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Plasmid DNA 분리 예비레포트2025.04.261. 플라스미드 DNA 플라스미드는 생장에 필수적인 염색체이며 DNA에서 물리적으로 분리 돼 있는 대표적인 에피솜 DNA분자입니다. 플라스미드는 유전자 클로닝, 유전자 전달, 외래 유전자 또는 재조합 유전자 발현, 유용 단백질 생산, 백신 상산 등으로 활용될 수 있습니다. 플라스미드 DNA는 염색체 DNA와 달리 작은 환형 DNA이기 때문에 변성 후 회복이 상대적으로 빨리 이루어집니다. 이를 이용하여 플라스미드 DNA를 분리하고 정제할 수 있습니다. 2. 플라스미드 DNA 분리 원리 플라스미드 DNA 분리의 핵심 원리는 변성된 DN...2025.04.26
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제한효소 처리 실험 및 DNA 절단 분석2025.11.161. 제한효소(Restriction Enzyme) 제한효소는 특정 DNA 염기서열을 인식하여 DNA를 절단하는 효소이다. 실험에서 사용된 HindⅢ와 Eco RⅠ은 각각 λ DNA를 다른 위치에서 절단한다. HindⅢ는 DNA를 5번 절단하여 6개의 segments를 생성하고, Eco RⅠ은 4번 절단하여 5개의 segments를 생성한다. 제한효소는 sticky end(상보적 단일가닥)를 만들어 유전자 클로닝에 활용된다. 2. 전기영동(Gel Electrophoresis) 전기영동은 절단된 DNA fragments를 크기별로 분리...2025.11.16
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재조합 플라스미드 DNA 클로닝 예비2025.05.011. 플라스미드 DNA 플라스미드는 주 염색체와 분리되어 있어 독자적으로 복제가 가능한 환형 DNA이다. 대부분은 세균에 존재하며 생존에 필수적이진 않지만 특정 상황에 유용한 유전자를 포함한다. 플라스미드는 클로닝 벡터로 많이 이용되며 재조합된 플라스미드를 세균에 유입 후 증식시켜 DNA양을 늘린다. 또는 발현벡터로 세포내의 전사,번역기구를 이용해 재조합 유전자를 발현시켜 단백질을 대량 생산시킬 때도 이용 가능하다. 2. 클로닝 생명공학에서 cloning은 세포나 DNA조각을 복제하는 과정이다. 목적DNA조각을 다량 생산하거나 DN...2025.05.01
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효모 유전자 녹아웃(Gene Knockout) 실험 보고서2025.11.141. 유전자 녹아웃(Gene Knockout) 유전자 녹아웃은 특정 유전자의 기능을 분석하기 위해 그 유전자를 무력화하는 기술입니다. 기능적 단백질에 대한 유전정보를 삭제하는 효소를 이용하여 DNA 단편을 절단하며, 주로 상동 재조합에 의해 진행됩니다. 본 실험에서는 효모의 MET2 유전자를 마커 유전자인 URA3로 치환하여 녹아웃을 수행했습니다. 이 과정을 통해 MET2 유전자가 메티오닌 생합성에 관여함을 확인할 수 있었습니다. 2. 상동 재조합(Homologous Recombination) 상동 재조합은 상동인 두 개의 DNA ...2025.11.14
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단백질 검출 결과 레포트2025.11.181. 아미노산 생물의 몸을 구성하는 단백질의 기초 단위로, 아미노기와 카복실기를 포함한 분자입니다. 20개의 다른 아미노산이 존재하며, 필수 아미노산은 체내에서 합성할 수 없어 음식물로부터 섭취해야 합니다. 필수 아미노산에는 아이소루신, 루신, 페닐알라닌, 라이신, 메싸이오닌, 트레오닌, 트립토판, 발린이 있으며, 비필수 아미노산은 체내에서 합성 가능합니다. 아미노산은 소수성, 친수성, 염기성, 산성으로 분류됩니다. 2. 단백질의 구조 단백질은 1차, 2차, 3차, 4차 구조로 이루어져 있습니다. 1차 구조는 아미노산이 펩타이드 결...2025.11.18
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DNA 클로닝과 유전공학 기술2025.11.121. DNA 클로닝 기술 DNA 클로닝은 특정 유전자를 선택적으로 증폭하는 DNA 복제기술입니다. 제한효소로 DNA를 절단하고, 클로닝 벡터에 연결한 후, 숙주세포에 도입하여 DNA를 증폭시킵니다. 5단계 과정으로 진행되며: ①DNA 절단(제한효소 사용), ②벡터 선택(플라스미드, 바이러스), ③DNA 연결(DNA 리가제), ④숙주세포 이동, ⑤선별 배양입니다. 재조합 DNA 기술 또는 유전공학이라고도 불립니다. 2. 클로닝 벡터와 발현 벡터 클로닝 벡터는 DNA 증식 및 분리에 사용되며, 자가복제, 마커 선택, 제한효소 부위를 갖...2025.11.12
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DNA 연결 및 형질전환 실험 결과2025.11.131. DNA Ligation (DNA 연결) DNA 연결은 DNA 단편들을 DNA 리가제 효소를 이용하여 공유결합으로 연결하는 분자생물학 기법입니다. 이 과정에서 플라스미드와 목적 유전자의 양 끝에 있는 인산디에스터 결합을 형성하여 재조합 DNA를 만듭니다. 적절한 온도와 시간 조건에서 수행되며, 연결 효율은 DNA 농도, 리가제 양, 반응 시간 등에 영향을 받습니다. 2. Transformation (형질전환) 형질전환은 재조합 DNA를 숙주 세포(주로 박테리아)에 도입하는 과정입니다. 화학적 형질전환이나 전기천공법 등의 방법으로...2025.11.13
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SDS-PAGE를 이용한 AP 단백질 분석 및 Coomassie Blue Staining2025.01.171. SDS-PAGE를 이용한 단백질 분석 SDS-PAGE 실험을 통해 AP 단백질의 크기와 순도를 확인할 수 있었습니다. SDS-PAGE 과정에서 단백질의 3차 구조를 제거하고 크기에 따라 분리되도록 하여, 목표 단백질인 AP 단백질을 선별적으로 확인할 수 있었습니다. 또한 Coomassie Blue 염색을 통해 단백질 밴드를 시각화하여 분석할 수 있었습니다. 2. 단백질 정제 과정 단백질 정제 과정에서 target 단백질 이외의 비특이적으로 결합한 단백질들이 씻겨나가면서 target 단백질의 순도가 높아지는 것을 확인할 수 있었...2025.01.17
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분자생물학 실험 (A+) DNA ligation and transformation 결과보고서2025.01.041. DNA 연결(ligation) DNA 연결(ligation) 실험을 통해 DNA 단편을 벡터에 삽입하는 과정을 수행했습니다. 이를 통해 재조합 DNA를 만들어 대장균에 형질전환하는 실험을 진행했습니다. 실험 결과 성공적으로 재조합 DNA를 만들어 대장균에 도입할 수 있었습니다. 2. 형질전환(transformation) 대장균에 재조합 DNA를 도입하는 형질전환 실험을 수행했습니다. 실험 결과 형질전환된 대장균 세포를 선별할 수 있었고, 이를 통해 재조합 DNA가 성공적으로 도입되었음을 확인할 수 있었습니다. 1. DNA 연결...2025.01.04
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바이러스학 개념 정리2025.01.061. 바이러스의 특징 바이러스는 가장 작은 병원체로, 세포로 이루어져 있지 않지만 유전자(DNA 또는 RNA)를 가지고 증식할 수 있다. 바이러스는 DNA와 RNA 중 하나만 가지며, 살아있는 숙주세포 내에서만 증식할 수 있다. 또한 바이러스는 부착되는 부위가 따로 있어 특정 세포에만 증식할 수 있다. 2. 바이러스의 형태와 구조 바이러스는 바이러스 입자(viral particle)로 구성되어 있으며, 크기와 형태가 다양하다. 바이러스의 기본 구조는 유전체(genome), 캡시드(capsid), 외피(envelope)로 이루어져 있...2025.01.06
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