Enhanced thermotolerance

소개

Enhanced thermotolerance

목차

Ⅰ. Abstract

Ⅱ. Introduction
1. Heat Shock Protein
2. Molecular Chaperon
Ⅲ. Materials
Ⅳ. Chemical reagent & Apparatus
Ⅴ. Methods
Ⅵ. Result
Ⅶ. Discussion
Ⅷ. Reference

본문내용

Ⅰ. Abstract
형질전환 된 세균은 항생제 배지에서 자랄 수 있었다. 형질전환 되었다는 것은 재조합된 플라스미드를 가지고 있다는 것이고, 이 플라스미드는 당근의 HSP17.7을 재조합 시킨 것이다. 이번 실험은 이 HSP17.7의 실제적인 발현을 알아보는 실험이다. 각각 0분, 30분, 60분의 열충격을 가한 다음, 아무 처리도 하지 않은 control과 재조합된 vector 세균의 생존률을 비교하는 방법을 이용하기로 했다. 각각 두 sample을 동등하게 overnight culture 한 다음 sample의 O.D.값을 맞춰준다. 그 후 IPTG를 넣고 실험시간에 다시 배양시킨다. 이제 각각 sample에 50℃의 고온 환경으로 일정한 시간의 열충격을 준다. 0분, 30분, 60분이 지난 sample을 serial dilution한다. 최종적으로 희석 배수가 10-3이 되게 하며 이것을 Amp이 함유된 평판배지에 도말한다. overnight culture한 plate에는 많은 E. coli가 자라있었다. 0분의 plate에는 control인 pET11a과 비교군인 pET11a containing carrot HSP17.7모두 많은 양의 콜로니가 발견되었다. 열충격이 주어지지 않은 상태이기 때문에 둘 다 많은 양의 균이 생존할 수 있었다. 30분의 plate에는 둘 다 0분 처리를 한 것 보다는 콜로니의 수가 줄었지만 아직도 많이 발견됨을 볼 수 있다. HSP를 포함한 pET11a이든 포함하지 않은 pET11a이든 많은 양이 열 가운데에서도 살아남았다. 60분 처리를 한 것은 눈에 띄게 확연히 콜로니의 수가 적었다. 또한 대조군과 비교했을 때 HSP를 포함한 pET11a가 조금 더 많이 살아남았음을 볼 수 있었다. 마지막 60분 처리 한 것을 비교해보면 HSP를 가지고 있는 E. coli가 더 생존률이 높다고 보여지고, 이러한 HSP은 다양한 어떤 기작으로 열 충격에 견딜 수 있는 역할을 한다고 알 수 있다.

참고자료

· 1) http://blog.naver.com/sjhkt27?Redirect=Log&logNo=80007454887
· 2) http://blog.daum.net/amhelf/2740818
· 3) http://bioscience.egloos.com/3928244
· 4) http://en.wikipedia.org/wiki/Heat_shock_protein
· 5) 분자생물학 제 2판 / 박상대 / 라이프사이언스 / 2003. 2. 21