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[만점보고서]Plasmid DNA 추출과 DNA 정량 실험보고서2025.01.171. Plasmid DNA 추출 Plasmid DNA는 세균의 세포 내에서 염색체와 별개로 존재하는 자가복제 DNA이다. Plasmid DNA 추출을 위해 Alkaline Lysis 법을 사용하여 세포를 용해시키고 plasmid DNA를 염색체 DNA와 분리한다. 이 과정에서 다양한 buffer를 사용하여 pH 변화를 조절하고 불순물을 제거한다. 2. DNA 정량 Nanodrop 분광광도계를 이용하여 추출한 plasmid DNA의 농도와 순도를 측정한다. 260nm 흡광도로 DNA 농도를 측정하고, 260nm/280nm 및 260n...2025.01.17
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[A+ 보장!] 연세대 의대 의예과 1학년 General Biology 실험 레포트 Gel electrophoresis DNA & Gel extraction2025.01.141. DNA 구조와 특성 DNA는 이중 나선 구조로 구성되며, 당과 인산이 골격을 이루고 염기가 수소 결합으로 쌍을 이룹니다. DNA 염기는 아데닌, 티민, 구아닌, 시토신으로 이루어져 있으며, 이들 사이에는 특정한 상보 관계가 존재합니다. DNA 합성은 5' 말단에서 3' 말단 방향으로 일어나며, DNA 중합 효소가 중요한 역할을 합니다. Genomic DNA는 생명체의 유전 정보를 담고 있으며, 대부분의 생명체에서 히스톤 단백질과 결합한 상태로 염색체를 형성합니다. 2. DNA 추출 실험 이 실험에서는 혈액 샘플을 이용하여 Ge...2025.01.14
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플라스미드 DNA 추출과 Mini-prep 흡광도 분석2025.11.171. 플라스미드 DNA와 Mini-prep 플라스미드 DNA는 박테리아의 세포외에 존재하는 작은 원형 이중 가닥 DNA로, 염색체와 별도로 독자적으로 복제 및 증식할 수 있습니다. 유전자 재조합 기술에 사용되며 크기가 작아 정제가 용이합니다. Mini-prep은 형질전환된 세균을 배양한 후 플라스미드 DNA를 정제하는 과정으로, 알칼리 변성(alkaline lysis) 방법을 주로 사용합니다. 이 방법은 SDS와 수산화나트륨으로 세포를 파괴하고, 아세트산칼륨으로 중성화한 후 원심분리와 에탄올 침전법으로 DNA를 정제합니다. 2. D...2025.11.17
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마우스 꼬리로부터 게놈 DNA 추출 및 분석2025.01.041. 게놈 DNA 추출 실험을 통해 마우스 꼬리에서 게놈 DNA를 추출하는 과정을 이해하였습니다. 세포 용해, DNA 정제, 농도 측정 등의 단계를 거쳐 순도 높은 게놈 DNA를 얻을 수 있었습니다. 이 과정에서 주의해야 할 점들, 예를 들어 과도한 tapping이나 오염물질 혼입 등을 확인하였습니다. 2. DNA 전기영동 추출한 게놈 DNA를 아가로스 겔 전기영동을 통해 분석하였습니다. 10,000 bp 이상의 큰 DNA 단편이 가장 뚜렷하게 관찰되었지만 번진 모습(smear)을 보였고, 그 외에도 1,000-2,000 bp 및 ...2025.01.04
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Metagenomics 미생물 실험보고서2025.05.061. Metagenomics Metagenomics는 현재 약 99%의 미생물배양이 어렵다는 실험적인 한계를 보완하는 방법으로 직접환경샘플에서 DNA를 추출하여 Next-generationsequencing(NGS)를 진행하여 다양한 플랫폼을 이용하여 미생물의 군집구조(microbial community) 및 메타유전체(metagenome)를 분석하는데 이용되고 있다. 2. 토양 샘플 분석 이번 실험에서는 주변환경의 토양 sample을 채취하여 유전체 분석을 하는 방법을 이용했으며, 실험 과정은 토양 sample채취, 토양 samp...2025.05.06
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새로운 박테리아 종 동정을 위한 DNA 추출2025.05.081. DNA 추출 과정 본 실험에서는 미지 균주의 DNA를 추출하는 과정을 수행하였다. 균주를 PBS에 현탁하고 원심분리하여 세척한 뒤, lysozyme과 SDS를 처리하여 세포를 용균시켰다. 이후 PCI, chloroform을 이용하여 단백질과 불순물을 제거하고 에탄올 침전을 통해 DNA를 회수하였다. 최종적으로 0.1x SSC 완충액에 녹여 DNA 농도를 측정하였다. 그러나 260/280, 260/230 비율이 이상적인 수준에 미치지 못하여 순수한 DNA 추출에는 어려움이 있었던 것으로 나타났다. 2. DNA 추출 시약의 역할 ...2025.05.08
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식물 게놈 DNA 추출 실험2025.11.151. DNA 추출 원리 및 방법 식물 세포의 세포벽, 원형질막, 핵막을 분해하여 DNA를 선택적으로 추출하는 과정. Cornell extraction buffer를 이용한 세포 용해, chloroform:isoamyl alcohol을 이용한 단백질 제거, isopropanol을 이용한 DNA 침전, ethanol을 이용한 washing 등의 단계를 거쳐 순수한 genomic DNA를 얻는다. 각 시약은 특정한 역할을 수행하며, 온도와 시간 조절이 중요하다. 2. 추출 완충액의 구성 및 역할 Cornell extraction buff...2025.11.15
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미니프렙을 통한 플라스미드 DNA 분리 및 정량2025.11.161. 미니프렙(Minipreparation) 방법 E. coli에 형질전환된 플라스미드를 미니프렙 방법으로 분리하는 실험이다. Solution I(glucose, Tris-Cl, EDTA)에서 세포 용해 준비, Solution II(SDS, NaOH)에서 세포 용해 및 DNA 변성, Solution III(potassium acetate, glacial acetic acid)에서 중화 과정을 거친다. 최종 DNA 농도는 0.2322 µg/µl이었다. 효율 향상을 위해 bacterial pellet 제거, inverting으로 혼합,...2025.11.16
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생명공학실험 genomic dna preparationc 예비레포트2025.05.031. DNA (Deoxyribonucleic Acid) DNA는 자연계에 존재하는 2종류의 핵산 중 디옥시리보오스를 함유한 것의 총칭을 말하며, 디옥시리보핵산(Deoxyribonucleic Acid)의 약칭이다. DNA는 뉴클레오타이드의 중합체인 2개의 긴 가닥이 서로 꼬여 있는 이중나선구조로 고분자 화합물이다. DNA의 기본 단위는 뉴클레오타이드이며, 뉴클레오타이드는 염기, 당, 인산으로 구성된다. 2. DNA preparation 종류 DNA에는 Genomic DNA, Plasmid DNA, Phage DNA, cDNA (com...2025.05.03
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플라스미드 DNA 추출 및 분석 실험 보고서2025.11.171. 플라스미드 플라스미드는 세균의 세포 내에 복제되어 독자적으로 증식할 수 있는 염색체 이외의 DNA 분자이다. 세균의 생존에 필수적이지는 않으며 비교적 크기가 작고 세포 상호간에 전달이 잘 된다. 복제 원점을 가지고 있어 복제가 가능하며 유전자가 있다면 정상적으로 발현된다. 접합 과정이나 직접 세포막을 통해 다른 세균에게 전달될 수 있어 세균의 유전적 다양성을 높여준다. 2. 플라스미드 추출 원리 플라스미드 추출은 플라스미드를 제외한 세균의 다른 부분을 제거하는 것으로, 특히 플라스미드와 염색체 DNA를 분리하는 것이 중요하다....2025.11.17
