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PCR 기술을 이용한 PCR product 전기영동 확인2025.01.031. PCR 기술 PCR(Polymerase Chain Reaction)은 DNA 복제를 위한 기술로, DNA 주형, 프라이머, DNA 뉴클레오타이드, Taq DNA 중합효소, DNA 중합효소 완충용액 등을 이용하여 DNA를 증폭시킨다. 이 실험에서는 PCR을 통해 유전자를 확보하고, 전기영동을 통해 증폭된 DNA를 확인하며, PCR 뉴클레오타이드를 정제하는 과정을 수행한다. 2. 전기영동 전기영동은 아가로스 겔과 같은 고분자 물질로 된 겔을 이용하여 핵산이나 단백질을 분리하는 기술이다. 핵산은 음전하를 띠므로 양극 쪽으로 이동하며...2025.01.03
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식물분자생물학실험 Agrobacterium Transformation 결과보고서2025.01.181. Agrobacterium competent cell (GV3101) GV3101은 Agrobacterium tumefaciens Chemically Competent Cell의 일종으로, 애기장대, 담배, 옥수수, 감자 등의 식물을 형질 전환하는데 사용될 수 있다. 여기에는 screening을 위한 rifampicin resistant gene (rif)이 미리 포함되어 있으며, gentamicin resistance gene 과 vir gene을 포함한 Ti plasmid를 운반할 수 있다. 2. Freeze-Thaw met...2025.01.18
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식물에서의 DNA 추출 실험2025.11.121. DNA 추출 실험 방법 딸기를 시료로 사용하여 DNA를 추출하는 실험을 수행했다. 세제 2스푼, NaCl 2스푼과 물 200ml을 혼합한 용액을 준비하고, 냉동 딸기를 으깬 후 용액을 넣어 10분간 반응시켰다. 거즈로 용액을 거른 후 나무젓가락을 세우고 80% 에탄올을 조심스레 흘려주면 흰색 실타래 같은 형태의 DNA를 관찰할 수 있다. 딸기는 다른 식물에 비해 상대적으로 손쉽게 DNA를 추출할 수 있고 단시간에 많은 양의 DNA를 확인할 수 있어 시료로 선택되었다. 2. DNA 추출 시약의 역할 딸기를 으깬 이유는 식물세포의...2025.11.12
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Agarose gel 제작 및 DNA 전기영동 실험2025.11.181. DNA 전기영동(Electrophoresis) DNA 전기영동은 DNA가 음전하를 띠고 전기장에서 양극으로 이동하는 원리를 이용한 분석 기법이다. Agarose gel 매질에서 DNA는 크기에 따라 다른 속도로 이동하여 분리된다. TAE buffer를 사용하며, Tris는 양이온을 공급하고 Acetate는 pH를 조절하며 EDTA는 DNase를 억제한다. DNA의 이동속도는 크기, 형태, gel 농도, 전압, buffer 성분에 영향을 받는다. 2. Agarose gel 제작 1% Agarose gel은 1X TAE 용액 35...2025.11.18
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플라스미드 DNA 추출 및 분석 실험 보고서2025.11.171. 플라스미드 플라스미드는 세균의 세포 내에 복제되어 독자적으로 증식할 수 있는 염색체 이외의 DNA 분자이다. 세균의 생존에 필수적이지는 않으며 비교적 크기가 작고 세포 상호간에 전달이 잘 된다. 복제 원점을 가지고 있어 복제가 가능하며 유전자가 있다면 정상적으로 발현된다. 접합 과정이나 직접 세포막을 통해 다른 세균에게 전달될 수 있어 세균의 유전적 다양성을 높여준다. 2. 플라스미드 추출 원리 플라스미드 추출은 플라스미드를 제외한 세균의 다른 부분을 제거하는 것으로, 특히 플라스미드와 염색체 DNA를 분리하는 것이 중요하다....2025.11.17
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PCR(중합효소연쇄반응) (한글버전)2025.05.151. PCR(Polymerase Chain Reaction) PCR은 짧은 시간에 single strand DNA 분자를 수백만 개의 복사본으로 증폭시키는 생화학적 과정을 이용한 기술입니다. PCR 과정은 Denaturation, Annealing, Extension의 3단계로 진행됩니다. DNA polymerase는 PCR의 주요 구성 요소로 단일 가닥 DNA 주형에 새로운 DNA 가닥을 합성합니다. Thermal cyclers는 PCR의 온도를 순환하고 시간을 자동화하는 기기입니다. PCR 실험을 위해서는 primer 디자인, ...2025.05.15
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제한효소를 이용한 플라스미드 DNA 검증 실험2025.11.151. 제한효소(Restriction Enzyme) 제한효소는 특정 DNA 서열을 인식하여 절단하는 단백질로, 분자생물학 실험에서 DNA 분석 및 조작에 필수적으로 사용된다. 본 실험에서는 EcoR1 제한효소를 사용하여 플라스미드 DNA를 절단하고, 삽입된 DNA의 위치와 크기를 확인하는 데 활용된다. 제한효소는 특정 인식 부위에서만 작용하므로 정확한 DNA 구조 분석이 가능하다. 2. 플라스미드 DNA 검증 Mini-prep 방법으로 획득한 DNA가 실제 플라스미드 DNA인지 확인하는 과정이다. 제한효소를 이용한 제한 소화(Rest...2025.11.15
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식물병의 진단방법에 대해 간략히 설명하라2025.01.251. 육안 검사 육안 검사는 식물병 진단의 가장 기본적인 방법이다. 이 방법은 식물의 외형적인 변화를 관찰하는 것으로, 주로 잎, 줄기, 뿌리 등의 변색, 반점, 궤양 등을 확인하는 데 초점을 맞춘다. 육안 검사는 간단하고 비용이 적게 든다는 장점이 있지만, 병원체를 정확하게 동정하는 데는 한계가 있다. 여러 종류의 병원체가 비슷한 증상을 나타낼 수 있기 때문에 경험과 지식이 필요하다. 또한 주로 병의 증상이 이미 나타난 후에야 가능하기 때문에 조기 진단에는 한계가 있다. 2. 현미경 검사 현미경 검사는 식물의 조직을 현미경으로 관...2025.01.25
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DNA 분리2025.01.161. DNA 구조 DNA는 인산, 당, 염기가 1:1:1의 비율로 결합한 뉴클레오타이드의 결합체이며, 2개의 폴리뉴클레오타이드가 이중 나선 구조를 이루고 있다. DNA 가닥은 인산이 가장 바깥쪽에 위치하고 있으며, 4가지 질소 염기(A, T, G, C)가 수소결합으로 쌍을 이루고 있다. 2. 중심원리 DNA를 주형으로 하여 RNA를 합성하는 전사 과정과, 전사된 mRNA가 단백질로 번역되는 과정으로 구성된다. 원핵세포의 경우 전사와 번역이 동시에 일어날 수 있다. 3. DNA 추출 원리 세포 및 조직을 파괴하고 단백질을 변성시킨 후...2025.01.16
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플라스미드 DNA 추출 및 전기영동 실험2025.11.181. 플라스미드 DNA 플라스미드는 세균의 세포 내에 염색체와 별개로 존재하면서 독자적으로 증식할 수 있는 DNA 분자이다. 생장에 필수적인 유전자는 아니지만 특정 환경에 생존하기 위해 중요한 기능을 수행한다. 유전공학에서 제한효소로 끊은 후 필요한 유전자를 삽입하여 유전자재조합 기술에 광범위하게 이용된다. 1kb에서 1Mb의 다양한 크기로 존재하며 대부분 환형이고, 세포에서 분리한 플라스미드는 초나선형으로 존재한다. 2. DNA 추출 및 정제 방법 E.coli 세균으로부터 플라스미드를 추출하기 위해 여러 버퍼를 순차적으로 사용한다...2025.11.18
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