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재조합 플라스미드 DNA 클로닝 예비2025.05.011. 플라스미드 DNA 플라스미드는 주 염색체와 분리되어 있어 독자적으로 복제가 가능한 환형 DNA이다. 대부분은 세균에 존재하며 생존에 필수적이진 않지만 특정 상황에 유용한 유전자를 포함한다. 플라스미드는 클로닝 벡터로 많이 이용되며 재조합된 플라스미드를 세균에 유입 후 증식시켜 DNA양을 늘린다. 또는 발현벡터로 세포내의 전사,번역기구를 이용해 재조합 유전자를 발현시켜 단백질을 대량 생산시킬 때도 이용 가능하다. 2. 클로닝 생명공학에서 cloning은 세포나 DNA조각을 복제하는 과정이다. 목적DNA조각을 다량 생산하거나 DN...2025.05.01
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DNA 클로닝과 유전공학 기술2025.11.121. DNA 클로닝 기술 DNA 클로닝은 특정 유전자를 선택적으로 증폭하는 DNA 복제기술입니다. 제한효소로 DNA를 절단하고, 클로닝 벡터에 연결한 후, 숙주세포에 도입하여 DNA를 증폭시킵니다. 5단계 과정으로 진행되며: ①DNA 절단(제한효소 사용), ②벡터 선택(플라스미드, 바이러스), ③DNA 연결(DNA 리가제), ④숙주세포 이동, ⑤선별 배양입니다. 재조합 DNA 기술 또는 유전공학이라고도 불립니다. 2. 클로닝 벡터와 발현 벡터 클로닝 벡터는 DNA 증식 및 분리에 사용되며, 자가복제, 마커 선택, 제한효소 부위를 갖...2025.11.12
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아가로스겔 전기영동을 이용한 플라스미드 클로닝 확인2025.11.151. 아가로스겔 전기영동 Restriction digestion 및 uncut plasmid를 통해 클로닝 여부를 확인하는 실험 방법입니다. 아가로스겔을 이용하여 DNA 샘플을 전기영동으로 분리하고, band shift 및 insert 유무를 관찰하여 클로닝 성공 여부를 판단합니다. 1X TAE buffer에 아가로스를 녹여 겔을 만들고, EtBr을 첨가한 후 DNA 샘플을 로딩하여 110V에서 전기영동을 수행합니다. 2. 플라스미드 클로닝 검증 Restriction digestion으로 처리된 DNA와 uncut plasmid를 ...2025.11.15
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DNA 클로닝 및 PCR 실험을 통한 DNA 기술 이해2025.11.161. DNA 클로닝 및 형질전환 DNA 클로닝은 원하는 DNA를 조작하고 복제하여 많은 복제 DNA를 얻는 기술입니다. 형질전환은 외부 유전자를 세포 내로 넣어 숙주세포가 새로운 유전형질을 갖게 되는 과정입니다. E.coli의 형질전환은 화학적 형질전환과 전기천공법으로 나뉘며, 화학적 형질전환은 CaCl2를 처리하여 세포벽을 중성화하고 heat shock을 통해 DNA 이동을 촉진합니다. Plasmid는 origin, MCS, lacZ 유전자, ampicillin resistance gene으로 구성되어 있습니다. 2. PCR(중합...2025.11.16
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PCR 예비레포트: 유전자 클로닝을 위한 PCR 증폭2025.11.151. PCR (중합효소 연쇄반응) PCR은 특정 DNA 서열을 선택적으로 증폭하는 분자생물학 기법입니다. 본 실험에서는 유전자 클로닝을 위해 미리 선정한 특정 유전자를 제작된 프라이머를 이용하여 PCR로 증폭합니다. 이 과정에서 Taq 중합효소, 주형 DNA, Forward/Reverse 프라이머, dNTP 혼합물, 버퍼 등이 사용되며, PCR 기계에서 온도 사이클을 통해 DNA 변성, 프라이머 결합, DNA 합성 단계를 반복하여 목표 DNA를 기하급수적으로 증폭합니다. 2. 프라이머 (Primer) 프라이머는 DNA 중합효소가 D...2025.11.15
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서울대 생물학실험 A+ 실험 보고서 32025.05.101. DNA 클로닝과 형질전환 DNA 클로닝은 원하는 DNA 조각을 복제하여 여러 개의 DNA 복사본을 얻는 과정을 의미합니다. 이를 위해 DNA 조각은 벡터라고 불리는 DNA 분자와 재조합되는 과정을 거치며, DNA 조각은 클로닝하고자 하는 유전자나 특정한 염기 서열을 포함하고 있습니다. 일련의 과정 후 복제된 클론은 세포에 삽입되며, 복제 및 유전자 발현에 이용됩니다. 이렇듯 외부 DNA가 도입되며 세포의 유전 형질에 변화가 생기는 경우를 형질 전환이라 일컫는데, 일반적으로 형질 전환에는 plasmid 벡터가 사용됩니다. 2. ...2025.05.10
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분자생물학실험 Gene cloning_TAE buffer 제작2025.04.271. TAE buffer 제작 TAE buffer 제작(30ml 50X TAE buffer)의 목적, 재료, 방법 등을 자세히 설명하고 있습니다. TAE buffer는 DNA 전기영동에 사용되는 완충액으로, Tris, acetic acid, EDTA 성분으로 구성됩니다. 제작 방법은 각 성분의 양을 계산하여 증류수와 혼합하고 멸균하는 과정으로 이루어집니다. 2. PCR(중합효소 연쇄반응) PCR은 DNA 증폭 기술로, DNA 중합효소를 사용하여 원하는 DNA 염기서열을 대량으로 증폭시킬 수 있습니다. PCR에 필요한 주요 요소는 주...2025.04.27
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[A+ 보장!] 연세대 의대 의예과 1학년 General Biology 실험 레포트 Genomic DNA extraction2025.01.141. DNA 클로닝 DNA 클로닝은 제한 효소를 이용하여 특정한 유전자를 절단하는 과정에서 시작한다. 제한 효소는 특정한 염기들의 서열을 인식하고 이를 절단하는 기능을 수행한다. 또한 제한 효소는 종류에 따라 점착 말단과 무딘 말단을 형성한다. 다음으로 표적 유전자를 벡터에 삽입해야 하며, 이 과정에서 DNA 연결 효소가 사용된다. 마지막으로 재조합 플라스미드를 박테리아에 다시 도입한다. 2. 젤 전기영동 젤 전기영동은 동일한 DNA를 찾는 과정에서 유용하게 사용된다. 동일한 DNA를 동일한 제한 효소로 처리한다면 동일한 길이의 D...2025.01.14
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박테리아의 형질전환 실험 보고서2025.01.231. 박테리아의 형질전환 이 보고서는 생화학 실험실에서 수행한 박테리아의 형질전환 실험에 대한 내용을 다루고 있습니다. 실험의 목적은 클로닝 기술을 이해하고, 박테리아의 유전형질을 형질전환시켜 형질전환 효율을 구하는 것입니다. 보고서에는 박테리아의 특성, 클로닝과 형질전환의 원리, 실험에 사용된 시약 및 기구, 실험 방법과 결과, 고찰 등이 자세히 설명되어 있습니다. 1. 박테리아의 형질전환 박테리아의 형질전환은 매우 중요한 생물학적 과정입니다. 박테리아는 자신의 유전자를 다른 박테리아에게 전달할 수 있는데, 이를 통해 유용한 유전...2025.01.23
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미래 바이오기술 - 벡터 바이러스(현 치료기술) 연구보고서2025.05.111. 클로닝 클로닝은 원하는 유전자 염기서열 부위를 따로 PCR을 통해 증폭시킨 후 원형 벡터에 전환시키는 과정을 거치게 된다. 1시간 정도 걸리는 과정이며, 완성된 벡터를 대장균과 함께 배양시켜 대장군이 증식함에 따라 함께 증폭될 수 있게 한다. 클로닝을 마친 후에는 실제로 대장균에 잘 클로닝 되었는지 플라스미드 DNA형태로 원하는 부위를 다시 추출하여 염기서열의 배열을 통해 확인하게 한다. 2. 레트로바이러스 벡터 레트로 바이러스는 DNA와 RNA 역전사효소를 지니고 있다. 가장 큰 특징은, 자신을 DNA로 바꾼 뒤 숙주세포의 ...2025.05.11
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