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생명과학실험1 Immunoprecipitation (IP)2025.01.171. Immunoprecipitation (면역침강법, IP) 면역침강법은 항원-항체 반응을 이용하여 원하는 단백질을 분리하고자 하는 실험이다. 단백질은 특정한 항체에만 결합하는 항체 특이성을 가지고 있으므로, 검출하고자 하는 target protein도 특정한 종류의 항체와만 결합하게 된다. 항원-항체 복합체가 바닥에 가라앉도록 하기 위해서 먼저 항체와 Bead를 붙이고, bead와 결합한 항체가 다시 단백질과 결합하여 단백질-항체-Bead 복합체를 형성하게 된다. 이 복합체가 원심분리를 통해 침강하게 되면서 원하는 단백질을 분리...2025.01.17
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이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(Western Blot)2025.01.231. Western Blot 원리 Western Blot은 항원-항체 반응을 이용하여 여러 단백질의 혼합물로부터 특정 단백질을 찾아내는 방법이다. 이 실험에서는 단백질의 SDS-PAGE 분리, 단백질의 membrane으로의 transfer, 항원-항체 반응 및 항체에 부착된 효소의 반응에 의한 발색 반응 등의 실험 원리 및 기법을 습득한다. 2. SDS-PAGE와 Stacking/Resolving Gel의 차이 Stacking gel은 단백질 시료를 gel에 loading 했을 때 모든 시료가 동일한 시작점에서 출발할 수 있도록 하...2025.01.23
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면역세포의 염색 및 조직 슬라이드 제작2025.11.151. 조직의 고정법 조직 고정은 세포를 살아있는 상태와 같이 보존하는 과정으로 열고정과 화학고정이 있습니다. 화학고정은 고정액을 처리하여 염색약이 세포막을 통과하도록 돕고 세포 내 단백질과 핵산을 교차결합시킵니다. 포르말린 용액을 사용하며 고정액의 양은 조직 용적의 10-20배 정도이고 저온에서 약 5시간 소요됩니다. 포르말린은 공기 중 산소나 빛에 의해 포름산이 발생할 수 있으므로 산화방지제 사용이 필요합니다. 2. 슬라이드 제작 과정 슬라이드 제작은 고정, 탈수, 투명화, 파라핀 침투와 포매, 절편화, 파라핀 제거, 수화, 염색...2025.11.15
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유전자 가위 기술을 이용한 코로나 검사2025.05.061. 즉석 코로나 바이러스 진단법 즉석 코로나 바이러스 진단법은 기존의 PCR 증폭검사나 면역항체 검사와 달리 유전자 가위 기술인 CRISPR-Cas 시스템을 활용하여 신속하고 정확한 코로나 바이러스 검출이 가능합니다. Cas13a 효소를 이용하여 RNA 단일 가닥을 절단하고 주변의 모든 RNA를 분해하는 방식으로 코로나 바이러스를 검출할 수 있습니다. 이 방식은 기존 진단법에 비해 검사 시간이 크게 단축되고 고가의 장비나 전문 인력이 필요하지 않아 현장에서 손쉽게 사용할 수 있습니다. 2. CRISPR-CAS 시스템 CRISPR-...2025.05.06
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Protein Electro-transfer and Western blot2025.01.231. Western blotting Western blotting은 단백질에 대한 blotting 기술을 뜻하며, 항원-항체 반응을 이용한다. 단백질 혼합물을 polyacrylamide gel에서 SDS-PAGE를 이용하여 크기에 따라 분리하고 membrane으로 electro-transfer하여 흡착시킨 후 membrane 표면에서 항체를 이용하여 원하는 단백질의 존재를 확인하는 전반적인 과정을 의미한다. 2. SDS의 역할 및 원리 SDS-PAGE는 SDS가 단백질에 일정 간격으로 결합하여 charge density를 일정하게 ...2025.01.23
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생화학실험 단백질의 정성분석2025.05.061. Western blot Western blot은 단백질을 폴리아크릴아마이드 겔에서 전기영동을 이용하여 분리하고, 니트로셀룰로오스 membrane에 옮긴 후 찾고자 하는 단백질의 항체(1차 항체)와 결합시킨 후 이 항체와 반응하는 2차 항체를 이용하여 밴드를 형상화하는 기술이다. 이 기술은 크기별 분리, 단백질을 고체 지지체로 이동, 1차 및 2차 항체를 사용하여 표적 단백질을 표시하여 시각화하는 3가지 요소를 사용한다. 2. SDS-PAGE SDS-PAGE는 질량에 의한 단백질 분리가 가능한 전기 영동법이다. 폴리아크릴아마이드...2025.05.06
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비예기항체선별검사2025.01.131. 비예기항체 선별검사 비예기항체 선별검사는 환자의 혈청 내에 비예기항체가 존재하는지 확인하는 검사입니다. 비예기항체는 예측할 수 없는 항체로, ABO 혈액형 이외의 Rh, Duffy, Kidd 및 Kell 등의 혈액형군에 대한 항체를 의미합니다. 이 검사는 총 3단계로 진행되며, 각 단계는 온도에 따라 반응하는 항체의 원리를 이용합니다. 1단계는 실온 식염수법, 2단계는 37°C Albumin 법, 3단계는 간접항글로불린검사(IAT법)입니다. 이를 통해 IgM, IgG 타입의 비예기항체 존재 유무를 확인할 수 있습니다. 2. 비...2025.01.13
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ELISA-효소면역측정법2025.01.171. ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)는 생물학 및 의학 연구에서 항원과 항체를 이용하여 특정 단백질, 바이러스, 세균 등의 존재와 농도를 정량화하는 데 널리 사용되는 강력한 기술이다. 이 효소 면역측정법은 항원-항체 상호작용을 기반으로 하여 높은 민감도와 특이성을 제공하며, 다양한 형태의 ELISA(간접 ELISA, 경쟁적 ELISA, 샌드위치 ELISA 등)를 통해 여러 실험 목적에 맞게 적용될 수 있다. 2. 간접 ...2025.01.17
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Western blot 보고서2025.05.071. Western blot Western blot은 특정 단백질을 검출하는 기법으로, 단백질 혼합물을 전기영동으로 분리하고 membrane에 옮긴 후 항원-항체 반응을 이용하여 목표 단백질을 찾아내는 방법이다. 이 과정에는 샘플 준비, 전기영동, blotting, 검출 등의 단계가 포함된다. 2. 단백질 분리 단백질 혼합물은 SDS-PAGE를 통해 크기에 따라 분리된다. SDS는 단백질의 이차, 삼차 구조를 풀어 단백질이 분자량에 따라 이동할 수 있게 한다. 전기영동 후 단백질은 membrane으로 옮겨진다. 3. 항원-항체 반응...2025.05.07
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단백질의 분석(질량, 서열, ELISA) 요약정리2025.04.301. 단백질 질량 측정 단백질의 질량을 측정하기 위해서는 단백질을 기체 상태의 이온으로 바꾼 후 전기장 하에서 질량 대 전하비(m/z)를 구하는 방식을 사용한다. MALDI와 ESI 기법을 통해 단백질을 이온화할 수 있으며, 이후 TOF 분석기를 이용하여 질량을 측정할 수 있다. 2. 항체를 이용한 단백질 검출 및 정량 항체는 특정 단백질에 결합하여 면역 반응을 일으키므로, 이를 이용하여 단백질을 검출하고 정량할 수 있다. ELISA 기법은 항체와 연결된 효소를 이용하여 단백질의 존재 유무와 양을 측정할 수 있다. Western b...2025.04.30
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