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SDS-PAGE를 이용한 단백질 크기 분석2025.11.161. SDS-PAGE 원리 SDS-PAGE는 단백질에 음이온 계면활성제인 SDS(Sodium Dodecyl Sulfate)를 처리하여 단백질을 1차 구조로 변성시키고 음전하를 띠게 한 후, 전기장을 가해 polyacrylamide gel 내에서 단백질을 이동시켜 크기를 측정하는 방법이다. SDS는 단백질의 비공유 상호작용을 끊고 단백질의 원래 전하보다 훨씬 강한 음전하를 부여하여 단백질의 질량에 비례하는 분리를 가능하게 한다. 2. 실험 결과 및 해석 본 실험에서 Protein A는 46kDa, Protein B는 56kDa로 측정...2025.11.16
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단백질의 분석(질량, 서열, ELISA) 요약정리2025.04.301. 단백질 질량 측정 단백질의 질량을 측정하기 위해서는 단백질을 기체 상태의 이온으로 바꾼 후 전기장 하에서 질량 대 전하비(m/z)를 구하는 방식을 사용한다. MALDI와 ESI 기법을 통해 단백질을 이온화할 수 있으며, 이후 TOF 분석기를 이용하여 질량을 측정할 수 있다. 2. 항체를 이용한 단백질 검출 및 정량 항체는 특정 단백질에 결합하여 면역 반응을 일으키므로, 이를 이용하여 단백질을 검출하고 정량할 수 있다. ELISA 기법은 항체와 연결된 효소를 이용하여 단백질의 존재 유무와 양을 측정할 수 있다. Western b...2025.04.30
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SDS-PAGE를 이용한 AP 단백질 분석 및 Coomassie Blue Staining2025.01.171. SDS-PAGE를 이용한 단백질 분석 SDS-PAGE 실험을 통해 AP 단백질의 크기와 순도를 확인할 수 있었습니다. SDS-PAGE 과정에서 단백질의 3차 구조를 제거하고 크기에 따라 분리되도록 하여, 목표 단백질인 AP 단백질을 선별적으로 확인할 수 있었습니다. 또한 Coomassie Blue 염색을 통해 단백질 밴드를 시각화하여 분석할 수 있었습니다. 2. 단백질 정제 과정 단백질 정제 과정에서 target 단백질 이외의 비특이적으로 결합한 단백질들이 씻겨나가면서 target 단백질의 순도가 높아지는 것을 확인할 수 있었...2025.01.17
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단백질 정량분석 실험 예비레포트2025.11.171. 단백질 정량 분석법 단백질 정량 분석은 시료에 포함된 단백질의 양적 관계를 확인하기 위한 분석으로 많은 생화학 실험의 기본이 된다. 주요 분석법으로는 UV법, Lowry법, BCA법, Bradford법 등이 있다. UV법은 단백질을 구성하는 아미노산 중 방향족 고리를 지닌 티로신과 트립토판이 파장 280nm의 자외선을 잘 흡수한다는 점을 이용하며, Lambert-Beer's Law에 의해 흡광도와 단백질 농도는 비례 관계를 가진다. 2. 단백질의 구조와 기능 단백질은 약 20가지의 다른 아미노산들이 펩타이드 결합에 의해 길게 ...2025.11.17
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닭 배아 단백질 전기영동 결과보고서2025.04.261. 전기영동 전기 영동은 시료 속 단백질 아미노산의 R group이 특유의 전하를 모두 음극 처리하여 단백질의 질량에 따라 ladder가 나타나도록 하는 방법입니다. 이때 단백질과 결합력이 좋은 계면활성제인 sodium dodecyl sulfate buffer를 이용하면 단백질의 구조를 풀어 선형으로 만들고, 구조가 풀린 단백질에 달라 붙어 음극을 띠도록 만들 수 있습니다. 이러한 방법으로 단백질이 분자량에 따라 이동하도록 만들 수 있습니다. 2. RIPA buffer RIPA buffer는 pH를 유지하는 완충용액 역할을 하며,...2025.04.26
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[약학실습 A+] 단백질 분리 정제 결과레포트2025.01.181. 단백질 분리 정제 본 실험에서는 Size Exclusion Chromatography 기법을 이용하여 BSA와 Lysozyme으로 구성된 단백질 혼합 샘플을 분리 정제하였다. FPLC 장비를 사용하여 분리된 단백질 분획을 수집하고, UV spectroscopy를 통해 각 분획의 농도를 측정하여 수득률을 계산하였다. 실험 결과, BSA의 수득률은 24%, Lysozyme의 수득률은 16.16%로 나타났다. 이는 일반적으로 기대되는 90% 이상의 수득률에 크게 미치지 못하는 수준으로, 시간이 지나면서 단백질 구조가 분해되었기 때문...2025.01.18
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PAGE를 이용한 단백질 검정 실험 보고서2025.05.141. 단백질 전기영동 이번 실험은 단백질의 전기영동을 통해 말 혈청 속 단백질의 크기를 확인하기 위한 실험입니다. 전기영동은 주로 단백질의 순도나 성질의 분석 및 분리에 사용하는 방법으로, 단백질 분자가 이동하는 속도는 각 단백질이 가지고 있는 전기적 or 물리적 상태에 따라 서로 다르기 때문에 분리가 일어나게 됩니다. 이번 실험에서는 SDS-PAGE 방법을 사용해 실험을 진행했습니다. 2. SDS-PAGE 원리 SDS-PAGE는 Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis...2025.05.14
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생화학 실험/실습 보고서 (전기영동을 이용한 단백질의 관찰)2025.01.231. SDS-PAGE SDS-PAGE는 도데실황화 나트륨 폴리아크릴아마이드 겔 전기영동으로, 단백질이 전기장에 가해진 gel에서 크기에 따라 이동속도가 다름을 이용해 이들을 분리 및 분석하는 기법이다. SDS는 단백질의 3차원 구조를 풀어주고 단백질이 같은 전하/분자량을 가지도록 만들어준다. 단백질이 running gel에서 크기에 따라 이동성을 다르게 나타내는 원리를 이용하여 단백질을 분리한다. 2. 등전점 전기영동 등전점 전기영동은 단백질을 pH 기울기가 존재하는 gel에 놓고 전기장을 가해 주면, 단백질이 환경에 따른 전하를 ...2025.01.23
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[만점 레포트] 연세대학교 생화학실험(1) 7주차 Peptide Mass Finger-Printing2025.05.041. MALDI-TOF 질량분석법 MALDI-TOF 질량분석법은 고분자 물질에 대해 시료의 분해 없이 기화/이온화가 가능한 방법으로, 일반적으로 질량이 크고 열에 불안정한 생체 고분자나 합성 고분자에 이상적으로 적용할 수 있다. 이 실험에서는 MALDI 이온화 장치와 TOF 질량 분석기를 이용하여 단백질을 동정하는 방법을 공부한다. 2. 단백질 동정 MALDI-TOF 질량분석법을 이용하여 단백질을 동정하는 과정을 설명한다. 시료를 MALDI 장치에 주입하고 질량 분석기로 분석한 후, 결과 스펙트럼을 데이터 검색 엔진에 입력하여 단백...2025.05.04
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[생화학실험]단백질 분리정제 및 기능분석 - buffer 만들기2025.05.051. 단백질 분리정제 및 기능분석 이 실험에서는 단백질 분리정제 및 기능분석을 위한 준비 과정으로 buffer를 제조하는 방법을 다룹니다. Buffer는 pH 변화에 영향을 받지 않는 용액으로, 생체반응에서 생성되는 산과 염기를 흡수할 수 있습니다. 실험에서는 1M Tris-HCl (pH 7.4), NaCl, MgSO4 stock solution을 제조하고, 이를 이용해 다양한 NaCl 농도의 elution buffer를 만드는 과정을 설명합니다. 또한 pH 미터기 사용법과 주의사항, 그리고 alkaline phosphatase 정...2025.05.05
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