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A+ 생화학실험 <3주차. Agarose Gel Electrophoresis> 레포트2025.01.201. 겔 전기영동 겔 전기영동은 분자의 크기나 전하에 따라 DNA, RNA, 단백질을 비롯한 생물학적 분자들을 분리하는 실험방법 중 하나입니다. 전기영동의 원리는 gel matrix (주로 agarose 혹은 polyacrylamide) 내에 시료를 넣고, 양극과 음극으로 전기장을 가하면 분자들이 전하의 성질에 따라 이동하게 되는 것입니다. 분자의 크기 및 전하밀도에 따라 이동 속도에 차이가 발생하기 때문에, 서로 다른 크기 혹은 전하를 가진 분자들을 분리할 수 있습니다. 겔 전기영동에서 분자의 이동속도에 영향을 미치는 요인에는 입...2025.01.20
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연세대학교 생화학실험(1) 6주차 Peptide Mass Fingerprinting In-gel Digestion2025.05.041. Peptide Mass Fingerprinting (PMF) Peptide Mass Fingerprinting (PMF)은 단백질 동정을 위한 기술로, 단백질을 효소로 절단하여 생성된 펩타이드의 질량을 측정하고 데이터베이스와 비교하여 단백질을 식별하는 방법입니다. 이 기술은 SDS-PAGE를 통해 분리된 단백질 밴드에서 시작되며, 밴드를 절단하고 효소로 소화하여 생성된 펩타이드의 질량을 질량분석기로 측정합니다. 이렇게 얻은 펩타이드 질량 데이터를 데이터베이스와 비교하여 단백질을 동정하게 됩니다. 2. In-gel Digesti...2025.05.04
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생화학 실험 보고서 - 단백질 분리2025.01.271. 단백질 분리 이번 실험에서는 MCF-7 세포를 이용하여 동물 세포에서의 단백질 분리 과정을 이해하고 단백질 분석 및 연구를 위한 준비를 하였습니다. 단백질 분리를 위해서는 세포를 깨뜨리고 안정적인 버퍼 환경을 만드는 것이 중요합니다. 다양한 방법으로 세포를 파괴할 수 있으며, 이번 실험에서는 scraper를 사용하여 MCF-7 세포를 깨뜨리고 RIPA 버퍼와 protease 억제제를 첨가하여 단백질을 추출하였습니다. 최종적으로 원심분리를 통해 상층액에 분리된 단백질을 -80°C에 보관하였습니다. 1. 단백질 분리 단백질 분리는...2025.01.27
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생화학 실험 보고서 - 동물세포 배양 및 관찰2025.01.271. 동물세포 배양 이 실험은 MCF-7 세포를 사용하여 동물세포의 배양 과정을 이해하고 관찰하는 것을 목적으로 합니다. 동물세포는 핵, 세포질, 세포막 등의 세포 내 구조를 가지고 있으며, 세포 간 상호작용을 통해 조직과 기관을 형성합니다. 동물세포 배양을 위해서는 적절한 배지, 온도, pH 등의 조건이 필요하며, 계대배양을 통해 세포를 지속적으로 증식시킬 수 있습니다. 이번 실험에서는 부착성 세포인 MCF-7 세포를 사용하여 배양 과정을 거치고, 현미경으로 세포의 변화를 관찰하였습니다. 2. 세포 배양 기술 세포 배양은 인공적으...2025.01.27
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A+ 생화학실험 <6주차. Plasmid DNA Miniprep> 레포트2025.01.201. Plasmid DNA Plasmid DNA는 박테리아 내에 존재하는 extrachromosomal DNA로, 자체적 복제가 가능한 복제 기점을 가지고 있습니다. 생존에 필수적이지 않은 정보를 담고 있으며, 항생제 내성 유전자 같은 선택적 마커가 포함되기도 합니다. 이를 통해 항생제가 포함된 배지에서 cell-selection을 진행할 수 있으며, 이로부터 유전자 발현 여부를 조사할 수 있습니다. 또한 plasmid DNA는 super coiled 형태의 DNA로, 유전자 조작, 분리, cloning 등 유전공학 분야에 용이하게...2025.01.20
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A+ 생화학실험 <5주차. Transformation> 레포트2025.01.201. Competent cell (DH5α) DH5α는 recA1 유전자의 160번 아미노산이 glycine에서 aspartic acid로 변이되는 돌연변이로 인하여 endonuclease의 기능을 상실하고 재조합 효소의 활성을 억제되었다. 이에 삽입된 plasmid DNA가 세포 내에서 안정적으로 유지되고 분해되지 않도록 하여, 높은 transformation efficiency(1×10^8 cfu/μg)를 가진다. 2. Plasmid DNA Plasmid DNA는 박테리아의 chromosomal DNA와 물리적으로 분리되어 있으...2025.01.20
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[만점 레포트] 연세대학교 생화학실험(1) 13주차 원심분리를 이용한 마우스 혈액면역세포 분리2025.05.041. 마우스 말초혈액 단핵세포 분리 마우스 말초혈액에서 단핵세포를 원심분리 방법을 이용하여 분리하는 실험 내용이 포함되어 있습니다. 말초혈액 단핵세포에는 림프구, 단핵구, 자연살해세포 등이 포함되며, 이를 분리하여 면역학 연구에 활용할 수 있습니다. 2. 림프구 아집단 분리 말초혈액 단핵세포에는 다양한 림프구 아집단이 포함되어 있습니다. 이 실험에서는 원심분리를 통해 림프구 아집단을 분리하는 방법이 설명되어 있습니다. 이를 통해 각 림프구 아집단의 특성을 연구할 수 있습니다. 3. 세포 생존율 측정 분리된 말초혈액 단핵세포의 생존율...2025.05.04
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Western Blotting 레포트2025.01.211. Western Blotting Western Blotting은 단백질을 감지하고 양을 확인하여 분자량을 측정할 수 있는 방법입니다. 단백질을 polyacrylamide gel에서 전기영동으로 분리하고, nitrocellulose membrane에 옮긴 후, 찾고자 하는 단백질의 primary antibody와 secondary antibody를 이용하여 band를 형상화하는 과정입니다. 이 방법에는 Sample preparation, Electrophoresis를 위한 Gel preparation, Transfer, Antib...2025.01.21
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산성탈인산가수분해효소의 분리 및 정제 결과보고서2025.01.231. 산성 탈인산가수분해효소 이 실험의 목적은 세포 또는 조직(맥아)으로부터 산성 탈인산가수분해효소를 추출하고 정제하여 효소 활성도를 측정하는 것입니다. 산성 탈인산가수분해효소는 주로 리소좀에서 작용하며 다양한 생리적 과정에서 중요한 역할을 합니다. 이 효소는 특정 기질(PNPP)로부터 인산기를 떼어내는 가수분해 반응을 촉매합니다. 실험에서는 원심분리와 여과를 통해 효소를 포함한 상층액을 분리하고, MgCl2와 (NH4)2SO4를 이용한 염석 효과로 효소를 정제하였습니다. 2. 원심분리기 사용 원심분리기 사용 시 주의할 점은 로터의...2025.01.23
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[만점 레포트] 연세대학교 생화학실험(1) 7주차 Peptide Mass Finger-Printing2025.05.041. MALDI-TOF 질량분석법 MALDI-TOF 질량분석법은 고분자 물질에 대해 시료의 분해 없이 기화/이온화가 가능한 방법으로, 일반적으로 질량이 크고 열에 불안정한 생체 고분자나 합성 고분자에 이상적으로 적용할 수 있다. 이 실험에서는 MALDI 이온화 장치와 TOF 질량 분석기를 이용하여 단백질을 동정하는 방법을 공부한다. 2. 단백질 동정 MALDI-TOF 질량분석법을 이용하여 단백질을 동정하는 과정을 설명한다. 시료를 MALDI 장치에 주입하고 질량 분석기로 분석한 후, 결과 스펙트럼을 데이터 검색 엔진에 입력하여 단백...2025.05.04
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