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Protein Electro-transfer and Western blot2025.01.231. Western blotting Western blotting은 단백질에 대한 blotting 기술을 뜻하며, 항원-항체 반응을 이용한다. 단백질 혼합물을 polyacrylamide gel에서 SDS-PAGE를 이용하여 크기에 따라 분리하고 membrane으로 electro-transfer하여 흡착시킨 후 membrane 표면에서 항체를 이용하여 원하는 단백질의 존재를 확인하는 전반적인 과정을 의미한다. 2. SDS의 역할 및 원리 SDS-PAGE는 SDS가 단백질에 일정 간격으로 결합하여 charge density를 일정하게 ...2025.01.23
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Gel 제조 (SDS-PAGE 실험을 위한 사전 준비) 보고서2025.01.131. 전기영동 전기영동은 DNA와 단백질과 같은 생체 고분자들을 분리 및 정제하는 방법입니다. 전기영동 원리는 음전하를 띄고 있는 생체고분자(DNA/단백질)들에게 전기적 힘(-음전하 ->＋양전하)을 가해주어, 물질이 사이즈에 따라 분리되는 것입니다. DNA 전기영동과 단백질 전기영동(SDS-PAGE)의 차이는 DNA는 음전하를 띄고 있어 Agarose(한천) Gel에서 관찰할 수 있지만, 단백질은 양, 음전하를 갖고 있어 SDS-sample buffer와의 혼합이 필요하며 Poly Acrylamide gel에서 관찰할 수 있습니다....2025.01.13
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세포 배양 시 배지 교체 방법2025.01.081. 세포 배양 세포 배양은 생명체를 구성하는 조직으로부터 세포를 분리한 후 체외(in vitro) 환경에서 배양하는 것을 의미한다. 세포를 지속해서 배양하기 위해서는 세포를 떼어내어 세포 현탁액으로 만들고, 희석하여 새로운 배양용기에 plating하게 되는데 이를 계대배양(subculture)이라고 한다. 세포 배양에서 media 교체는 세포의 생존에 중요한 영향을 미치는데, 이는 media에 영양소가 풍부하게 들어있어 세포 증식에 필수적이며, 동시에 세포의 대사 활동으로 인해 발생한 노폐물이 배출되어야 하기 때문이다. 2. PB...2025.01.08
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OP Amp의 기본 응용 회로2025.11.131. Voltage Follower Voltage Follower 회로는 출력 전압 신호와 입력 전압 신호가 항상 같은 특성을 가진다. 이 회로는 다른 회로에 부하 저항을 연결할 때 부하 저항이 미치는 영향을 최소화하기 위해 사용된다. Buffered RC low-pass 필터에서 low-pass 필터와 부하 저항 사이에 voltage follower를 연결하면, 필터의 출력과 부하 저항 양단의 전압이 항상 같게 되며, Op amp 입력 단자에는 전류가 흐르지 않아 부하 저항이 필터에 끼치는 영향을 제거할 수 있다. 2. Integ...2025.11.13
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전기 영동을 통한 DNA 분리 실험2025.05.011. 전기 영동 전기 영동은 물질을 분리하는 실험 방법의 한 종류로, 전기장을 걸어준 환경에서 물질들의 이동한 거리의 차이를 이용하여 물질을 구분하는 것이다. 전기 영동의 종류에는 Zone 전기 영동, 등전점 전기 영동, 겔 전기 영동 등이 있다. 겔 전기 영동은 전류를 흘려주어 전하를 띤 분자가 겔 내부에서 이동하여 분리되도록 하는 기법이다. 2. Agarose gel Agarose gel은 agarose 분자가 교차되어 있는 형태로, 3차원적인 그물 구조를 띤다. Agarose gel 내부에는 분자가 통과할 수 있는 구멍이 있어...2025.05.01
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Gel extraction & TA cloning 실험 보고서2025.11.171. Gel Extraction Agarose gel 전기영동으로 확인한 PCR product를 gel 상에서 분리 및 정제하는 기술이다. FADF buffer를 이용해 gel을 용해한 후, silica membrane을 가진 column에 DNA를 결합시키고 wash buffer로 불순물을 제거한 후 ddH2O로 elution하는 과정으로 진행된다. Chaotropic salt가 포함된 FADF buffer는 silica membrane의 O-와 DNA의 인산기 사이에 cation bridge를 형성하여 DNA 부착을 가능하게 한...2025.11.17
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SDS-PAGE 이론2025.05.071. SDS-PAGE SDS-PAGE는 Sodium Dodecyl Sulfate- Polyacrylamide gel electrophoresis의 약자이다. SDS는 음이온성 계면활성제의 일종으로 단백질의 가용화제로서 이용되고 있으며 단백질의 전기영동에서 SDS-PAGE법이 가장 일반적인 방법으로 이용된다. SDS-PAGE의 원리는, 단백질을 구성하는 아미노산에 의해서 +,- 상관없이 어느쪽이건 전하를 띄지만 SDS가 결합함으로써 일시적으로 단백질이(-)하전을 띄어 모든 분자를 양극으로 이동시키고, gel의 pore 사이즈에 의해서...2025.05.07
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pH 미터 측정 실험2025.01.121. pH pH는 물의 산성이나 알칼리성의 정도를 나타내는 수치로서 수소 이온 농도의 지수이다. 물(수용액)은 그 일부가 전리하여 수소 이온(H+)과 수산 이온(OH-)이 공존하며, H+농도와 OH-농도가 동일하면 중성(pH7)이고, H+가 많으면 산성(중성보다 낮은 pH), OH- 쪽이 많으면 염기성(중성보다 높은 pH)으로 된다. 2. pH 미터 pH 미터는 사용 전에 먼저 유리전극을 물에 몇 시간 동안 넣어 두어야 한다. 사용할 때는 pH 미터의 전원을 켠 후 잠시 기다렸다가 유리전극을 물로 씻고 살짝 닦아낸다. pH 미터의 ...2025.01.12
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아가로스겔 전기영동을 이용한 플라스미드 클로닝 확인2025.11.151. 아가로스겔 전기영동 Restriction digestion 및 uncut plasmid를 통해 클로닝 여부를 확인하는 실험 방법입니다. 아가로스겔을 이용하여 DNA 샘플을 전기영동으로 분리하고, band shift 및 insert 유무를 관찰하여 클로닝 성공 여부를 판단합니다. 1X TAE buffer에 아가로스를 녹여 겔을 만들고, EtBr을 첨가한 후 DNA 샘플을 로딩하여 110V에서 전기영동을 수행합니다. 2. 플라스미드 클로닝 검증 Restriction digestion으로 처리된 DNA와 uncut plasmid를 ...2025.11.15
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서강대학교 23년도 마이크로프로세서응용실험 6주차 Lab06 결과레포트 (A+자료)2025.01.211. Subroutines 실험에서는 subroutine의 호출 및 복귀와 관련된 명령어들의 동작을 이해하고, stack의 활용법과 push, pop 명령어, subroutine에서의 stack의 역할을 학습했습니다. 또한 subroutine으로의 parameter 전달 방식을 이해하고, 개별적인 파일에 작성된 subroutine의 assemble, compile 및 link를 위한 directive의 역할을 이해했습니다. 2. Stacks 실험에서는 LIFO(last-in first-out) 개념을 갖는 stack 메모리 영역의 ...2025.01.21
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