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플라스미드 DNA 준비 및 제한효소 지도 작성2025.11.121. 플라스미드 DNA 준비 플라스미드는 박테리아 세포에서 발견되는 작은 원형 DNA 분자로, 유전자 공학 실험에서 중요한 벡터로 사용됩니다. 플라스미드 DNA 준비 과정은 박테리아 배양, 세포 용해, DNA 추출 및 정제 단계를 포함하며, 순수한 플라스미드 DNA를 얻기 위해 여러 정제 기법이 적용됩니다. 이 과정을 통해 얻은 플라스미드는 분자생물학 연구와 유전자 클로닝에 필수적인 재료입니다. 2. 제한효소 지도 작성 제한효소 지도(Restriction map)는 DNA 분자 위에서 특정 제한효소의 인식 부위와 절단 위치를 나타내...2025.11.12
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박테리아 형질 전환, DNA 준비, 제한효소를 이용한 DNA 절단 실험 예비 및 결과 보고서2025.01.041. 박테리아 형질 전환 박테리아 형질 전환은 박테리아 세포가 외부 DNA를 흡수하여 새로운 유전적 특성을 획득하는 과정입니다. 이를 통해 박테리아는 항생제 내성, 독소 생산 등의 새로운 기능을 얻을 수 있습니다. 이 실험에서는 박테리아 형질 전환 과정을 수행하고 그 결과를 보고하고 있습니다. 2. DNA 준비 DNA 준비 과정에서는 DNA를 추출, 정제하여 실험에 사용할 수 있는 상태로 만드는 것이 중요합니다. 이를 통해 순수한 DNA를 얻을 수 있으며, 후속 실험에 활용할 수 있습니다. 3. 제한효소를 이용한 DNA 절단 제한효...2025.01.04
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플라스미드 미니 준비 발표2025.01.061. 플라스미드 플라스미드는 박테리아가 가진 염색체 이외의 DNA 분자입니다. 1952년 미국의 유전학자 J. 레더버그가 최초로 플라스미드를 발견했으며, 이는 박테리아가 독자적으로 증식할 수 있는 DNA 분자라는 의미로 명명되었습니다. 플라스미드는 유전공학에서 중요한 역할을 하며, 플라스미드 준비는 플라스미드 DNA를 추출하고 정제하는 과정입니다. 2. 플라스미드 미니 준비 플라스미드 미니 준비는 박테리아로부터 소량의 플라스미드 DNA를 추출하고 정제하는 방법입니다. 이 방법은 많은 후보를 빠른 시간 내에 분석할 수 있게 해줍니다....2025.01.06
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아가로스겔 전기영동을 이용한 플라스미드 클로닝 확인2025.11.151. 아가로스겔 전기영동 Restriction digestion 및 uncut plasmid를 통해 클로닝 여부를 확인하는 실험 방법입니다. 아가로스겔을 이용하여 DNA 샘플을 전기영동으로 분리하고, band shift 및 insert 유무를 관찰하여 클로닝 성공 여부를 판단합니다. 1X TAE buffer에 아가로스를 녹여 겔을 만들고, EtBr을 첨가한 후 DNA 샘플을 로딩하여 110V에서 전기영동을 수행합니다. 2. 플라스미드 클로닝 검증 Restriction digestion으로 처리된 DNA와 uncut plasmid를 ...2025.11.15
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아가로스 젤 전기영동 실험 예비2025.11.131. 아가로스 젤 전기영동 아가로스 젤 전기영동은 DNA, RNA, 단백질 등의 생물학적 거대분자를 크기에 따라 분리하는 실험 기법입니다. 아가로스 젤에 전기장을 가하면 음전하를 띤 핵산 분자들이 양극으로 이동하며, 분자의 크기가 작을수록 젤의 기공을 통과하기 쉬워 더 멀리 이동합니다. 이를 통해 DNA 단편의 크기를 측정하고 유전자 분석, PCR 산물 확인 등 다양한 분자생물학 실험에 활용됩니다. 2. 젤 매트릭스와 완충액 아가로스는 해조류에서 추출한 다당류로, 농도에 따라 젤의 기공 크기가 결정됩니다. 일반적으로 0.8-1.5%...2025.11.13
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마우스 genotyping 실습레포트2025.01.221. 전기영동 전기영동법은 크기와 전하에 다른 핵산 및 단백질의 절편의 분리, 식별 및 정제를 위한 실험 방법이다. 핵산은 (-)전하를 가지고 있어서 DNA 샘플을 아가로스 겔에 로딩하고 buffer 안에서 전기를 흘려보내면 DNA는 (+)극으로 이동하게 된다. 아가로스 겔의 그물 구조에 의해 큰 사이즈의 DNA는 천천히 이동하고 작은 DNA는 더 빠르게 이동한다. 2. PCR PCR은 DNA 또는 RNA의 특정 영역을 대량으로 복제, 증폭시키는 기술이다. PCR에 필요한 구성요소는 template DNA, forward prime...2025.01.22
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미니프렙을 통한 플라스미드 DNA 분리 및 정량2025.11.161. 미니프렙(Minipreparation) 방법 E. coli에 형질전환된 플라스미드를 미니프렙 방법으로 분리하는 실험이다. Solution I(glucose, Tris-Cl, EDTA)에서 세포 용해 준비, Solution II(SDS, NaOH)에서 세포 용해 및 DNA 변성, Solution III(potassium acetate, glacial acetic acid)에서 중화 과정을 거친다. 최종 DNA 농도는 0.2322 µg/µl이었다. 효율 향상을 위해 bacterial pellet 제거, inverting으로 혼합,...2025.11.16
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PCR을 통한 DNA 증폭 및 전기영동 실험2025.11.141. PCR (중합효소 연쇄반응) PCR은 DNA를 증폭하는 기본적인 분자생물학 기법입니다. 실험에서는 10배 PCR 완충액, dNTP, 프라이머, Taq DNA Polymerase 등의 시약을 사용하여 반응 혼합물을 준비합니다. 템플릿 DNA를 추가한 후 열 사이클러에서 변성, 어닐링, 연장 단계를 반복하여 DNA를 지수적으로 증폭합니다. Taq Polymerase의 확장 속도는 1kb/1분이며, 최소 연장 시간은 30초입니다. PCR은 민감도가 높아 적은 양의 DNA 오염도 실험에 큰 영향을 미치므로 주의가 필요합니다. 2. D...2025.11.14
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Gene cloning 기술의 원리와 응용2025.11.141. Gene cloning의 정의 및 개념 Gene cloning은 생물체의 특정 유전자를 세포에서 추출하여 벡터 DNA에 삽입하고 Competent Cell에서 증식시킴으로써 균일한 유전자 집단을 생성하는 DNA 재조합 기술이다. 유전자 클론화라고도 불리며 특정 유전자의 대량 복제를 위해 사용되는 중요한 생명공학 기술이다. 이 기술은 분자생물학과 세포생물학 연구에서 각 유전자의 생물학적 기능을 이해하기 위해 필수적이다. 2. Gene cloning의 응용 분야 Gene cloning은 다양한 종의 유전체와 종간 유전적 다양성 연...2025.11.14
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플라스미드 DNA 추출 및 분석 실험 보고서2025.11.171. 플라스미드 플라스미드는 세균의 세포 내에 복제되어 독자적으로 증식할 수 있는 염색체 이외의 DNA 분자이다. 세균의 생존에 필수적이지는 않으며 비교적 크기가 작고 세포 상호간에 전달이 잘 된다. 복제 원점을 가지고 있어 복제가 가능하며 유전자가 있다면 정상적으로 발현된다. 접합 과정이나 직접 세포막을 통해 다른 세균에게 전달될 수 있어 세균의 유전적 다양성을 높여준다. 2. 플라스미드 추출 원리 플라스미드 추출은 플라스미드를 제외한 세균의 다른 부분을 제거하는 것으로, 특히 플라스미드와 염색체 DNA를 분리하는 것이 중요하다....2025.11.17
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