 살펴보자.? 화학적 가교결합공유 결합이 생기는 경화 반응이라고도 한다.? 물리적 가교결합1) 이온 ... 체 회수가 용이하다.이온중합이나 배위 중합에 많이 사용된다.용매 중합의 문제점 : 중합과정에서 반응계를 연속적으로 저어주어야 하며, 중합이 끝난 후 용매를 제거하고 또 회수해서 재
    리포트 | 5페이지 | 1,000원 | 등록일 2004.10.30
  • [황 예비]황 (SO4) 예비레포트
    등이 있다.- 기준치 설치 근거4) 분석법 (2)- 환산염의 측정방법에는 크게 네 가지의 표준 분석법이 있다 크로마토그래피법은 가장 좋은 방법의 하나로, 0.1mg/l의 낮 ... Drying of Residue)2.Object (2)(3)- 자연수 속에 있는 황산염의 농도를 측정한다.- 황산이온이 과다하게 포함된 수도물을 마시면 설사를 일으키게 되므로공설 ... 급수에서 중요하게 다루어진다.- 산업용수에서도 황산염이 과다하게 포함된 물을 사용하는 경우 보일러와 열 교 환기에 스케일을 생성하므로 주의해야 한다.- 폐수의 황산이온 함량
    리포트 | 14페이지 | 1,500원 | 등록일 2005.09.28
  • [재조합 단백질]erythropoietin
    을 나타내므로 이온교환 크로마토그래피 방법으로 여러 isoform을 분리할 수 있다(그림 1).그림 1. rhEPO의 등전위 전기영동(PAGIF)Gokana등(1997)은 정제한 재조합 에 정제 ... 된 빈 아니라 사람소변속의 EPO와도 잘 반응하였다.항체는 어떤 물질의 작용기작이나 생리적인 상태, 화학적. 생물학적 특징을 알아내는데 매우 유용하며 친화성 크로마토그래피에 응용 ... EPO를 사용하여 단일크론성 항체를 얻고 이 항체를 친화성크로마토그래피에 최초로 응용하여 EPO를 81600U/㎎단백질까지 정제하였으나 이는 SDS로 변성된 항원을 사용
    리포트 | 21페이지 | 1,000원 | 등록일 2002.12.18
  • 자외선에 의한 피부노화 및 염증반응을 완화시키는 연교추출물
    .45㎛ 여과막을 이용, 여과하여 20㎕를 고속액체크로마토그래피 (HPLC) 분석을 행하였다.HPLC 분석 조건으로 Dionex사 Summit HPLC를, 칼럼은 YMC-Pack ... 은 Diaion HP-20 이온수지 칼럼에 충진 시킨 후 40 %, 60 %, 80 %, 100 % 메탄올로 각각 용출한 분획물을 Rotary vacuum evaporator로 50℃ 이하
    리포트 | 20페이지 | 2,000원 | 등록일 2007.06.07
  • [공학기술]알루미나 실험보고서
    이어법으로 제조한 알루미나를 알루미늄제련의 원료로서 사용하는 것이다. 흡착 능력이 큰 활성알루미나는 탈수제나 탈색제, 크로마토그래피의 흡착제 등에 이용된다. 천연산 코런덤은 금강사 ... 굳어버리는 점(급결)등에 주의 한다.5.알루미나겔-결정화되어 있지 않거나, 결정성이 아주 나쁜 알루미나.알루미늄이온을 함유한 수용액을 암모니아에 의해 중성으로 한 후, 얻어지
    리포트 | 9페이지 | 1,000원 | 등록일 2007.06.09
  • [고분자공학] 단량체의 정제와 개시제의 정제
    . 일반적으로 정제에는 단순증류, 분별증류, 공비증류, 진공증류, 재결정, 추출, 승화, 그리고 크로마토그래피를 이용하는 방법 등이 있다. 축합 중합에서 사용되는 단량체들의 정제 ... 을 용해 ?분리 하는 조작.승 화 : 고체가 액체 상태를 거치지 않고 직접 기체로 변하는 현상. 또는 그 반대의 현상.크로마토그래피 : 색소물질을 흡착제에 의해서 분리하는 방법 ... 이 알려진 것은 1930년인데, 그 후 각종 vinyl단위체로부터 이 중합 형식으로 많은 종류의 고분자 재료가 제조되었다. 라디칼중합은 이온중합보다도 이론적 취급이 비교적 간단
    리포트 | 4페이지 | 1,500원 | 등록일 2003.10.12
  • [생명공학실험] 키틴조직에서 키틴분해효소의 분리
    Ⅰ. 서 론1) 키틴.키토산이란?키틴은 새우.게등 갑각류, 투구풍뎅이.귀뚜라미.여치 등 곤충류, 기타 균류의 세포벽 등에 단백질과의 복합체로서 함유되어 있는 다당류로, N-Acetylglucosamine이 β-(1→4) Gluco side 결합으로 연결된 구조를 가지고 있다.한편, 키토산은, 키틴을 염알칼리로 처리함에 따라서 얻을 수 있는 키틴의 탈Acetyl체로, D-Glucosamine이 β-(1→4) 결합한 구조를 갖는다 (그림 1)그림 1. Chemical structures of cellulose, chitin, chitosanCH2OH CH2OH CH2OHH O H O H OOH H O OH H O OH H On n nH OH H NHCOCH3 H NH2Cellulose Chitin Chitosan게, 새우와 같은 갑각류의 껍질은 크게 나누면 단백질, 칼슘, 키틴질의 3가지 성분으로 구성되어있는데, 이 껍질로부터 일련의 처리공정을 거쳐 키틴을 추출한다. 게껍질등을 염산 및 가성소다로 처리하여, 탄산칼슘, 단백질, 기타 미량성분을 제거한 것을 키틴이라 하고, 이 키틴을 더욱더 탈아세틸화 처리하여 추출한 것이 키토산이다. 그러나 일반적으로 제조되는 키토산에는 잔류된 키틴이 5∼25% 정도 함유되어있는 이유로 키토산을 키틴 키토산이라 부르기도 한다. 키틴 키토산은 백색∼담황색∼담적색의 물질로 Cellulose와 매우 유사한 구조로서, 분자내에 존재하는 아미노기에 의한 강력한 분자간 결합력을 가진 안정한 천연고분자이다. 화학적 구조로 보면 키틴이나 키토산은 셀룰로오스와 비교할 때 많은 차이점을 볼 수 있다. 즉 키틴이나 키토산은 셀룰로오스의 -OH기 1개가 -NHCOCH3기나 -NH2기로 변화된 것에 불과하나 셀룰로오스와 비교할 때 많은 차이점을 보여준다.* 키틴 키토산의 화학명과 성상키틴(Chitin) → β-(1,4)-Poly-N-Acetyl-D-Glucosamine (C8H13NO5)n키토산(Chitosan) → β-(1,4)-Poly-D-Glucos양상을 보여주고 있으며, 인체적 합성측면에서 가장 높은 효율을 보여주고 있다. 옛날부터 가정 상비약으로 오징어 뼈를 건조하여 가루로 분쇄하여 보관하였다가 상처부위에 바르던 습관은 바로 Chitosan의 약리작용을 경험적으로 터득하고 있었던 것으로 판단된다. Chitosan의 사용에서 Chitosan의 탈아세틸화도(Degree of Deacetylation)에 따라서 Chitosan의 고유한 성질이 발현되나 이 탈아세틸화도의 중요성이 제대로 인식되지 못하고있다.* 탈아세틸화도(Degree of Deacetylation) → Chitin에서 Chitosan으로의 변환 정도갑각으로부터 얻어진 Chitin은 40%이상의 강한 알칼리용액 속에서 처리함으로써 Chitin의 NHCOCH₃기를 NH₂기로 변환시켜서 Chitosan을 제조할 수 있다. 알칼리처리에 의해서 NHCOCH₃기의 NH₂기로의 변환율을 탈아세틸화도 라고 정의하는데, 아직까지 탈아세틸화도가 100%에 달하는 Chitosan의 제조에 성공한 예는 아직 없다 한다.탈아세틸화 반응에서 가장 중요한 사실은 지극히 강한 알칼리용액속에서 Chitin이 처리되기 때문에 Chitin의 심각한 상해가 수반되어 세심한 기술적인 Know-How가 적용되지 않으면 Chitin의 분자쇄가 급속히 절단되어 변색이 수반된 분자량이 낮은 Chitosan밖에 얻을 수 없다. 분자량이높고 고백색도의 고순도 Chitosan을 얻기위해서는 Chitosan제조시 알칼리의 과격한 작용을 저지시켜줄 수 있는 방법이 요구된다. 아무리 강한 알칼리 조건이 부여된다할지라도 100%의 탈아세틸도를 갖는 Chitosan은 아직까지 얻어질 수 없으며 목적에 따라서 98∼99%까지도 제조를 하고있으나 일반적인 경우 탈아세틸화도가 80∼90%정도이다.4) 키토산의 물질 특성 키틴및키토산은 무미무취의 천연 고분자 다당체이며, 섭취후 약간 떫은맛의 여운이 느껴진지며 키틴과 키토산 모두 천연 식품첨가물로 사용되고 있으나, 건강식품용도로 주로 사용되는것은 키토산이나될 수 있는 기의 pKa로 pH의 효과를 알아볼 수 있다. 예를 들어 어떤 화합물, 즉 강산염에 서 pH는 상대적으로 덜 중요한 반면 아미노산 또는 단백질같이 잠재적으로 음이온과 양이온기를 가지는 분자에서는 pH의 변화가 극성 변화의 정도에 따라 순전하를 어느 정도 변화시킬 수 있다. 이러한 특성은 단백질과 유사한 혼합물들이 단지 pH 이동으로 순전하가 변함으로써 음 이온이나 양이온 교환체로 분류되므로 중요하다. 단백질의 순전하가 0이 되는 pH, 즉 isoelectric point (pI)를 안다면 이는 흡착이 일어나는 pH 조건을 선택하는데 있어서 시작점으로 사용할 수 있다.교환체와 용질분자(이온)사이에 필요한 전하량 조건이 이루어지면 흡착이 일어나며 그 이후에 탈착에 대하여 논할 수 있다. 탈착은 교환체로부터 하전된 용질 분자를 대치하기 위해 이동상에 경쟁적 이온을 추가함으로써 이루어진다. 어떤 경우에는 이온 교환이 하전된 분자를 용액으로부터 분리하는 기법으로 사용될 수 있으며 이런 경우 탈착 과정은 선택적일 필요가 없고 고농도의 염 이온을 사용할 수도 있다. 그러나 몇몇 하전된 화합물, 예를 들면 아미노산 분석 같은 경우는 이온 교환을 사용하는 것이 보다 일반적이다. 이런 경우, 각 이온들이 다른 속도로 탈착 분리되므로 선택적 탈착이 요구된다. 이 효과를 그림B에서 이온 교환체에 흡착된 세 가지 화합물에 대하여 나타내었다. 이 세 가지 화합물은 교환체에 대한 다른 친화력을 가지 고 있어서 염 농도의 적절한 선택으로 분리될 수 있다. 염 농도가 A인 경우 세 가지 모두 어느 정도 탈착되지 않으므로 칼럼에 남아있다. 반면 염 농도 C에서는 사실상 모두 흡착 제거되어 재빨리 용리 되지만 분리는 일어나지 않는다. 중간 농도 B에서는 흡착 속도가 달라 효과적인 분리가 된다.하전된 분자들은 이동상의 pH를 바꾸어 교환체로부터 용리될 수 있으며 전하의 이동과 관계 있는 용질 분자의 ratio 또는 이온 교환체 내의 이온 교환 자리가 감소한다 이러한 변화는 차례로 머이 때 buffer의 pH가 중요한데 이는 protein의 charge의 상태가 pH에 따라 변할 수 있기 때문이다. 우린 실험에서 pro tein이 가장 잘 용출된다고 조사된 pH 7.5의 buffer를 만들어 실험시 사용했다.우리 조의 결과를 보면 Anion상에서는 중성이나 (+)charge를 띄는 protein이 많았고, 작은 (-)charge를 띄는 protein들도 어느 정도 용출된 것을 알 수 있다. Cation상에서는 (-)charge를 띄는 protein들이 거의 대부분이었으며 용출시키려던 (+)charge를 띄는 protein은 거의 찾아볼 수 없었다. 분명 같은 sample을 가지고 실험했음에도 불구하고 Anion에서 용출되지 못한 protein들이 Cation에서 잡혀서 보일거란 예상은 빗나갔다. 사실 나도 이점이 젤 궁금하게 생각되었는데 어떤 실험과정이나 시료 또는 buffer의 문제점보다는 기계상의 washing의 상태나 binding시켜주는 시간 등에서 문제가 있었을 거라고 생각했다.* 서론에서도 기술했지만 키틴과 키토산의 경우는 음전하(-)를띠는 기존의 대부분의 식물섬유(또는식이섬유)와 달리, 용해상태에서 양전하(+)를 띄는 지구상 유일의 천연동물성 식물 섬유라는 특이한 구조를 가지고있다고 한다. (조교님 정확한 이유를 알고 싶습니다~)☞ 4주차 실험 → HIC (hydrophobic interaction chromatography)1) 소수성 상호반응 크로마토그래피 (hydrophobic interaction chromatography)물속에 소수성 물질이 들어오면 서로 뭉치려는 현상을 볼 수 있다. 예를 들면 헥세인(hexane) 2 분자가 물에 들어오면 자발적으로 서로 모이는 것을 볼 수 있다. 이러한 현상은 열역학적으로 자발적으로 일어나는 소수성 상호반응이다. 소수성 상호반응 크로마토그래피는 소수성 기능기를 갖는 지지체(matrix)와 어떤 분자간의 소수성 상호작용을 이용하여 분리하는 방법이다. 지지체는 친수성(hydrophi수성기를 가지고 있다고 설명할 수 있다. (데이타 값의 신뢰성 여부에 따라 결과는 다를 수 있다고 생각한다)☞ 5주차 실험 - protein 정량 (by Lorry and Folin method at mg level)1) Lowry-Folin method의 원리Folin­Ciocalteu시험법:텅스텐산나트륨, 몰리브덴산나트륨, 인산 등으로 되어 있는 단백질 정량시약(페놀시약이라 함)이 단백질중의 tyrosine, tryptophan, cysteine의 각 잔기와 반응해서 청남색을 나타낸다. 다시 감도를 높이기 위해서 이것과 Biuret반응을 조합한 Lowry법이 실제로 널리 쓰이고 있다. 또한 Biuret반응 자체도 정량의 목적으로 자주 쓰이는 방법이다. [4]*왜 570m에서 측정할까?--청남색의 흡수파장이 570mm에서 가장 잘 측정된다.*BSA(bovine servime albumin)--일반적으로 단백질 정량에 쓰이는 표준물질--standard curve를 잡을 수 있다.2) 실험방법먼저 BSA(1mg/1ml)용액과 물을 섞어 0 20% 40% 60% 80% 100%의 standard sample을 만든 후 O.D를 측정하여 standard curve를 얻는다. 다음 chromatography를 통해서 bind, nbind로 분리된 각각 2개의 sample을 원액과 10배 희석한 2가지 경우로 만들었다. 모든 시약을 정확히 가해주고 voltexing한 뒤에 O.D를 측정하여 standard curv e에 대입하여 정량값을 얻어내었다< Lowry - Folin 법에 의한 Preotein의 정량 >시료분리된 단백질sample원액10배 희석O.D 값정량값(㎎/㎖)O.D 값정량값(㎎/㎖)Anionbind0.0880.17030.0210.0406unbind0.1210.23420.0390.0755Cationbind0.0660.12770.0350.0677unbind0.0830.16060.0400.0774HICbind0.0600.11610.0340.0658unbind0[5]
    리포트 | 21페이지 | 1,000원 | 등록일 2003.09.01
  • 기체 크로마토그래피(GC)
    【GC(gas chromatography)-기체 크로마토그래피】1952년 마틴(Matin)과 제임스(James)가 기체나 휘발성 물질을 대상으로 하는 기체 크로마토 그래피(GC ... -액체 크로마토그래피 연구는 모두 미세한 입자의 비활성 고체지지체 표면에 흡착시킨 얇은 액체막을 정지상으로 하는 충전컬럼을 사용하였다. 그러나 이런 초기의 이론적 연구의 결과, 컬럼 ... 다. 이런 식물은 분자확산으로 구멍을 통해 영양분을 받아들이고 노페물을 배출하였다. 따라서 그들의 잔해는 지지체로서 적당한데, 이는 기체 크로마토그래피도 같은 분자확산에 바탕을 두고 있
    리포트 | 11페이지 | 1,000원 | 등록일 2003.02.24
  • [화공과] 크로마토그래피
    바로 가기1. 실험 A : 종이 크로마토그래피를 이용한 아미노산의 분리 2. 실험 B : 역상 크로마토그래피를 이용한 식용 색소의 분리핵심 내용 :분리, 극성, 분배, 정상 ... 크로마토그래피역상 크로마토그래피종이 크로마토그래피관련 자료 :표준일반화학실험 제5개정판 (대한화학회) 실험 8 "크로마토그래피" 실험 BA Production of Amino ... 은 극성이 낮다. 이러한 특징은 물질의 분리에 중요한 요소로 이용된다.분리에 가장 광범위하게 사용되는 방법은 크로마토그래피(크로마토그래피)이다. 대부분 크로마토그래피의 핵심 원리
    리포트 | 10페이지 | 1,000원 | 등록일 2001.11.05
  • [화학실험 결과레포트] 재결정
    -고체 크로마토그래피{이온교환 크로마토그래피{gel 크로마토그래피< 크로마토그래피의 계통도 >이러한 분리방법의 원리는 혼합물을 이룬 각 성분들이 두상에 분배되는 정도, 즉 각 ... 의 순수화 방법* 크로마토그래피 *◆ 원리크로마토그래피(chromatography)는 혼합물을 흡착제(absorbent)에 대한 친화도의 차, 즉 분별흡착 현상을 이용하여 분리·정제 ... ·정성 및 정량분석을 할 수 있는 방법으로 정의할 수 있다.크로마토그래피는 다성분 혼합물을 두 상(phases), 즉 고정상(stationary phase)과 이동상(moving
    리포트 | 14페이지 | 1,000원 | 등록일 2002.03.13
  • [생화학실험]분광광도계를 이용한 단백질 정량분석
    을 결정하는 화학분석으로 크게 나누어진다. 기기분석은 조작이 간단해서 정밀도가 높고, 개인차가 적다.이것에는 폴라로그래피 ·광흡수분석법 ·질량분석법 ·발광분광분석법 ·기체크로마토 ... 그래피와 같은 방법이 사용되고 있다. 화학분석은 조작법에 의해 분류하면 중량분석과 용량분석이 있다. 그리고 시료의 종류에 따라 분류하면 기체분석 ·미량분석이 있고, 그 방법에 의해 ... 닐기를 가진 화합물과의 반응으로 단백질은 peptide bond를 가지고 있어 서 구리 이온과 착염을 형성시 키기 때문에 정색반응을 나타 내며, peptide결합(-CO.NH
    리포트 | 7페이지 | 2,500원 | 등록일 2006.03.04
  • [단백질 분리] HPLC
    작성기능 등을 갖춘 컴퓨터 시스템 등이 있다.HPLC에는 흡착 크로마토그래피, 결합상 크로마토그래피, 이온 교환 크로마토그래피, 젤 침투 크로마토그래피가 있다.흡착크로마토그래피 ... *HPLC(High Performance Liquid Chromatography)HPLC(High Performance Liquid Chromatography)의 원리는 크로마토 ... 그래피 실험 조작에 있어서 정지상을 채운 분리 관에 시료를 주입하는 방법과 이동상을 흘려주는 방법에 따라 그 조작법은 3가지로 구분된다. 즉 전단분석, 치환법, 용리법이다. 혼합
    리포트 | 3페이지 | 1,000원 | 등록일 2001.12.20
  • [생물공학] 고정화 효소
    고정화 효소- 목 차 -1. 효소의 일반적 특징2. 고정화 효소3. 고정화 효소의 식품 가공에서 이용분야4. 고정화 방법(1) 담체 결합법(2) 가교법(3) 포괄법5. 고정화 효소의 성질6. 기질 특이성7. 최적pH8. 최적온도9. 동역학적 정수10. 안정성11. 고정화 효소와 고정화 균체의 이용12. 고정화 aminoacylase를 사용한 L-amino acid의 연속제조법13. 고정화 aspartase를 사용한 L-aspartic acid의 연속제조법14. 고정화 penicillin amidase를 사용한 6-aminopenicllanic acid의 연속제조법15. 녹말의 연속당화와 전화당의 연속제조법16. 고정화 papain을 사용한 맥주의 혼탁방지법17. 고정화 효소를 사용한 다른 연속효소 반응18. 고정화 효소의 평가표준화19. 효소 고정화와 세포 고정화20. Lipase의 고정화 기술 개발21. 세포의 고정화1. 효소의 일반적 특징효소는 화학반응율을 증가시키는 단백질성 촉매이며 촉매 중에 소모도 변형되지 않는다. 효소의 polypeptide사슬은 "활성부위"를 만드는 그런 방식으로 겹쳐져 있다. 기질은 효소의 활성부위에 특이한 방식으로 결합하여 효소/기질(ES)복합체를 형성한다. 일단 효소/기본질복합체가 형성되면, 촉매반응은 일어나, 반응산물을 형성한다.효소는 4가지의 기질특이성을 나타내는데, 절대적 특이성, 기질특이성, 그리고 광학적 특이성 등이 그것이다. 활성부위는 기질분자를 활성부위에 결합한 다음 많은 아미노산잔기로 에워싸여 있는데, 이 아미노산들은 촉매반응을 일으킨다.효소의 보조인자(금속이온과 비타민보조효소)는 활성부위에 결합되어 화학결합을 형성 또는 파괴를 돕는다. 만약 분자들이 서로 반응한다면, 그들은 전이상태에 도달한 후에 화학결합을 형성, 또는 파괴하기 위한 충분한 운동에너지(이동에너지)를 가져야 한다.효소는 저활성화에너지를 갖는 다른 반응의 경로를 제공함으로써 화학반응을 가속화시킨다. 효소는 반응물분자를 활성부위내로 집결시켜 이러한 도 한다.- 고정화 효소의 단점 -불용성 기질에는 작용할 수 없다. 중합된 기질에는 매우 낮은 효율을 갖는다는 것이다. 효소 고정구슬은 reactor column에서 자주 이용된다. 작은 구슬을 원통 안에 채우고, 원통바닥은 작을 구슬은 흐르지 못하게 하고 액체만 흐를 수 있도록 한다. 이것은 컬럼 크로마토그래피와 비슷한 방법이나 그 규모가 훨씬 크다.옥수수시럽 같은 반응물을 반응기에 지나가게 하여 생성물로 전환시키는 것은 마치 용출 흐름과 비슷하다. 이러한 연속공정은 산업공정에서 확실히 장점을 가지고 있다. 효소를 고정화하기 위한 여러 가지 방법들이 보고되었다.효소용액에서 폴리아크릴아미드아 메틸렌-이-아크릴아미드를 중합시키면 효소가 드 매트릭스에 걸려든다. 폴리아크릴아미드 매트릭스에서는 저분자기질을 효소에 접근시킬 수 있지만 효소는 그 자리에 남게 된다. 물론 이 방법은 효소가 폴리아크릴아미드 사슬의 중합반응 개시와 신장조건하에서 상당한 양이 불활성화되지 않을 경우에만 성공적이다.다른 접근방법으로 효소를 스테인레스 철, 유리, 셀룰로오스와 같은 화학적으로 효소반응조건에서 거의 불활성인 강체나 결정의 표면에 흡착시키거나 화학적으로 결합시기는 방법이 있다. 기질과 생성물에 토과성인 물질로 만들어진 속이 빈 구체 안에 효소가 싸여지게 된다. 효소를 불잡기 위한 방법을 개발하기 위하여 많은 노력이 기울여져 왔으며, 지금도 활발히 진행되고 있다.산업적으로 중요한 고정화 공정은 글루코오스 이성질화효소를 유리구슬에 화학적으로 짝짓는 것이다. 때때로 효소자체를 고정화시키지 않고 그 효소를 가지는 세포를 고정화시킨다. 세포전체를 고정화시키는 방법은 효소를 정제할 필요가 없기 때문에 비용이 적게 들고, 때때로 효소가 세포안에 남게 됨으로써 보호되기도 한다.유전공학의 새로운 기술로 특정한 효소가 비정상적으로 고농도로 존재하는 세균이나 균세포의 생산을 가능하게 하고 있다.3. 고정화 효소의 식품 가공에서 이용분야미생물(Streptomyces sp, Bacillus coagulan중요하다.고정화 방법으로서는 공유결합, 이온결합, 물리적 흡착, 생화학적 특이결합 등에 의하여 불용성의 담체에 효소를 고정화하는 담체결합법, 효소분자끼리를 다관능성의 가교체로 결합시켜 불용화시키는 가교법, 저분자 화합물을 중합, 회합시키거나 혹은 고분자 화합물을 가용의 상태에서 불용의 상태로 옮기므로써 생기는 고분자 겔(격자형), microcapsule 혹은 한외여과막내에 효소나 균체를 밀페시키는 포괄법 그리고 이것을 적당히 조합시킨 복합법 등이 있다. 이들의 어떤 것은 미생물 균체나 세포 organelle의 고정화에도 사용된다.이들의 고정화법은 각기 장단점이 있고 목적에 따라 적당한 방법을 선택할 필요가 있다.이와 같이 고정화법에 사용되는 담체의 종류도 천연 고분자나 합성 고분자 또한 여러 무기물 등으로 이루고 있다. 또 사용되는 형상은 beads, block sheet, film, tube 천 등 여러가지가 있다.(1) 담체 결합법1> 공유결합법 ; 물에 불용성인 담체화 효소를 공유결합에 의해서 고체 촉매화한다.a. Diazo 법 p-aminobenzyl cellulose, polyamino polystrene, 아미노 혼합중성물과 같은 아미노기를 가지는 담체를 diazonium 화합물로 만들어 효소 단백을 diazo 결합시킨다b. peptide 법 CM-cellulose azide, carboxychloride 수지, isocyanite 유도체, 아미노산 혼성중합물등에 효소단백의 아미노기를 peptide 결합시킨다.c. Alkyl 화법 cyanurylcellulose, bromoacetyl cellulose, methacrylic acid-methacrylic acid-n-fluoranilide 혼성중합물의 할로겐과 효소단백의 아미노기, 폐놀기, SH기를 반응시킨다.2> 이온결합법a. DEAE-cellulose, CM-cellulose 이온 교환체나 이온교환 sephadex 또는 이온교환 수지에 효소를 이온 결합시켜서 고체 촉매화 하는 방법3> 물리적 흡질, 핵산, 다당류 등의 가수분해효소에서 그 예가 발견된다. 또 lipoamide dehydrogenase, catalase, D-amino acid oxidase의 경우와 같이 저분자 물질을 기질로 하는 반응에 있어서도 고정화함으로써 이들의 효소가 작용하려는 몇 개의 기질간의 상대속도가 변화하는 수도 있으며 고정화에 의하여 효소의 활성중심의 입체구조에 영향이 미치고 있다고 추측된다.특히 D-amino acid oxidase의 경우 효소 단백질의 amino기를 고정화에 사용할 것인가와 carboxy기를 고정화에 사용할 것인가에 따라 기질특이성에 차이가 나타나는 것은 흥미롭다. 또 고정화하여도 기질특이성이 거의 변화하지 않는 예도 수없이 보고되어 있다.7. 최적pH양이온성 또는 음이온성을 가진 담체를 고정화에 사용하는 경우 겉보기 최적 pH가 산성 측이나 알칼리성 측으로 이동하는 것은 당연히 예상되는 일이나 담체가 이온성이 아닐 때도 최적 pH의 차이가 관찰된다. 이 원인으로서는 담체의 활성화를 행할 때 결합된 관능기가 고정화에 사용하기 위해서 단백질 표면의 이온성이 변화하는 것으로 생각된다.또 효소반응의 과정에서 예로서 proton의 출입이 있을 경우에는 최적 pH의 이동이 있다. 어느 경우에나 고정화 효소의 유리 효소와 비교하여 최적 pH의 어느 예측도 할 수 없는 경우가 많다. 또 pH의 차이가 일어나지 않는 예도 많다.8. 최적온도고정화 특히 담체결합법에 의하여 고정화한 효소가 유리 효소에 비교하여 높은 반응 최적온도를 나타내는 예가 많이 보고되어 있으며 그의 차가 20 에 미치는 것이 있다. 그 유래는 고정화에 의하여 효소 단백질의 자유운동이 제약됨에 따라서 열이나 단백질 변성제에 의한 입체구조의 교환이 일어나기 어렵게 된 것으로 추정된다.이와 같은 자유운동의 제한은 활성중심에의 기질과 보인자의 접근 또는 결합을 어느 정도 일어나기 어렵게 하는 것이 효소활성 저하의 원인의 하나로 생각되나 고정화하여도 활성화 에너지는 거의 변화가 없는 예도 많이 알려져 고정화 균체의 예도 보고되어 있고 생화학적 입장에서 보아 생체촉매는 아주 불안정하다는 개념을 경우에 따라서는 바꿀 필요가 있다. 그러면서도 대개의 효소 고정화에 의하여 안정성이 증가하여도 불안정한 것도 사실이다.11. 고정화 효소와 고정화 균체의 이용효소나 미생물 균체의 고정화하는 궁극의 목적은 고정화 효소나 고정화 균체를 생화학의 기초면에서의 연구에 응용하는 것이고 또 유용 물질의 생산, 미량 물질의 분석정량, 의료 등의 응용면에 이용하는 것이다.기초면에서는 예로서 효소 분자끼리의 영향을 받으면서 subunit간의 해리 화합에 수반하는 활성의 변화를 고정화에 의하여 쉽게 조사할 수가 있고 또 기질, 보효소 effector 등의 결합이나 효과를 조사하는 것 등이 되지만 고정화법을 사용함으로써 비로소 밝혀진 효소의 성질도 몇 개가 있다. 또한 세포내에서 막이나 과립에 연결하거나 막에 싸여진 상태로 작용하는 효소의 성질을 가능한 한 생체내에 가까운 조건하에서 연구하는 것도 가능하다.실제면에서는 이미 공업화되고 있는 수종의 유용 물질의 생산을 위시하여 분석, 환경정화와 자원의 재활용 등의 응용을 위시하여 정력적인 연구가 진행되고 있다. 고정화 효소의 가장 큰 이용법의 하나는 연속효소반응이다.즉 고정화 효소는 보통 화학 합성반응에 사용되는 고체촉매와 같이 취급되어 이것을 칼럼에 충전하여 효소 칼럼으로써 사용하면 연속효소반응이 가능하고 자동화도 가능하다. 더욱 반응 종료액 중에는 단백질, 착색 물질 등의 협잡물이 들어 있지 않아 반응 생성물의 정제공정이 간단하고 수득율이 높아진다. 또 효소의 고정화(고체촉매화)에 의하여 안전성이 증가되어 장기간 사용될 수 있고 단위 효소당의 생산성이 증대하므로 공업적으로 효소반응을 행할 수 있는 것이 큰 이점이다.12. 고정화 aminoacylase를 사용한 L-amino acid의 연속제조법화학합성법에 의하여 얻어진 DL-amino acid에서 L-amino acid를 제조하는데는 아래의 반응을 촉매하는 aminoacylase를 사용있다.
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