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미생물 분류학 실험보고서: 16S rRNA를 이용한 미생물 동정2025.11.151. 미생물의 순수배양 및 분리 방법 미생물 순수배양은 한천배지에서 단일 종만 존재하는 상태에서 배양하는 과정입니다. 도말평판법은 백금으로 균을 찍어 평판배지 위에서 지그재그로 연속 도말하여 균의 수를 점진적으로 감소시키는 방법이고, 주입평판법은 희석한 시료를 45℃의 한천배지와 섞어 배양하는 방법입니다. 표면도말법은 희석된 시료를 한천배지에 도말하여 집락을 측정하는 방법으로, 액체배지에서는 희석법을 사용하여 연속적으로 희석된 배지에 접종합니다. 2. 중합효소연쇄반응(PCR)과 16S rRNA 분석 PCR은 특정 표적 유전물질을 증...2025.11.15
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DNA 제한효소 실험 결과 분석2025.11.161. 제한효소(Restriction Enzyme) DNA 제한효소는 특정 염기서열을 인식하여 DNA를 절단하는 효소이다. 실험에서 사용된 EcoRI는 5'-GAATTC-3' 서열을, HindIII는 5'-AAGCTT-3' 서열을 인식하여 각각 절단한다. 이들 효소는 분자생물학 연구에서 DNA 조작의 기본 도구로 사용되며, 특정 위치에서만 DNA를 절단하는 특이성을 가진다. 2. 전기영동(Electrophoresis) 전기영동은 DNA 절편을 크기별로 분리하는 기술이다. 실험에서는 아가로스 겔을 사용하여 제한효소로 절단된 DNA 절편...2025.11.16
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Reverse Transcription PCR 보고서2025.05.131. PCR의 정의 PCR은 Polymerase chain reaction으로 중합효소 연쇄반응을 말한다. DNA 분자 상에서 어떤 부분만의 염기서열을 증폭시켜 적은 양의 DNA로도 PCR을 통해 많은 DNA copy를 만들어 낼 수 있다. 2. PCR의 원리 및 방법 PCR은 DNA 가닥을 분리하고, primer가 주형가닥의 상보적인 염기서열에 결합하도록 한 후, Taq polymerase에 의해 새로운 DNA 가닥이 합성되는 과정을 반복하여 많은 DNA 단편을 복사해 내는 기술이다. 3. PCR의 이용 PCR은 의학적 진단, 유...2025.05.13
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PCR 기법을 이용한 DNA 복제와 DNA 전기영동 실험 보고서2025.05.141. PCR (중합효소 연쇄 반응) PCR은 1983년 K.B.Mullis에 의해 고안된 방법으로, 검출을 원하는 특정 표적 유전자를 증폭하는 기술이다. PCR을 통해 미량의 DNA 시료에서 목적 DNA 영역을 수시간에 20만~50만배로 증폭할 수 있으며, 이는 현재 유전물질을 조작하는 거의 모든 과정에서 사용되고 있다. PCR은 인간의 DNA를 증폭하여 유전질환을 진단하거나, 세균이나 바이러스의 DNA를 증폭하여 감염성 질환을 진단하는 데 사용될 수 있다. 2. DNA 전기영동 DNA 전기영동은 크기, 전하 또는 구조가 다른 DN...2025.05.14
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DNA - EtBr 염색, Methylene blue 염색2025.05.111. DNA 구조 DNA는 이중나선 구조로 구성되어 있으며, 두 가닥의 DNA가 거의 공통된 축의 주위를 오른쪽으로 감고 있다. 이 구조는 DNA에 있는 화학 결합이 비틀림을 만들어내며, 그 결과 안정성을 가지게 해준다. 또한 이중나선 구조 안쪽에 있는 염기를 보호하기에 적절하다. 최근에는 다양한 유전자 치료법에서 잘못된 염기서열을 교정할 때 두 가닥의 상보성을 활용하기도 한다. 2. DNA 염색 방법 DNA 염색 방법에는 EtBr(Ethidium bromide)과 Methylene blue 염색 방법이 있다. EtBr은 DNA의 ...2025.05.11
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Plasmid DNA의 제한효소 절단 및 전기영동2025.01.221. 플라스미드 DNA 플라스미드는 vector의 한 종류로, 염색체와는 독립적으로 존재하는 원형의 DNA이다. 스스로 복제할 수 있고, 유전될 수 있으며 외부의 유전자를 포함해 전달될 수 있다. 2. 제한효소 제한효소는 DNA를 자를 수 있는 효소를 말하는데, DNA 분자의 특정한 염기서열에 결합해 DNA를 절단한다. 이렇게 절단된 DNA 조각은 전기영동을 통해 분리될 수 있다. 3. 전기영동 전기영동은 슬러리 내의 전하를 가진 입자들에 전기를 가하게 되면 각자 가진 전하의 반대되는 극성을 띠는 쪽으로 이동하는 현상을 말한다. 이...2025.01.22
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미생물학 분류 및 식별 기법2025.11.171. 미생물 분류학(Taxonomy) 미생물 분류학은 식별(identification), 분류(classification), 명명법(nomenclature)의 세 가지 영역으로 구성된다. 식별은 유기체의 특징을 나타내는 과정이고, 분류는 비슷하거나 관련 있는 집단끼리 유기체를 배열하는 과정이며, 명명법은 이름을 할당하는 것이다. 3역 6계 체계에서는 16S rRNA 염기서열 분석을 바탕으로 bacteria, archaea, eukarya 세 가지 영역으로 모든 유기체를 분류한다. 2. 박테리아 식별 기법 박테리아 식별에는 이분법적 ...2025.11.17
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형질 전환 실험: 원핵 세포의 유전자 조작2025.11.141. 형질 전환(Transformation) 형질 전환은 외부에서 만들어진 plasmid를 plasmid가 없는 원핵 세포에 삽입하여 새로운 유전형질을 나타내게 하는 과정입니다. 제한효소를 이용하여 plasmid의 특정 부위를 절단하고 원하는 염기서열을 삽입합니다. Competent cell을 CaCl₂로 처리하여 외부 DNA를 쉽게 받아들일 수 있는 상태로 만들고, 42°C heat-shock과 ice bucket 처리를 통해 plasmid를 세포 내로 도입합니다. 이 과정은 인슐린 생산 등 의약품 개발에 광범위하게 활용됩니다. ...2025.11.14
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유전자 클러스터와 반복배열2025.05.101. 유전자 클러스터 유사하거나 동일한 유전자가 이웃하여 배열되어 있는 것을 의미합니다. rRNA 유전자가 대표적인 예로, 45S 전구체 rRNA 유전자가 여러 개 존재하는 유전자 클러스터를 이룹니다. 이러한 유전자 클러스터는 unequal crossing over에 의해 유전자 수가 변화될 수 있으며, 이는 질병 발생의 원인이 될 수 있습니다. 2. 반복배열 매우 짧은 염기서열이 커다란 클러스터 안에 여러 번 반복되는 것을 의미합니다. 이러한 반복배열은 satellite DNA라고 불리며, 주로 heterochromatin 영역에...2025.05.10
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생화학 실험/실습 보고서 (DNA Gel electrophoresis)2025.01.231. 제한효소 제한효소는 DNA의 특정한 염기배열을 식별하고 이중사슬을 절단하는 엔도뉴클레아제로서 재조합 DNA를 만들기 위해서 사용하는 특수한 효소이다. 제한효소의 종류에는 1형, 2형, 3형, 4형, 5형 등이 있으며, 각각 인식하는 염기서열과 절단 방식이 다르다. 하나의 플라스미드는 여러 제한효소에 의해 자를 수 있다. 2. 전기영동 Agarose gel에서의 DNA pattern은 smear, 용해되지 않은 물질과 고분자량의 DNA, RNA cloud, supercoiled plasmid, relaxed 또는 nicked c...2025.01.23
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