총 170개
-
DNA 연결 및 형질전환 실험 예비2025.11.131. DNA Ligation (DNA 연결) DNA 연결은 DNA ligase 효소를 이용하여 두 개의 DNA 분자를 공유결합으로 연결하는 과정입니다. 제한효소로 절단된 DNA의 5' 인산기와 3' 수산기 사이의 포스포디에스터 결합을 형성하여 DNA 분자를 연결합니다. 이 과정은 재조합 DNA 기술에서 벡터와 삽입 DNA를 연결하는 데 필수적인 단계입니다. 2. Transformation (형질전환) 형질전환은 외부에서 도입된 DNA가 세포 내로 들어가 세포의 유전자형을 변화시키는 과정입니다. 박테리아의 경우 화학적 방법이나 전기천...2025.11.13
-
DNA 연결 및 형질전환 실험 결과2025.11.131. DNA Ligation (DNA 연결) DNA 연결은 DNA 단편들을 DNA 리가제 효소를 이용하여 공유결합으로 연결하는 분자생물학 기법입니다. 이 과정에서 플라스미드와 목적 유전자의 양 끝에 있는 인산디에스터 결합을 형성하여 재조합 DNA를 만듭니다. 적절한 온도와 시간 조건에서 수행되며, 연결 효율은 DNA 농도, 리가제 양, 반응 시간 등에 영향을 받습니다. 2. Transformation (형질전환) 형질전환은 재조합 DNA를 숙주 세포(주로 박테리아)에 도입하는 과정입니다. 화학적 형질전환이나 전기천공법 등의 방법으로...2025.11.13
-
DNA 연결 및 형질전환, 플라스미드 추출 및 제한효소 절단2025.11.171. T4 DNA Ligase와 DNA 연결(Ligation) T4 DNA ligase는 T4 박테리오파지에서 유래한 효소로, DNA의 3'-OH와 5'-P 사이에 phosphodiester 결합을 형성하여 DNA를 연결한다. Ligation buffer에는 Tris-HCl(pH 7.6), MgCl2, DTT, ATP가 포함되며, 각각 완충작용, cofactor 제공, 환원환경 조성, cofactor 제공의 역할을 한다. Self-ligation 방지를 위해 double-digestion(서로 다른 제한효소 사용) 또는 alkali...2025.11.17
-
[생화학실험] (A+) Plasmid DNA isolation and characterization by electrophoresis2025.05.031. DNA DNA(Deoxyribo Nucleic Acid)는 뉴클레오타이드의 중합체인 두 개의 긴 가닥이 서로 꼬여있는 이중나선 구조로 되어있는 고분자화합물이다. DNA는 4종류의 뉴클레오타이드가 중합 과정을 통해 연결된 가닥으로 이루어져 있으며, 이 가닥은 Cytosine, Guanine, Adenine, Thymine은 독특한 핵염기(nucleobase)로 구분되기 때문에 흔히 DNA 염기서열이라고 부른다. DNA 염기서열은 유전정보를 나타내는 유전자 구간과 그렇지 않은 비부호화 DNA 구간으로 나눌 수 있다. 2. 재조합 ...2025.05.03
-
[A+ 보장!] 연세대 의대 의예과 1학년 General Biology 실험 레포트 Genomic DNA extraction2025.01.141. DNA 클로닝 DNA 클로닝은 제한 효소를 이용하여 특정한 유전자를 절단하는 과정에서 시작한다. 제한 효소는 특정한 염기들의 서열을 인식하고 이를 절단하는 기능을 수행한다. 또한 제한 효소는 종류에 따라 점착 말단과 무딘 말단을 형성한다. 다음으로 표적 유전자를 벡터에 삽입해야 하며, 이 과정에서 DNA 연결 효소가 사용된다. 마지막으로 재조합 플라스미드를 박테리아에 다시 도입한다. 2. 젤 전기영동 젤 전기영동은 동일한 DNA를 찾는 과정에서 유용하게 사용된다. 동일한 DNA를 동일한 제한 효소로 처리한다면 동일한 길이의 D...2025.01.14
-
분자생물학 실험 (A+) DNA ligation and transformation 결과보고서2025.01.041. DNA 연결(ligation) DNA 연결(ligation) 실험을 통해 DNA 단편을 벡터에 삽입하는 과정을 수행했습니다. 이를 통해 재조합 DNA를 만들어 대장균에 형질전환하는 실험을 진행했습니다. 실험 결과 성공적으로 재조합 DNA를 만들어 대장균에 도입할 수 있었습니다. 2. 형질전환(transformation) 대장균에 재조합 DNA를 도입하는 형질전환 실험을 수행했습니다. 실험 결과 형질전환된 대장균 세포를 선별할 수 있었고, 이를 통해 재조합 DNA가 성공적으로 도입되었음을 확인할 수 있었습니다. 1. DNA 연결...2025.01.04
-
Ligation & Transformation 예비레포트2025.11.151. DNA Ligation (DNA 연결) 유전자 클로닝 과정에서 DNA ligase 효소를 이용하여 insert DNA와 vector DNA를 연결하는 실험. 제한효소로 처리된 DNA 말단을 DNA ligase 효소로 연결하여 재조합 DNA를 만드는 과정. 50ng의 vector DNA에 대해 1:1, 1:5, 1:10 등의 비율로 insert DNA를 혼합하고, 37℃에서 1시간 반응시켜 DNA 연결을 수행한다. 2. Bacterial Transformation (박테리아 형질전환) 재조합 DNA를 대장균(CP cell)에 도...2025.11.15
-
DNA 복제 과정 및 관련 효소 활동 정리2025.05.101. DNA 복제의 특성 DNA 복제는 semiconservative 방식으로 진행되며, 5'→3' 방향으로 진행된다. DNA 복제 과정에서 오류가 발생할 수 있으며, DNA polymerase가 이를 교정하는 proofreading 기능을 가지고 있다. 2. DNA polymerase의 종류와 기능 DNA polymerase I은 DNA 복제와 수선에 모두 관여하며, Klenow fragment는 합성, proofreading, nick 수선 기능을 가진다. DNA polymerase II는 복제 재개 기능, DNA polymer...2025.05.10
-
[건국대학교] 유전체학 DNA_replication 리포트2025.01.151. DNA 복제 개시 ORC(Origin Recognition Complex)는 이중가닥 DNA를 열어 Helicase를 불러오는 역할을 한다. Helicase는 DNA의 이중가닥을 단일가닥으로 풀어주는 효소이며, ATP를 사용한다. Topoisomerase는 Helicase가 풀어준 DNA의 꼬임 현상을 해소해준다. 2. 단일가닥 DNA 보호 SSB 단백질(Single-Strand Binding Protein)은 단일가닥 DNA가 다시 이중가닥으로 붙는 것을 막고 DNA를 endonuclease로부터 보호한다. 진핵생물에서는 R...2025.01.15
-
재조합 플라스미드 DNA 클로닝 예비2025.05.011. 플라스미드 DNA 플라스미드는 주 염색체와 분리되어 있어 독자적으로 복제가 가능한 환형 DNA이다. 대부분은 세균에 존재하며 생존에 필수적이진 않지만 특정 상황에 유용한 유전자를 포함한다. 플라스미드는 클로닝 벡터로 많이 이용되며 재조합된 플라스미드를 세균에 유입 후 증식시켜 DNA양을 늘린다. 또는 발현벡터로 세포내의 전사,번역기구를 이용해 재조합 유전자를 발현시켜 단백질을 대량 생산시킬 때도 이용 가능하다. 2. 클로닝 생명공학에서 cloning은 세포나 DNA조각을 복제하는 과정이다. 목적DNA조각을 다량 생산하거나 DN...2025.05.01
1 / 17
