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DNA 연결 및 형질전환 실험 예비2025.11.131. DNA Ligation (DNA 연결) DNA 연결은 DNA ligase 효소를 이용하여 두 개의 DNA 분자를 공유결합으로 연결하는 과정입니다. 제한효소로 절단된 DNA의 5' 인산기와 3' 수산기 사이의 포스포디에스터 결합을 형성하여 DNA 분자를 연결합니다. 이 과정은 재조합 DNA 기술에서 벡터와 삽입 DNA를 연결하는 데 필수적인 단계입니다. 2. Transformation (형질전환) 형질전환은 외부에서 도입된 DNA가 세포 내로 들어가 세포의 유전자형을 변화시키는 과정입니다. 박테리아의 경우 화학적 방법이나 전기천...2025.11.13
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플라스미드 DNA 분리 실험 결과 및 분석2025.11.141. 플라스미드 DNA 플라스미드 DNA는 이중가닥 DNA가 원형으로 된 것으로 숙주세포의 염색체와는 독립적으로 복제되는 분자이다. 대부분의 세균에 존재하고 효모 등 일부 진핵세포 생물 내에도 존재한다. 세균 내 플라스미드를 세포 밖으로 빼내고 제한효소로 자른 뒤 필요로 하는 유전자를 삽입하여 다시 세균에 넣어 배양할 수 있어 벡터 DNA로 불린다. 2. 알칼리 용해 방법 플라스미드 DNA 추출에 사용된 용해 방법으로, 높은 pH의 알칼리성 음이온 계면활성제를 이용하여 대장균 세포를 용해시키고 플라스미드 DNA를 염색체 DNA와 분...2025.11.14
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식물분자생물학실험 Plant genomic DNA extraction 결과보고서2025.01.181. DNA purification DNA extraction이라고도 불리는 DNA purification은 DNA를 각종 시료에서 얻어낸 sample로부터 추출하고, 물리적, 화학적 방법을 이용하여 DNA만 정제하는 방법을 말한다. 이를 위해 cell을 녹이고, 불필요한 다른 물질을 제거하는 과정이 필요하다. 대표적인 DNA purification 방법으로 organic extraction (phenolchloroform method), nonorganic method (salting out and proteinase K trea...2025.01.18
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식물분자생물학실험 Plant Transformation 결과보고서2025.01.181. Floral-dipping method Floral-dipping method는 Arabidopsis를 간단하게 형질 전환하는 방법 가운데 하나이며 1993년 Bechtold et al.(1)의 논문을 통하여 제안되었다. 이 방식은 대부분의 형질 전환된 자손에서 유전적 균일성을 확보할 수 있으며, 조직 배양 및 재생과 관련된 체세포 변이가 최소화된다는 장점이 있다. 이 방법의 주요 단점은 단 하나의 식물 종인 Arabidopsisthaliana에 대해서만 정상적으로 작용한다는 것으로, 다른 식물종에 이 방식을 활용하지못한다는 ...2025.01.18
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식품생화학 RNA 및 단백질의 합성2025.05.071. RNA 합성 RNA 합성은 DNA에 저장된 유전정보를 이용하여 이루어지며, RNA 중합효소, DNA 주형, 전구체(NTP), 금속이온 보조인자가 필요합니다. RNA에는 리보솜 RNA(rRNA), 전령 RNA(mRNA), 전달 RNA(tRNA)가 있으며, RNA 합성은 개시, 연장, 종결의 과정을 거칩니다. 2. 전사의 조절 원핵생물의 유전자 발현은 오페론이라는 유전자 집단으로 조절되며, lac 오페론은 락토스 대사와 관련된 유전자들로 구성되어 있습니다. 락토스 유무에 따라 lac 오페론의 활성이 조절됩니다. 3. 진핵생물의 유...2025.05.07
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Western blot 보고서2025.05.071. Western blot Western blot은 특정 단백질을 검출하는 기법으로, 단백질 혼합물을 전기영동으로 분리하고 membrane에 옮긴 후 항원-항체 반응을 이용하여 목표 단백질을 찾아내는 방법이다. 이 과정에는 샘플 준비, 전기영동, blotting, 검출 등의 단계가 포함된다. 2. 단백질 분리 단백질 혼합물은 SDS-PAGE를 통해 크기에 따라 분리된다. SDS는 단백질의 이차, 삼차 구조를 풀어 단백질이 분자량에 따라 이동할 수 있게 한다. 전기영동 후 단백질은 membrane으로 옮겨진다. 3. 항원-항체 반응...2025.05.07
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[A+ 리포트] Gel Extraction / Digestion & Purification (분자생물학실험)2025.04.251. Gel Extraction 겔 전기영동 과정으로부터 얻은 DNA 조각을 순수한 형태로 정제할 수 있다. 겔 추출로 얻은 순수한 DNA 조각을 제한효소를 이용하여 특정 부위를 잘라낼 수 있다. 2. Digestion 제한효소를 이용하여 Gel Extraction 산물로 얻은 DNA 조각을 특정 부위에서 절단할 수 있다. 제한효소 처리 시 주의사항으로는 제한효소 용액의 표면에서 취하고 강한 충격을 피하는 것이다. 3. Purification Digestion이 완료된 DNA 조각을 PB buffer, PE buffer 등을 이용하...2025.04.25
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DNA의 구조와 기능 발견2025.01.291. DNA 구조 발견 1953년 DNA(디옥시리보핵산) 구조의 발견은 지금까지 가장 중요한 과학적 혁신 중 하나입니다. 이 발견은 생명의 구성 요소를 이해하는 열쇠를 제공했으며 유전 정보가 어떻게 저장되고 전달되는지 설명했습니다. 영국인 프랜시스 크릭과 미국인 제임스 왓슨은 이 발견으로 유명해졌으며, 이들의 연구 결과는 오늘날에도 여전히 큰 반향을 불러일으키고 있습니다. 2. DNA의 이중나선 구조 DNA는 두 개의 길고 가는 가닥이 서로 감겨 꼬인 사다리 모양을 닮은 분자로, 이중나선이라고 알려져 있습니다. 사다리의 측면은 데옥...2025.01.29
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제한효소를 이용한 DNA 절단 및 전기영동법과 PCR에 의한 DNA 분리 및 확인2025.01.071. PCR PCR의 기본 원리는 DNA를 단일가닥으로 열변성시킨 후 올리고뉴클레오티드를 결합시키고 DNA 중합효소로 DNA를 합성하는 과정을 반복하여 DNA를 증폭하는 것입니다. PCR에 필요한 주요 요소로는 주형 DNA, 시발체, dNTPs, Taq 중합효소, MgCl2 등이 있으며, 이들의 농도와 반응 조건을 최적화하는 것이 중요합니다. PCR 산물은 전기영동으로 확인할 수 있습니다. 2. 전기영동 전기영동은 DNA 분자의 크기와 전하에 따라 이동 속도가 달라지는 원리를 이용하여 DNA 단편을 분리하는 기술입니다. 아가로스 겔...2025.01.07
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DNA 연결 및 형질전환 실험 결과2025.11.131. DNA Ligation (DNA 연결) DNA 연결은 DNA 단편들을 DNA 리가제 효소를 이용하여 공유결합으로 연결하는 분자생물학 기법입니다. 이 과정에서 플라스미드와 목적 유전자의 양 끝에 있는 인산디에스터 결합을 형성하여 재조합 DNA를 만듭니다. 적절한 온도와 시간 조건에서 수행되며, 연결 효율은 DNA 농도, 리가제 양, 반응 시간 등에 영향을 받습니다. 2. Transformation (형질전환) 형질전환은 재조합 DNA를 숙주 세포(주로 박테리아)에 도입하는 과정입니다. 화학적 형질전환이나 전기천공법 등의 방법으로...2025.11.13
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