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제한효소 처리 실험 및 DNA 절단 분석2025.11.161. 제한효소(Restriction Enzyme) 제한효소는 특정 DNA 염기서열을 인식하여 DNA를 절단하는 효소이다. 실험에서 사용된 HindⅢ와 Eco RⅠ은 각각 λ DNA를 다른 위치에서 절단한다. HindⅢ는 DNA를 5번 절단하여 6개의 segments를 생성하고, Eco RⅠ은 4번 절단하여 5개의 segments를 생성한다. 제한효소는 sticky end(상보적 단일가닥)를 만들어 유전자 클로닝에 활용된다. 2. 전기영동(Gel Electrophoresis) 전기영동은 절단된 DNA fragments를 크기별로 분리...2025.11.16
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제한효소를 이용한 플라스미드 DNA 검증 실험2025.11.151. 제한효소(Restriction Enzyme) 제한효소는 특정 DNA 서열을 인식하여 절단하는 단백질로, 분자생물학 실험에서 DNA 분석 및 조작에 필수적으로 사용된다. 본 실험에서는 EcoR1 제한효소를 사용하여 플라스미드 DNA를 절단하고, 삽입된 DNA의 위치와 크기를 확인하는 데 활용된다. 제한효소는 특정 인식 부위에서만 작용하므로 정확한 DNA 구조 분석이 가능하다. 2. 플라스미드 DNA 검증 Mini-prep 방법으로 획득한 DNA가 실제 플라스미드 DNA인지 확인하는 과정이다. 제한효소를 이용한 제한 소화(Rest...2025.11.15
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Ligation & Transformation 예비레포트2025.11.151. DNA Ligation (DNA 연결) 유전자 클로닝 과정에서 DNA ligase 효소를 이용하여 insert DNA와 vector DNA를 연결하는 실험. 제한효소로 처리된 DNA 말단을 DNA ligase 효소로 연결하여 재조합 DNA를 만드는 과정. 50ng의 vector DNA에 대해 1:1, 1:5, 1:10 등의 비율로 insert DNA를 혼합하고, 37℃에서 1시간 반응시켜 DNA 연결을 수행한다. 2. Bacterial Transformation (박테리아 형질전환) 재조합 DNA를 대장균(CP cell)에 도...2025.11.15
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분자생물학 실험 (A+)Agarose gel eelectrophoresis 결과보고서2025.01.041. Agarose gel electrophoresis Agarose gel electrophoresis는 DNA 분자를 분리하고 분석하는 기술입니다. 이 실험에서는 DNA 샘플을 아가로스 겔에 로딩하고 전기장을 가해 DNA 조각들을 크기에 따라 분리합니다. 이를 통해 DNA 조각의 크기와 양을 확인할 수 있습니다. 이 기술은 유전자 클로닝, DNA 서열 분석, 유전자 발현 분석 등 다양한 분자생물학 실험에 사용됩니다. 2. DNA 분리 및 분석 이 실험에서는 DNA 샘플을 아가로스 겔에 로딩하고 전기장을 가해 DNA 조각들을 크기...2025.01.04
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서울대학교 A+ 생물학 실험 PCR, DNA technology2025.01.281. DNA 기술 DNA 기술은 생명과학 및 생명공학의 핵심적인 도구로, 유전 물질의 분석, 변형 및 조작을 가능하게 한다. 이러한 기술 중 특정 유전자를 vector라 불리는 plasmid에 삽입하고, 그 유전자의 복제본을 생산하는 기술인 DNA cloning, 전기영동을 통한 분석은 유전자 연구와 다양한 생물학적 응용에 있어 중요한 역할을 한다. 2. Plasmid DNA Plasmid DNA는 세균 내에서 독립적으로 복제할 수 있는 작은 원형 DNA 분자로, 염색체 DNA와는 별개로 존재한다. Plasmid는 외래 유전자를 운...2025.01.28
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Plasmid DNA 분리 예비레포트2025.04.261. 플라스미드 DNA 플라스미드는 생장에 필수적인 염색체이며 DNA에서 물리적으로 분리 돼 있는 대표적인 에피솜 DNA분자입니다. 플라스미드는 유전자 클로닝, 유전자 전달, 외래 유전자 또는 재조합 유전자 발현, 유용 단백질 생산, 백신 상산 등으로 활용될 수 있습니다. 플라스미드 DNA는 염색체 DNA와 달리 작은 환형 DNA이기 때문에 변성 후 회복이 상대적으로 빨리 이루어집니다. 이를 이용하여 플라스미드 DNA를 분리하고 정제할 수 있습니다. 2. 플라스미드 DNA 분리 원리 플라스미드 DNA 분리의 핵심 원리는 변성된 DN...2025.04.26
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박테리아 형질전환(Bacterial Transformation) 실험 보고서2025.11.151. 형질전환(Transformation)의 정의 및 원리 형질전환은 외부 유전자를 세포에 도입하여 새로운 유전 형질을 갖도록 만드는 과정입니다. S형균의 DNA를 R형균에 도입하면 R형균이 S형균으로 변화하며, 이는 원핵생물의 유전적 다양성 확보 전략입니다. 자연 상태에서 형질전환이 일어나려면 DNA 결합 단백질, Type IV pili, Type II secretion system 등이 관여하며, 환경 영향(집단 밀도, 영양분 고갈, DNA 손상)에 따라 유도됩니다. 외래 DNA 도입 방법으로는 접합(conjugation)과 형...2025.11.15
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[화학과 수석의 A+ 레포트][조교피드백 포함] 박테리아의 형질전환 (생화학실험)2025.01.161. 형질전환 이번 실험에서는 플라스미드와 박테리아를 이용해 형질 전환한다. 클로닝이란 관심있는 DNA를 많이 만들어내기 위해 박테리아를 이용하는 것을 말한다. 박테리아에 관심있는 DNA 조각을 집어넣고 키우면 관심있는 DNA도 여러개 만들 수 있게 된다. 플라스미드는 박테리아에 DNA를 넣어주기 위한 운반체 역할을 한다. 형질전환 시키는 방법으로는 화학적처리법과 전기천공법이 있으며, 이번 실험에서는 화학적 처리방법으로 CaCl2를 넣어주는 방법을 사용했다. 2. 플라스미드 플라스미드란 세균의 세포 내에 염색체와 별도로 존재하면서 ...2025.01.16
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DNA 형질전환 실험 결과 및 분석2025.11.141. 형질전환(Transformation) 형질전환은 원래 세포가 가지고 있던 것과 다른 종류의 유전자가 있는 DNA 사슬 조각 또는 플라스미드가 세포들 사이에 침투되어 원래 세포에 존재하던 DNA와 결합하여 세포의 유전형질이 변화되는 분자생물학적 현상이다. 본 실험에서는 재조합된 DNA를 competent cell에 삽입하여 형질전환을 수행하고, ampicillin과 X-gal이 들어 있는 LB plate에서 배양하여 colony를 형성시켰다. 2. 재조합 DNA 선별 방법 클로닝된 DNA 조각이 벡터에 성공적으로 삽입되었는지 확...2025.11.14
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PCR 결과레포트: DNA 증폭 및 전기영동 실험2025.11.171. PCR (중합효소연쇄반응) PCR은 특정 DNA 영역을 선택적으로 증폭하는 분자생물학 기법입니다. 본 실험에서는 YiaT, HiA, tres, Ompc 네 가지 target DNA를 증폭시키기 위해 각각의 forward/reverse primer를 사용하여 PCR mixture를 제작했습니다. 95℃에서 변성, 54℃에서 프라이머 결합, 72℃에서 DNA 합성을 30 사이클 반복하는 온도 조건을 적용했으며, lid 온도를 105℃로 유지하여 튜브 내 온도 균일성을 확보하고 증발로 인한 반응 손실을 방지했습니다. 2. 전기영동 ...2025.11.17
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