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제한효소를 이용한 플라스미드 절단 실험2025.11.171. 제한효소(Restriction Enzyme) 제한효소는 특정 DNA 서열을 인식하여 절단하는 효소이다. 본 실험에서는 Hind III과 Xbal 두 가지 제한효소를 사용하여 플라스미드를 절단했다. 37℃에서 1시간 반응시켜 플라스미드를 특정 위치에서 절단하는 원리를 이해하고, 절단 반응에서 버퍼, 효소 농도, 반응 시간 등의 조건을 고려하는 것이 중요함을 학습했다. 2. 전기영동(Gel Electrophoresis) DNA 분자를 크기에 따라 분리하는 기법으로, 0.8X agarose gel을 사용하여 절단된 플라스미드를 분석...2025.11.17
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플라스미드 DNA 추출 및 전기영동 실험2025.11.181. 플라스미드 DNA 플라스미드는 세균의 세포 내에 염색체와 별개로 존재하면서 독자적으로 증식할 수 있는 DNA 분자이다. 생장에 필수적인 유전자는 아니지만 특정 환경에 생존하기 위해 중요한 기능을 수행한다. 유전공학에서 제한효소로 끊은 후 필요한 유전자를 삽입하여 유전자재조합 기술에 광범위하게 이용된다. 1kb에서 1Mb의 다양한 크기로 존재하며 대부분 환형이고, 세포에서 분리한 플라스미드는 초나선형으로 존재한다. 2. DNA 추출 및 정제 방법 E.coli 세균으로부터 플라스미드를 추출하기 위해 여러 버퍼를 순차적으로 사용한다...2025.11.18
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제한효소 절단 및 아가로스 젤 전기영동 실험2025.11.181. 제한효소(Restriction Enzyme) 제한효소는 박테리아와 고세균에서 발견되는 효소로, 외부 DNA를 인식하고 분해하는 보호 메커니즘이다. 각 제한효소는 4~6개의 염기쌍으로 이루어진 특정 서열만 인식하여 절단한다. 예를 들어 EcoR I은 특정 서열에서만 DNA를 절단한다. 제한효소 반응은 적절한 반응조건(염 농도, pH, 온도 등)에서 DNA와 효소를 배양하여 수행되며, 1 Unit는 지정된 완충액과 온도에서 1시간 동안 λ DNA 1㎍을 완전히 분해하는 양을 의미한다. 2. 아가로스 젤 전기영동(Agarose Ge...2025.11.18
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