결과 Lowry protein assay (단백질 정량 분석)

목차

1. Abstract

2. Experiment
1)실험기기 및 시약
2)실험방법

3. Result & Discussion
①결과
②보안

4. Conclusion

본문내용

1. Abstract
본 실험은 단백질 정량화 실험 방법 중에 Lowry method를 활용하여 미지의 단백질 시료의 단백질 농도를 파악하는 실험이다. UV-vis 분광광도계를 활용하여 파장에 변동에 따라 흡광도를 파악하고, 이 때, 기준이 되는 파장 변화 범위에서 최대 흡광도가 나타는 파장을 찾는다. 미지의 시료의 농도를 파악하기 위해서는 반드시 기존의 농도를 알고 있는 고단백질의 BSA를 활용하여 특정 농도에 따른 최대 흡광도와 그에 따른 파장을 찾아 기준 BSA curve를 우선 작성한다. 본 실험에서는..

<중 략>

2. Experiment
Ⓐ실험 기기 및 시약

①실험 시약
⒜BSA(Bovine Serum Albumine)
-고단백질의 시료로 일반적으로 소의 혈청에 있는 단백질을 이용하여 제작된다.
-실험과정 중, 변형이 거의 일어나지 않아 본 실험과 같은 단백질 정량 실험에 적합한 단백질 시료 용액이다.
-본 실험에서는 농도를 알고 있는 BSA를 희석시켜 서로 다른 농도의 BSA 용액을 제작하여 이를 활용하여 농도에 따른 최대 흡광도와 그에 따른 파장을 측정하여, 기준이 되는 BSA curve를 작성한다.

<중 략>

⒞Folin & Ciocalteu's Phenol reagent
-실험에서 사용하는 단백질 정량 실험법인 Lowry method에서 2단계 반응을 일으키는 물질이다.
-본 실험에서는 희석하지 않고 바로 사용한다.
-Lowry reagent에 의한 1단계 Biuret reaction 일어난 용액에 Folin & Ciocalteu's Phenol reagentf를 넣어 주면, 일정 시간 후에 용액의 색이 옅은 청색을 띈다.

참고자료

· 한국생산기술연구원(www.ecolab.re.kr)
· William L.Masterton Cecile N. Hurley Edward J.Neth, 화학교재연구회 옮김, 2014. 마스터톤의 일반화학(제7판), 사이플러스,347~361쪽
· McMurry Fay, 2013, 화학교재편찬위원회, 핵심 일반화학(제6판), 자유아카데미, 115~116쪽
· Gary D. Christian, 2008, 분석화학교재연구회, 분석화학(제6판), 자유아카데미, 578~585쪽
· Daniel C. Harris, 2017, Quantitative Chemical Analysis, 분석화학 제9판, P476~483
· 전현숙, 단백질 정량을 위한 형광 염료의 합성과 특성에 대한 연구, 성균관대학교, 6~9p 13p, 2004
· 화공기초 이론 및 실험2 실험 노트