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플라스미드 DNA 정제 실험 예비레포트2025.11.171. 플라스미드 DNA 정제 박테리아 세포로부터 플라스미드 DNA를 정제하는 것은 유전자 재조합 실험의 기본 과정이다. 플라스미드 DNA는 세균의 유전체 DNA에 비해 매우 작고, 유전체 DNA는 선형이 되는 반면 플라스미드 DNA는 원형의 CCC(공유결합 닫힌 원형) 구조를 가진다는 차이점을 이용하여 정제한다. 1979년 번보임과 돌리 등이 개발한 알칼리 세포용해법이 현재 널리 사용되고 있다. 2. 알칼리 세포용해법 알칼리 세포용해법은 3단계로 구분된다. 첫째, 대장균 세포를 완충액에서 안정화시킨다. 둘째, 알칼리와 SDS 용액을...2025.11.17
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플라스미드 DNA 추출과 Mini-prep 흡광도 분석2025.11.171. 플라스미드 DNA와 Mini-prep 플라스미드 DNA는 박테리아의 세포외에 존재하는 작은 원형 이중 가닥 DNA로, 염색체와 별도로 독자적으로 복제 및 증식할 수 있습니다. 유전자 재조합 기술에 사용되며 크기가 작아 정제가 용이합니다. Mini-prep은 형질전환된 세균을 배양한 후 플라스미드 DNA를 정제하는 과정으로, 알칼리 변성(alkaline lysis) 방법을 주로 사용합니다. 이 방법은 SDS와 수산화나트륨으로 세포를 파괴하고, 아세트산칼륨으로 중성화한 후 원심분리와 에탄올 침전법으로 DNA를 정제합니다. 2. D...2025.11.17
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인천대학교 나노바이오실험(1) A 자료) 4. Plasmid perp & Gel Electrophoresis2025.01.041. Plasmid DNA 플라스미드 DNA는 세균의 세포 내에 염색체와는 별개로 존재하면서 독자적으로 증식할 수 있는 DNA이다. 유전공학에서는 세균 내 플라스미드를 세포 밖으로 빼내고 제한효소로 끊은 뒤, 필요로 하는 유전자를 삽입하여 이를 다시 세균에 넣어 배양하는 유전자재조합 기술을 사용한다. 2. Plasmid DNA 추출 방법 플라스미드 DNA를 추출하는 방법에는 크기 차이를 이용한 방법과 구조 차이를 이용한 알칼리 용해 방법(Alkaline Lysis method)이 있다. 알칼리 용해 방법은 높은 pH의 알칼리성 용액...2025.01.04
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A+ 생화학실험 <13주차. His6-tagged Protein Purification> 레포트2025.01.201. 단백질 정제 단백질 정제(Protein Purification)는 생물학적 연구 및 산업적 응용을 위하여 단백질을 혼합물로부터 분리하고 정제하는 과정이다. 이 과정은 일반적으로 여러 단계를 거치며, 각 단계에서는 단백질의 용해도, 크기, 전하, 결합 친화도 등의 단백질 간 서로 다른 특성을 활용하여 단백질을 분리한다. 첫 번째 단계는 세포 용해(Cell Lysis)로, 세포벽을 파괴하여 세포 내의 단백질을 방출하는 것이다. 다음 단계는 affinity chromatography이다. 이 방법은 특정 단백질에 결합하는 리간드를 ...2025.01.20
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유전공학 기술 (DNA 분리 및 정제, PCR, 재조합 DNA)2025.04.301. 유전공학 유전공학은 DNA의 인위적인 변형을 통해 유전물질을 변화시키는 기술로, 의약품 분야, 환경, 농축산 분야 등에 활용되고 있다. 주요 기술로는 DNA 분리 및 정제, 재조합 DNA, PCR(중합 효소 연쇄반응) 등이 있다. 2. DNA 분리 및 정제 플라스미드 DNA는 유전공학적 실험에서 vector DNA로 사용되며, 알칼리 용해법을 통해 분리할 수 있다. 이 방법은 세포막을 파괴하고 DNA를 변성시켜 플라스미드 DNA를 추출한다. 3. 재조합 DNA 재조합 DNA 기술은 연구하고자 하는 유전자를 세균의 플라스미드에 ...2025.04.30
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세포분열과 세포주기: 유사분열과 감수분열2025.11.161. 유사분열(Mitosis) 정상적인 세포분열에 의해 생겨난 두 딸세포는 모세포의 유전형질을 정확히 이등분하여 가진다. 세포질분열 과정에서 원형질 만입 부위에 수축성의 미세섬유가 환을 이루며 능동적인 수축이 주된 기작이다. 연결사가 가느다란 실처럼 남아있다가 세포질 분리가 완전히 이루어진다. 양파 근단 세포에서 전기, 중기, 말기, 후기의 분열 과정을 관찰할 수 있다. 2. 세포주기 조절 진핵세포는 세포내 외부에서 일어나는 스트레스에 반응하여 세포주기 진행을 조절하는 기전을 가지고 있다. 세포가 정상적으로 기능하기 위해서는 세포분...2025.11.16
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[생화학실험] (A+) Plasmid DNA isolation and characterization by electrophoresis2025.05.031. DNA DNA(Deoxyribo Nucleic Acid)는 뉴클레오타이드의 중합체인 두 개의 긴 가닥이 서로 꼬여있는 이중나선 구조로 되어있는 고분자화합물이다. DNA는 4종류의 뉴클레오타이드가 중합 과정을 통해 연결된 가닥으로 이루어져 있으며, 이 가닥은 Cytosine, Guanine, Adenine, Thymine은 독특한 핵염기(nucleobase)로 구분되기 때문에 흔히 DNA 염기서열이라고 부른다. DNA 염기서열은 유전정보를 나타내는 유전자 구간과 그렇지 않은 비부호화 DNA 구간으로 나눌 수 있다. 2. 재조합 ...2025.05.03
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감수 분열 관찰2025.05.141. 감수 분열 감수 분열은 생물(유성 생식을 하는 것 한정)이 생식세포를 형성하는 과정에서 일어나는 세포분열이다. 감수분열의 과정은 체세포분열과 동일하나, 연속으로 2회의 분열이 진행됨에 따라 염색체 수가 체세포의 절반으로 줄어든다. 제1분열은 염색체 수가 반감되는 이형핵분열(heterogenic division)이라고 하고, 제2분열은 체세포분열과 같은 동형핵분열(homotypical division)이다. 2. 교차(crossing over) 교차(crossing over)는 진핵생물이 유성 생식(sexual reproduct...2025.05.14
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DNA 형질전환 실험 결과 및 분석2025.11.141. 형질전환(Transformation) 형질전환은 원래 세포가 가지고 있던 것과 다른 종류의 유전자가 있는 DNA 사슬 조각 또는 플라스미드가 세포들 사이에 침투되어 원래 세포에 존재하던 DNA와 결합하여 세포의 유전형질이 변화되는 분자생물학적 현상이다. 본 실험에서는 재조합된 DNA를 competent cell에 삽입하여 형질전환을 수행하고, ampicillin과 X-gal이 들어 있는 LB plate에서 배양하여 colony를 형성시켰다. 2. 재조합 DNA 선별 방법 클로닝된 DNA 조각이 벡터에 성공적으로 삽입되었는지 확...2025.11.14
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초본식물의 동정을 통한 DNA 비교 분석2025.05.131. DNA의 구조 DNA는 당-인산-염기로 구성된 뉴클레오티드 사슬 2개가 나란하게 꼬여 있는 이중나선으로 이루어져 있다. 뉴클레오티드는 결합 되어있는 염기에 의해 종류가 나뉘며, A(아데닌), G(구아닌), C(시토신), T(티민)의 네 가지 염기가 존재하는데 이 네 가지 염기의 배열된 순서에 의해 유전 정보가 암호화된다. 2. DNA 구조 관찰 실험 왓슨은 윌킨스의 연구실에서 프랭클린(Rosalind Franklin)이 찍은 DNA의 X선 회절 사진을 보게 되었다. X선 회절 사진은 DNA에 X선을 쏘아서 나타나는 이미지를 형...2025.05.13
