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YADH 효소의 kinetics와 경쟁적 저해제의 영향2025.01.031. 효소 kinetics 이번 실험에서는 ethanol의 산화 반응을 촉매하는 YADH 효소에 대한 assay를 진행하였습니다. YADH 효소는 조효소로 NAD+가 필요하며, NAD+와 ethanol의 반응 결과로 ethanol이 산화됩니다. 실험에서는 ethanol과 구조적으로 유사한 2,2,2-trifluoroethanol을 competitive inhibitor로 사용하여 효소의 촉매 작용에 대한 저해제의 영향을 확인하고자 하였습니다. Lineweaver-Burk plot을 그려 Vmax, KM을 구하고, 초기속도, Vmax...2025.01.03
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Stenotrophomonas maltophilia 유래 Oleate Hydratase와 Alcohol dehydrogenase의 Enzyme cascade reaction2025.01.131. Stenotrophomonas maltophilia 유래 Oleate Hydratase Stenotrophomonas maltophilia 유래 Oleate Hydratase(SmOhyA)는 FAD를 cofactor로 사용하는 FAD-dependent enzyme으로, unsaturated fatty acids의 9-cis 위치 이중결합에 대해 선택적으로 수화반응을 일으키는 regioselective hydration을 촉매한다. SmOhyA는 특히 oleic acid에 가장 높은 특정 활성을 지니며, polyunsaturat...2025.01.13
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[만점 레포트] 연세대학교 생화학실험(1) 9주차 흡광광도법2025.05.041. absorption spectrophotometry 흡광광도법은 빛의 흡수 정도를 측정하여 물질의 농도를 분석하는 기술입니다. 이 방법은 320~800nm 범위의 파장에서 빛의 흡수를 측정하며, 흡광도(A)는 투과도(T)의 로그 값으로 계산됩니다. 베르-람버트 법칙에 따르면 흡광도는 물질의 농도, 경로 길이, 몰 흡광 계수의 곱에 비례합니다. 이를 이용하여 표준 검량선을 작성하고 미지 시료의 농도를 측정할 수 있습니다. 2. spectrophotometer 분광광도계는 특정 파장의 빛을 선택적으로 투과시켜 시료의 흡광도를 측정...2025.05.04
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LDH assay2025.01.231. 단백질 정제 실험 주제에서 다루고 있는 LDH assay는 단백질 정제 과정에 대한 내용을 포함하고 있습니다. 단백질 정제는 다양한 종류의 단백질이 섞여 있는 샘플에서 원하는 단백질을 분리하는 작업입니다. 크로마토그래피, SDS-PAGE, Western blot 등의 방법을 통해 단백질의 순도를 점차 높여나가는 과정이 설명되어 있습니다. 2. 효소 활성 측정 이 실험에서는 LDH(Lactate Dehydrogenase)라는 효소의 활성을 측정하는 방법에 대해 설명하고 있습니다. 효소 활성은 반응 속도, 특정 활성, 수율 등으로...2025.01.23
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Catalase 활성 측정 예비레포트2025.04.261. 카탈레이스 카탈레이스는 과산화 수소를 물과 산소로 분해하는 효소이다. 퍼옥시좀 내부에는 산화효소와 카탈레이스가 존재하여 1차적으로는 산화효소가 과산화수소를 생성하고, 2차적으로는 카탈레이스가 과산화수소를 물과 산소로 분해한다. 카탈레이스는 인체의 조직과 세포를 공격하고 산화시켜 세포노화를 촉진시키는 활성산소를 분해하며 그 찌꺼기를 해독시키는 작용을 한다. 카탈레이스는 간 속에 많이 존재하는데, 우리가 간의 주요기능으로 해독작용을 이야기하는 것은 바로 카탈레이스와 같이 몸애 해로운 물질을 빠르게 없애 주는 효소들이 간에 많이 들...2025.04.26
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일반화학실험 촉매 반응 main report 결과 레포트 (A+ 자료)2025.01.181. 촉매 반응 실험 과정과 결과에 대한 고찰- 촉매에는 활성화 에너지를 높여 반응 속도를 낮추는 부촉매와 활성화 에너지를 낮춰 반응 속도를 높이는 정촉매가 있다. 본 실험에서는 두 가지 종류의 정촉매를 이용하여 과산화 수소의 분해 반응 속도를 비교해서 생각해보았다. 두 촉매 모두 균일상의 촉매였으며, 각 촉매별로 반응을 진행할 때에 과산화 수소의 농도를 3가지로 달리 하여서 진행하였다. 2. KI 촉매 반응 과산화 수소에 KI를 넣어주면 새로운 경로의 2단계로 반응이 일어나며, 활성화 에너지가 76kJ/mol에서 47kJ/mol로...2025.01.18
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화공생물공학 단위조작실험1 Enzyme kinetic assay : Horseradish Peroxidase2025.01.151. Michaelis–Menten 방정식 Michaelis–Menten kinetics는 생화학분야에서 가장 잘 알려진 효소와 반응속도론에 관한 모델 중 하나이다. 이 식을 Michaelis–Menten 식이라고 부르며, 단일 기질-효소 촉매반응의 속도식의 기본이 된다. 효소 반응속도론은 효소(E)-기질(S)의 복합체[ES] 형성단계의 가역반응과 ES 복합체의 비가역 해리단계의 2단계의 반응체계로부터 구할 수 있다. 빠른 평형 가정이나 유사 정상상태 가정을 통해 Michaelis-Menten 속도식을 유도할 수 있다. 2. 효소 ...2025.01.15
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생화학 14단원 효소의 조절 요약정리2025.04.301. Allosteric 효소 Allosteric enzyme이란 substrate가 결합하는 active site 외에 다른 물질이 binding할 수 있는 다른 곳이 있는데 거기에 다른 물질이 결합함으로서 enzyme의 activity를 조절하는 형태의 enzyme을 말한다. 다른 물질이 결합하는 곳을 allosteric site 또는 regulatory site라고 부른다. 다른 물질이 enzyme의 activity를 저해하는 경우 그 물질을 allosteric inhibitor라고 부른다. Allosteric enzyme은 ...2025.04.30
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생화학 11단원 효소와 저해제 요약정리2025.04.301. Reversible and Irreversible Inhibitors Irreversible inhibitor의 경우 covalent 또는 non-covalent bond로 enzyme에 강력하게 결합하므로 enzyme으로부터 떨어져 나오는 시간이 매우 오래 걸린다. 반면 reversible inhibitor의 경우 enzyme과 결합한 후 해리가 빠르게 일어난다. 2. Competitive Inhibition Competitive inhibition의 경우 inhibitor는 substrate와 경쟁적으로 active sit...2025.04.30
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식품공학실험4-7주차(살균 kinetic)2025.01.131. 맥주 부패균 Lactobacillus curvatus의 열적 사멸 특성 이번 실험에서는 맥주 부패균(spoilage bacteria)의 열적 사멸 지표를 맥주와 MRS 액체 배지에서 결정하고 맥주와 MRS 액체배지에서의 Lactobacillus curvatus의 열적 사멸 지표의 차이를 알아볼 수 있다. 또한 미생물 사멸 kinetics는 균의 종류 및 Matrix에 따라 달라진다는 것을 확인할 수 있다. 2. 가열 살균법과 D-value, Z-value 가열 살균이란 가열에 의해 미생물을 죽이는 것이다. 식품의 부패를 막기 ...2025.01.13
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