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생화학 실험/실습 보고서 (전기영동을 이용한 단백질의 관찰)2025.01.231. SDS-PAGE SDS-PAGE는 도데실황화 나트륨 폴리아크릴아마이드 겔 전기영동으로, 단백질이 전기장에 가해진 gel에서 크기에 따라 이동속도가 다름을 이용해 이들을 분리 및 분석하는 기법이다. SDS는 단백질의 3차원 구조를 풀어주고 단백질이 같은 전하/분자량을 가지도록 만들어준다. 단백질이 running gel에서 크기에 따라 이동성을 다르게 나타내는 원리를 이용하여 단백질을 분리한다. 2. 등전점 전기영동 등전점 전기영동은 단백질을 pH 기울기가 존재하는 gel에 놓고 전기장을 가해 주면, 단백질이 환경에 따른 전하를 ...2025.01.23
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단백질의 검출2025.01.091. 단백질의 구조 단백질은 탄소(C), 수소(H), 산소(O), 질소(N), 황(S), 인(P)으로 구성되며, 아미노산이 펩티드 결합으로 연결된 폴리펩티드 구조를 가진다. 단백질의 구조는 1차 구조부터 4차 구조까지 있으며, 이에 따라 다양한 기능을 수행한다. 2. 단백질의 정색반응 단백질은 아미노산 잔기 등이 특수한 시약과 반응하여 발색반응을 나타낸다. 뷰렛 반응은 펩티드 결합이 두 개 이상 있는 단백질이 구리 이온과 반응하여 보라색을 띠며, 닌히드린 반응은 아미노산이 닌히드린과 반응하여 다양한 색으로 발색한다. 3. 단백질 검...2025.01.09
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PCR 산물 정제 실험 예비 레포트2025.11.151. PCR 산물 정제 원리 작은 DNA 조각을 정제하는 원리를 이해하고 정제 방법을 숙지하는 것을 목적으로 한다. Column을 이용한 DNA 정제 방법을 사용하여 PCR product를 정제한다. 이 과정에서 Gel & PCR purification system kit을 활용하며, 제조사의 protocol을 따른다. 정제된 DNA는 Agarose Gel 전기영동으로 농도를 확인하고 4℃에서 보관한다. 2. Column을 이용한 DNA 정제 방법 Spin column을 이용한 DNA 정제 과정은 다음과 같다. 정제할 DNA를 포함...2025.11.15
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박테리아 세포로부터 플라스미드 정제 결과2025.11.131. 플라스미드 정제 박테리아 세포로부터 플라스미드를 분리하고 정제하는 과정입니다. 플라스미드는 박테리아에서 염색체 외에 존재하는 작은 원형 DNA 분자로, 유전자 공학 및 생명공학 연구에서 중요한 도구로 사용됩니다. 정제 과정에는 세포 용해, 단백질 제거, DNA 추출 및 정제 단계가 포함되며, 최종적으로 순수한 플라스미드 DNA를 얻을 수 있습니다. 2. 박테리아 세포 배양 플라스미드 정제를 위해 박테리아 세포를 배양하는 단계입니다. 박테리아는 플라스미드를 포함하고 있으며, 충분한 양의 플라스미드를 얻기 위해 적절한 배양 조건에...2025.11.13
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단백질 보충제의 섭취와 운동 수행 능력과의 관계 및 올바른 단백질 식품의 섭취 방안2025.01.271. 단백질의 섭취 단백질은 탄소, 수소, 산소, 질소의 복합 화합물로 하루 열량의 5~15%를 차지한다. 주요 기능으로는 새로운 조직의 합성과 보수, 효소와 호르몬 합성, 면역 시스템을 위한 항체의 공급 등이 있으며 헤모글로빈과 미오글로빈 합성에 관여하여 근육에 산소운반력을 높여 운동 수행 능력 향상에 도움을 준다. 단백질의 1일 섭취량은 개인의 체형과 몸무게, 목표하는 바에 따라 다르다. 2. 단백질 보충제의 섭취 단백질 보충제란 대두, 우유, 난류 등의 단백질원에서 단백질을 분리하여 식용에 적합하도록 정제한 것, 또는 이를 주...2025.01.27
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충북대 일반생물학 11주차_종이 크로마토그래피에 의한 물질 분리 (2023최신자료)2025.05.141. 크로마토그래피 크로마토그래피는 혼합물을 흡착제에 대한 친화도의 차이를 이용하여 분리, 정제, 정성 및 정량분석을 할 수 있는 방법이다. 크로마토그래피는 이동상의 상태에 따라 기체 크로마토그래피와 액체 크로마토그래피로 나뉘며, 고정상의 상태에 따라 컬럼법과 판법으로 세분된다. 종이 크로마토그래피는 여과지 표면에 흡착되어 있는 물이 고정상이고 전개액으로 사용되는 유기용매가 이동상이 된다. 2. 광합성 색소 분리 시금치 잎에서 아세톤을 이용하여 광합성 색소를 추출하고, 여과지를 이용한 종이 크로마토그래피로 분리할 수 있다. 광합성 ...2025.05.14
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PCR 결과레포트: DNA 증폭 및 전기영동 실험2025.11.171. PCR (중합효소연쇄반응) PCR은 특정 DNA 영역을 선택적으로 증폭하는 분자생물학 기법입니다. 본 실험에서는 YiaT, HiA, tres, Ompc 네 가지 target DNA를 증폭시키기 위해 각각의 forward/reverse primer를 사용하여 PCR mixture를 제작했습니다. 95℃에서 변성, 54℃에서 프라이머 결합, 72℃에서 DNA 합성을 30 사이클 반복하는 온도 조건을 적용했으며, lid 온도를 105℃로 유지하여 튜브 내 온도 균일성을 확보하고 증발로 인한 반응 손실을 방지했습니다. 2. 전기영동 ...2025.11.17
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플라스미드 DNA 추출 및 전기영동 실험2025.11.181. 플라스미드 DNA 플라스미드는 세균의 세포 내에 염색체와 별개로 존재하면서 독자적으로 증식할 수 있는 DNA 분자이다. 생장에 필수적인 유전자는 아니지만 특정 환경에 생존하기 위해 중요한 기능을 수행한다. 유전공학에서 제한효소로 끊은 후 필요한 유전자를 삽입하여 유전자재조합 기술에 광범위하게 이용된다. 1kb에서 1Mb의 다양한 크기로 존재하며 대부분 환형이고, 세포에서 분리한 플라스미드는 초나선형으로 존재한다. 2. DNA 추출 및 정제 방법 E.coli 세균으로부터 플라스미드를 추출하기 위해 여러 버퍼를 순차적으로 사용한다...2025.11.18
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플라스미드 DNA 추출과 Mini-prep 흡광도 분석2025.11.171. 플라스미드 DNA와 Mini-prep 플라스미드 DNA는 박테리아의 세포외에 존재하는 작은 원형 이중 가닥 DNA로, 염색체와 별도로 독자적으로 복제 및 증식할 수 있습니다. 유전자 재조합 기술에 사용되며 크기가 작아 정제가 용이합니다. Mini-prep은 형질전환된 세균을 배양한 후 플라스미드 DNA를 정제하는 과정으로, 알칼리 변성(alkaline lysis) 방법을 주로 사용합니다. 이 방법은 SDS와 수산화나트륨으로 세포를 파괴하고, 아세트산칼륨으로 중성화한 후 원심분리와 에탄올 침전법으로 DNA를 정제합니다. 2. D...2025.11.17
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단백질 풀림 실험 결과2025.05.091. 단백질 풀림 이번 실험에서는 단백질이 접힌 상태를 유지하는지, 풀리는지에 대해 판별하였다. 여러 종류의 시약들을 가하며 단백질의 풀림을 결정하였다. urea, 비눗물, HCl, NaOH, 에탄올 용액을 가했을 때 단백질이 풀렸다는 사실을 알 수 있다. 온도를 변화시키며 단백질의 풀림을 결정하였다. 단백질을 가열하면 수소결합과 소수성 상호작용이 파괴되고, 단백질을 냉각하면 소수성 상호작용이 약화되며 폴리펩타이드 사슬이 풀리게 된다. 2. chaotropic agent urea와 guanidine hydrochloride는 cha...2025.05.09
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