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제한효소를 이용한 DNA 절단 및 전기영동 실험2025.11.171. 제한효소(Restriction Enzyme) 제한효소는 DNA를 특정 염기서열에서 절단하는 효소로, 클로닝 벡터와 삽입 DNA의 적절한 제한효소 부위 결정이 중요합니다. 각 제한효소는 서로 다른 특성을 지니며 최적온도(25℃~64℃)와 최적 완충용액 상태에서 절단반응을 수행해야 합니다. 활성단위 1U는 특정 제한효소 자리를 가진 1μg DNA를 1시간 내에 절단할 수 있는 효소의 양입니다. Type I, II, III으로 구분되며, 실험실에서는 주로 특이성이 높은 Type II를 사용합니다. 2. DNA 절단 말단(Sticky...2025.11.17
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[생화학실험] (A+) Plasmid DNA isolation and characterization by electrophoresis2025.05.031. DNA DNA(Deoxyribo Nucleic Acid)는 뉴클레오타이드의 중합체인 두 개의 긴 가닥이 서로 꼬여있는 이중나선 구조로 되어있는 고분자화합물이다. DNA는 4종류의 뉴클레오타이드가 중합 과정을 통해 연결된 가닥으로 이루어져 있으며, 이 가닥은 Cytosine, Guanine, Adenine, Thymine은 독특한 핵염기(nucleobase)로 구분되기 때문에 흔히 DNA 염기서열이라고 부른다. DNA 염기서열은 유전정보를 나타내는 유전자 구간과 그렇지 않은 비부호화 DNA 구간으로 나눌 수 있다. 2. 재조합 ...2025.05.03
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서울대 생물학실험 A+ 실험 보고서 32025.05.101. DNA 클로닝과 형질전환 DNA 클로닝은 원하는 DNA 조각을 복제하여 여러 개의 DNA 복사본을 얻는 과정을 의미합니다. 이를 위해 DNA 조각은 벡터라고 불리는 DNA 분자와 재조합되는 과정을 거치며, DNA 조각은 클로닝하고자 하는 유전자나 특정한 염기 서열을 포함하고 있습니다. 일련의 과정 후 복제된 클론은 세포에 삽입되며, 복제 및 유전자 발현에 이용됩니다. 이렇듯 외부 DNA가 도입되며 세포의 유전 형질에 변화가 생기는 경우를 형질 전환이라 일컫는데, 일반적으로 형질 전환에는 plasmid 벡터가 사용됩니다. 2. ...2025.05.10
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생물의 분류-분자계통분류 실험 보고서2025.05.141. 생물의 분류 이번 실험에서는 5s ribosomal mRNA nucleotide sequence를 사용하여 계통수를 그렸다. 5S rRNA는 120nt 정도의 작은 RNA 분자이고 생물학적 기능에 대해 다양한 연구가 진행되어 오고 있다. 5S rRNA는 Escherichia coli ribosomes의 large subunit의 한 부분이다. Prokaryotes와 organelles에서는 5S rRNA는 하나의 긴 transcript의 한 부분으로 형성되어 maturation 과정에서 16S, 23S, 5S로 나뉘어지며 Eu...2025.05.14
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유전자 전기영동 실험 보고서2025.11.181. 전기영동(Electrophoresis) 전기영동은 전기장을 이용하여 분자 또는 입자들을 분리하고 구분하는 기술이다. 전기영동용기에 액체를 넣고 전극을 삽입하여 직류 전압을 인가하면 액 속의 입자는 대전되어 전극에 이끌려 이동한다. 물질의 대전 극성에 따라 음극을 향하는 cataphoresis와 양극을 향하는 anaphoresis로 구분된다. DNA, RNA, 단백질 등의 분자 분리 및 크기 추정, 염기 서열 결정, 핵산 및 단백질의 구조 연구 등 다양한 분야에서 활용된다. 2. 아가로스 겔(Agarose Gel) 아가로스 겔은...2025.11.18
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람다 파지 DNA 관찰, PFU test 및 Optical mapping_서강대학교 바이오융합기술프로젝트1 레포트2025.01.191. λ phage DNA 관찰 실험에서는 DNA damaging을 이해하기 위한 첫 단계로 λ phage를 이용하여 DNA observation을 진행하였다. DNA가 포함된 plug에 proteinase K를 처리하여 phage의 구조 단백질과 DNase를 제거하고, (+)전하 cover glass 위에 DNA를 고정시켜 관찰하였다. PDMS nanochannel을 사용하여 DNA가 일직선으로 펴지도록 하여 관찰하였다. 2. PFU test PFU test를 통해 미지의 농도의 λ phage 용액 내 phage 입자의 개수를 확...2025.01.19
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제한효소 처리 DNA 전기영동 보고서2025.05.051. 제한효소 제한효소는 세균이 가지고 있는 DNA를 자르는 효소이다. 외부 바이러스의 DNA를 절단하여 자기를 보호하기 위한 수단으로 사용된다. 제한효소는 그 종류마다 4개 또는 6개의 염기서열을 인식하여 DNA를 절단하며, 이러한 특징 때문에 DNA 클로닝 등에 사용되고 있다. 2. 전기영동 전기영동은 전기장의 영향으로 전하를 띄는 물질이 유동성 매체에서 이동하는 원리를 이용한 기술이다. DNA는 음의 전하를 띄고 있기 때문에 전기를 걸어주면 양전하 쪽으로 이동하게 된다. DNA 가닥의 길이에 따라 이동 속도가 달라지므로, 이를...2025.05.05
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세포생리학실험_cell culture, Genomic DNA Isolation_genomic DNA 추출, total RNA 추출, 전기영동2025.01.131. 세포 배양 HEK 293T 세포를 DMEM 배지와 FBS를 사용하여 배양하였다. 세포는 처음에는 동글동글한 모양이었지만 점차 바닥에 붙어 자라나면서 별모양의 형태를 띠었다. 배지의 색이 점점 노란색으로 변하면서 세포가 죽기 시작하였다. 이를 통해 세포가 일정 횟수의 분열을 한 후 노화되는 과정을 관찰할 수 있었다. 2. Genomic DNA 추출 HEK293T 세포에서 genomic DNA를 추출하였다. 세포를 용해시킨 후 단백질과 RNA를 제거하는 과정을 거쳐 순수한 DNA를 분리하였다. 전기영동 결과 DNA 밴드가 마커보다...2025.01.13
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분자생물학 실험 (A+)Agarose gel eelectrophoresis 결과보고서2025.01.041. Agarose gel electrophoresis Agarose gel electrophoresis는 DNA 분자를 분리하고 분석하는 기술입니다. 이 실험에서는 DNA 샘플을 아가로스 겔에 로딩하고 전기장을 가해 DNA 조각들을 크기에 따라 분리합니다. 이를 통해 DNA 조각의 크기와 양을 확인할 수 있습니다. 이 기술은 유전자 클로닝, DNA 서열 분석, 유전자 발현 분석 등 다양한 분자생물학 실험에 사용됩니다. 2. DNA 분리 및 분석 이 실험에서는 DNA 샘플을 아가로스 겔에 로딩하고 전기장을 가해 DNA 조각들을 크기...2025.01.04
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미세조류의 DNA 추출2025.01.131. PCR (중합효소 연쇄반응) PCR은 시험관 내에서 DNA 분자의 특정 염기 서열을 선택적으로 빠르게 증폭하는 기술로, DNA 변성, 프라이머 결합, DNA 합성의 3단계로 이루어집니다. PCR은 유전자 연구, 질병 진단 등 다양한 분야에 활용되고 있습니다. 2. DNA 추출 DNA 추출은 생물로부터 전체 유전체 DNA를 추출하는 과정으로, 이번 실험에서는 spin column 방식을 사용하였습니다. 세포 용해, DNA 결합, 세척, 용출의 단계를 거쳐 DNA를 추출하였습니다. 3. 전기영동 전기영동은 DNA 분자를 크기에 따...2025.01.13
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