"크로마토그래피법"의 검색결과 입니다.

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크로마토그래피 caffeine extraction hplc hplc 실험방법 tlc크로마토그래피 gas chromatography 생명과학 실험 카페인 추출 몰수

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"크로마토그래피법" 검색결과 2,361-2,380 / 2,521건

[전분]쌀의 전분의 중요성

하여 겔 크로마토그래피로 용출시켜 얻은 탄수화물비율F1(아밀로오스)F2(아밀로펙틴)F2/F1일반계형동진벼69.330.70.44추정벼70.329.70.42탐진벼72.527.50.38통일 ... 가용성 전분의 조제알칼리 침지법을 이용하여 분리한 쌀 전분 200mg을 98℃의 물 400㎖에 현탁 시킨 후 원심 분리하여 상징액인 열수 가용성 전분을 페놀-황산 방법으로 얻 ... -아밀라아제 분해 한도-전당과 환원당의 비율로 구하였다.?시료의 중합도-전당량과 환원당의 비로서 구하였다.*전당량-페놀-황산 방법사용*환원력-Park-Johnson법을 개량

리포트 | 8페이지 | 1,000원 | 등록일 2007.02.08

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[식물]크로마토그래피를 이용한 시금치색소 추출 결과 레포트

하는 색소를 멀리 이동시켜 관찰하기 쉽게 할 수도 있다.그리고 우리가 이번 실험에서 사용한 TLC는 종이 크로마토그래피에 비해 시료 반점(spot)이 매우 작기 때문에 뛰어난 해상력 ... PurposeChromatography의 원리를 이해하고 이를 통한 재료로부터 원하는 물질을 분리한다. 또한, 분석법의 원리를 이해하고 spectrophotometer의 사용법 ... 다. 이것을 흡광도법이라고 하며 이는 주로 자외선(ultraviolet, 180~320nm) 및 가시광선 (visible, 320~800nm)영역에서 빛의 흡수를 이용한다.아래

리포트 | 7페이지 | 2,000원 | 등록일 2006.09.19

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[단백질의 개론] 단백질의 종류와 구조 및 화학적 성질 및 정제

그래피, 박층 크로마토그래피 등으로 표준 물질과 비교 확인할 수 있다.Dansyl chloride법은 FDNB법과 마찬가지로 N-말단 아미노기를 표지 분자와 반응시키고 가수분해한 후 ... 에 의FDNB법(1-fluoro-2,4-dinitrobenzene)은 1945년 Sanger가 개발한 가장 고전적인 방법이다. 1-Fluoro-2,4-dinitrobenzene ... 하면 N-말단 아미노산은 α-아미노기가 dinitrophenyl화한 유도체가 된다. Arginine 외의 N-dinitrophenyl 아미노산은 에테르로 추출할 수 있고 종이 크로마토

리포트 | 26페이지 | 3,000원 | 등록일 2003.11.19

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식물호르몬

의 정량적 연구에 가스크로마토그래피를 이용한 것이 그 동기가 되었다. 에틸렌은 과일의 성숙을 촉진하는 호르몬으로서만이 아니고 식물의 생장, 분화과정을 조절하는 호르몬이라는 인식 ... 식물에 더 많이 함유되어 있다고 한다.지베렐린은 아베나실험법에 있어서 옥신과 같은 반응을 나타내지 않고, 또 지베렐린을 처리한 식물에는 엽록소가 적다는 점 등으로 미루어 보아 옥신

리포트 | 12페이지 | 1,500원 | 등록일 2006.11.24

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[연소공학] 화염내의 농도계측

1. 서론완전연소란 연료가 산소와 결합하여 H2O와 CO2를 생성해 내는 것을 말한다.하지만 실제연소에서는 대기중 산소뿐만 아니라 질소도 다량 포함되어 있으므로 위와 같은 이상연소는 일어나기 힘들다. 이러한 원인으로 발생하는 연소생성물 (HC, CO, CO2, NOx)들은 환경공해의 주범으로 인식되어 많은 규제가 가해지고 있으며 이를 저감시키기 위한 노력이 행해지고 있다. 이번 실험에서는 화염내부와 정적연소실에서의 LPG연료를 연소시켜 연소생성물을 포집하여 그 농도를 측정하고 이를 데이터획득장치를 이용하여 저장 및 분석하는 것을 목적으로 한다.2. 이론적 배경가스 성분을 분석하는 대표적인 방법으로 습식분석법 질량분석법, 가스 크로마토그라피(gas chromatography), 흡광법, 광화학법, 열전도도법, 전기화학법 등을 들 수 있다.2.1 화학발광법(Chemiluminescene Method)화학발광이란 어떤 화학반응에 동반되어 생긴 들뜬 분자가 광자를 방출하는 현상이다. 이 방법은 화학발광법에 의하여 시료 대기중에 포함되고 있는 일산화질소 또는 질소산화물(NO+NO2)을 연속 측정하는 방법이다. 시료대기중의 일산화질소와 오존과의 반응에 의해 NO2가 생성될 때 생기는 화학발광정도가 일산화질소농도와의 비례관계가 있는 것을 이용해서 시료대기중에 포함되는 일산화질소 농도를 측정한다. 또한 질소산화물(NO+NO2)을 측정 할 경우 시료 대기중의 이산화질소를 컨버터를 통하여 일산화질소로 변환시킨 후 일산화질소의 측정과 같은 방법으로 측정하여 질소산화물에서 일산화질소를 뺀 값이 이산화질소가 된다. NO는 오존과 반응하여 높은 에너지 준위를 갖는 NO2*를 만든다. 이 NO2*가 보다 안정한 낮은 에너지 준위의 NO2로 이동하면서 빛을 발산하는데, 이 빛의 강도를 측정하여 NO의 농도를 결정하게 된다.NO + O3 → NO2* + O2식(1)NO2* → NO2 + hv식(2)NO2는 converter를 거치면서 Mo와 반응하여 NO로 환원된다. 환원된 NO는 공기시료이용하여 주어진 시료가 얼마만큼의 적외선을 흡수하는가를 정량화하여 공기시료 중의 CO농도를 결정하는 방법이다. Fig. 2에서 광원(Infra Red source)에서 나온 적외선은 chopper에 의해 각각 CO와 N2만이 존재하는 존재하는 gas filter wheel을 통과하게 된다. CO를 통과한 적외선은 이미 CO에 의해 모두 흡수되고, 만일 sample chamber를 통과하는 과정에서 적외선의 흡수가 있다면 이것은 CO에 의한 흡수가 아닌 다른 이유에 의한 것이 된다. 따라서 이 방법에 의하면 적외선을 전혀 흡수하지 않는 N2 filter를 통과한 적외선이 공기시료에 의해 흡수된 적외선의 강도를 측정하고 CO filter를 통과하였을 때의 강도를 측정하여 서로 보정하면 Co만의 적외선 흡수를 정확히 계산할 수 있게 된다.Fig. 2 비적외선 흡수법 원리도2.3 자외선 흡수법오존은 파장이 약 254㎚ 근처인 자외선을 선택적으로 흡수하는 특성을 갖는다. 이 원리를 이용하여 자외선(UV)을 흡수하는 정도를 측정함으로써 오존의 농도를 결정할 수 있다.Fig. 3에서 보면 공기시료와 오존이 제거된 기준시료 cell A와 cell B에 교대로 들어가고 각 cell에서는 오존이 없는 시료가 254㎚ 파장의 자외선을 흡수하는 정도와 오존이 포함된 공기시료가 같은 광선을 흡수하는 정도를 detector가 감지, 이를 비교하여 농도를 결정하게 되며 최종 농도는 각 cell의 평균값으로 결정된다.Fig. 3 자외선 흡수법 원리도2.4 가스크로마토그래피가스크로마토그래피는 운반가스(carrier gas)에 의하여 그로마토관내에 전개시켜 분리되는 각 성분의 크로마토그램을 이용하여 목적성분을 분석하는 방법으로 일반적으로 유기화합물에 대한 정성 및 정량분석에 이용한다. 가스크로마토 그래프 분석에 사용하는 검출기는 각각 그 목적에 따라 다음과 같은 것을 사용한다.2.4.1 열전도도 검출기(Thermal Conduct Detector, TCD) : 열전도도 검출기는 금속 필라멘트D) : 전자포획형 검출기는 방사선 동위원소(63 Ni, 3 H)로부터 방출되는 β선의 운반가스를 전리하여 미소전류를 흘려 보낼 때 시료중의 할로겐이나 산소와 같이 전자포획력이 강한 화합물에 의하여 전자가 포획되어 전류가 감소하는 것을 이용하는 방법으로 유기할로겐화합물, 니트로화합물 및 유기화합물을 선책적으로 검출할 수 있다.2.4.4 염광광도형 검출기(Flame Photometric Detector, FPD) : 염광광도형 검출기는 수소염에 의하여 시료성분을 연소시키고 이때 발생하는 염광의 관도를 분광학적으로 측정하는 방법으로서 인 또는 유황화합물을 선택적으로 검출할 수 있다. 운반가스와 조연가스의 혼합부, 수소공급부, 연소노즐, 광학필터, 광전자 증배관 및 전원 등으로 구성되어 있다.2.4.5 알칼리열 이온화검출기(Flame Thermionic Detector, FTD) : 알칼리열 검출기는 수소염이온화검출기에 알칼리 또는 알칼리토류 금속염의 튜브를 부착한 것으로 유기질소 화합물 및 유기염 화합물을 선택적으로 검출할 수 있다. 운반가스와 수소가스의 혼합부, 조연가스 공급구, 연소노즐, 알칼리원 가열기구, 전극 등으로 구성되어 있다.Fig. 4 가스크로마토그래피 원리도3. 실험장치연료 (LPG 또는 CH4), 산화제(공기), 질소 산화물 분석기, 가스 분석기, 버너, 샘플링 프로브, 2축 트래블스 장치, 정적 연소실, 데이터 획득장치 (LabVIEW, PCI-MIO-16E1)CO2 분석기탱크정적 연소실NOx 분석기점화장치컴퓨터Fig. 5 실험장치도3.1 질소산화물 분석기화염에서 발생되는 질소산화물 (NOx)의 국소 가스농도를 측정하기 위하여 질소산화물분석기(NOx Analyer, Rotork Analysis, model443)를 사용한다. NOx분석기는 샘플링 가스를 일정한 온도로 유지시키는 히터(Heater), 오존과 결합하여 화학발광에 의해 질소산화물을 측정하는 분석기(Analysis)와 샘플링 가스를 공급하는 펌프로 구성되어 있다. NOx분석기는 화학발ig.7 와 같이 석영으로 만들어진 샘플링 프로브(sampling probe)를 사용하였고 공간분해능을 높이기 위하여 샘플링 프로브의 입구 직경을 0.25mm로 한다. 연소가스 중에는 반응성이 강한 라디칼들이 많으며 이런 생성물들이 온도가 높아진 샘플링 프로브로 뽑으면 화염속의 반응이 지속되기에 샘플링 순간의 상태를 그대로 유지할 수 있도록 직경 5mm로 점차 확대하여 공기역학적으로 연소반응이 동결되는 형태로 제작한다. 또한 샘플링 프로브는 화염의 왜곡을 줄이기 위해 화염면에 직각으로 설치하여 실험을 수행한다.Fig. 7 샘플링 프로브3.4 정적연소실정적연소실을 내경 55mm, 폭 45mm, 체적 107㎤으로 외형은 각종 주변장치의 부착이 용이하도록 원통형 8각형 모양이다. 연소실의 전후면에는 가시화 및 연소 라디칼의 계측을 하기 위해 FS(Fused silica)창 (직격99mm, 두께 20mm)을 설치하였고 FS창과 연소기 사이에 기밀유지를 위해 석면을 삽입하였으며 연소농도측정에서는 초기압력이 높아 연소압력이 높아서 FS창의 파손을 우려하여 두랄루민으로 밀폐 후 실험을 수행한다. 정적연소실의 외측에는 점화플러그, 압력변환기, 흡기포트, 카트리지히터, 열전대를 설치한다.3.5 데이터 획득장치전압, 전류 등과 같은 세상의 신호를 측정 또는 제어하는 장치이며, 측정값을 분석·저장하기 위해 컴퓨터로 입·출력한다. DAQ보드를 사용하면, LabVIEW로 transducer와 인터페이스를 쉽게 하는 많은 툴이 내장되어 있다. 일반적으로 DAQ보드는 아날로그 신호를 읽고(A/D), 아날로그 신호를 발생하며(D/A변환), 디지털 신호를 입·출력하고, 카운터/타이머 동작을 통한 주파수 측정 및 펄스 발생 등의 역할을 한다.HardWare : Computer(Pentium급 이상)SoftWare : LabVIEW ProgramAD Converter : PCI-MIO-16E14. 실험방법 및 순서4.1 예혼합 화염내부의 질소산화물(NOx) 국소농도 측정4.1.1 질소산화물분석적연소실로 공급한다.4.2.3 점화장치 및 점화프로그램을 작동시켜 점화시킨다.4.2.4 배기포트를 개방하여 배기가스가 샘플링프로브를 통해 가스분석기로 유입시킨다.4.2.5 가스분석기의 LCD패널에서 농도를 확인한다.4.2.6 LabVIEW 프로그램을 이용하여 원하는 데이터를 저장한다.5. 실험결과5.1 예혼합화염내부의 NOx 국소농도 측정연료 : LPG산화제 : Air당량비 : 3연료유량 : 100cc/min산화제 유량 : 890.67cc/min5.1.1 화염내부의 축방향 농도Table 1. 화염내부의 축방향 농도위치평균(ppm)114.4219.2328.7430.55162.55.1.2 화염내부의 반경방향 농도Table 2. 화염내부의 반경방향 농도위치평균(ppm)122.2244.4352.54117.8559.5Fig. 9 예혼합화염내부의 NOx 국소농도 측정5.1.3 산화제 유량 계산LPG 완전 연소식0.6C3H8+0.4C4H10+5.6(O2+3.773N2)→3.4CO2+4.4H2O+21.1288N2)식(1)LPG 1몰당 공기26.72몰이 완전연소에 필요하다. 그러므로 체적은 LPG 100cc에 공기 2672cc가 필요하다. 그리고 당량비가 3이므로 식(2)에 의해 산화제 유량을 구할수 있다.3= {{(A/F)}_{s} } over {{(A/F)}}={{(2672/100)}} over {{(x/100)}}식 (2)∴산화제 유량x=890.67cc/min5.2 정적연소실에서의 CO, CO2 농도 측정연료 : LPG산화제 : Air당량비 : 0.95총 Tank 압력 : 5kg/㎠연료의 압력 : 0.174 kg/cm2산화제의 압력 : 4.826 kg/cm2Table 3. 혼합기 초기압력에 따른 정적연소실 농도초기압력(psi)CO 농도(%)CO2 농도(%)1220.014.52310.957.93420.0113.54500.0113.94Fig. 10 정적연소실에서의 CO, CO2 농도 측정5.2.1 탱크 내 연료 및 공기의 압력 계산연료와 산화제의 기체상수는 다음과 같다.{R다.

리포트 | 11페이지 | 1,000원 | 등록일 2002.11.29

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[전기전도도]전기전도도

크로마토그래피법으로 이온을 분리한 후 이온을 검출하는데 이용하 는 것이다. 또 전도도 측정법은 알칼리 또는 산과 같은 한가지의 강전해질만이 녹아 있는 용액의 농도를 측정하는데 사용 ... 를 얻기 위해서는 Rs를 건더너 연 결된 가변 커페시터 C를 전기 전도도 용기와 용액의 커페시턴스가 균형이 되도록 조절한다. 이 커페시턴스를 모르면 시행착오법을 쓴다. 커페시터 C ... 을 측정하 여 정한다. 용기상수는 용기를 사용할 때마다 다시 결정하여야 한다.(2) 전도도법의 종류 및 적정1) 직접 전도도법 분석직접 전기전도도 측정법은 모든 전하를 띤 각종

리포트 | 13페이지 | 1,500원 | 등록일 2006.07.05

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[일반화학실험] 온도계 보정 및 녹는점 측정

)와 모세관 물질의 상호작용을 이용한 크로마토그래피등에 그 특징이 이용된다. 한편, 세관(細管)으로서 미량의 액체를 추출하기 위한 장치나 온도계에도 이용된다.4. 기구 및 시약녹는점 ... 에서 혼합물(混合物)과 구별된다. 즉, 그 제조법 ·소재 등이 항상 일정한 조성을 가지며, 또 어느 부분을 취해서 보아도 성질이 같고 원래의 성분(成分)과 다르다. 예를 들면 물

리포트 | 4페이지 | 1,000원 | 등록일 2004.11.07

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[일반 생물학 실험]단백질 추출과 전기영동

taini발 및 재분화법의 확립이다.분리된 clone의 유전자조작법1. 유용유전자의 선정 및 분리지난 10년간 유전자 cloning 및 확인 기술은 장족의 발전을 보았고 식물유전자도 다수 ... 단백질을 먼저 생화학적으로 규명해야만 가능하고 그 방법 자체가 예민하지 못하다는 단점을 가지고 있다.따라서 앞으로는 유전자 표지법(gene tagging)이나 chromosome ... walking 같은 유전학적 방법을 써서 표현형에 근거한 식물유전자 분리법이 많이 개발될 전망이다.현 단계에서 식물형질전환은 유용유전자의 분리가 가장 큰 걸림돌이며, 이 문제

리포트 | 15페이지 | 1,000원 | 등록일 2006.04.15

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각종 분석기기의 원리 및 측정 가능한 성분에 대하여

.?3. 개 요3.1 이 법에서 충진물로서 흡착성 고체분말을 사용할 경우에는 기체-고체 크로마토그래프, 적당한 담체에 고정상 액체를 함침 시킨 것을 사용할 경우에는 기체-액체 크로마토 ... 그래피법이라 한다.?3.2 일정유량으로 유지되는 운반가스는 시료도입부로부터 분리관내를 흘러서 검출기를 통하여 외부로 방출된다. 이때 시료도입부, 분리관, 검출기 등은 필요한 온도 ... 【각종 분석기기의 원리 및 측정 가능한 성분에 대하여】1. 분광학적 방법(Spectroscopic methods)1) 흡광광도법1. 원리 및 적용범위이 시험방법은 빛이 시료용액

리포트 | 40페이지 | 1,000원 | 등록일 2006.09.10 | 수정일 2014.07.04

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[환경] 염소이온농도예비보고서

으로하여 소요된 AgNO3 측정후 염소이온 농도 산출. 정량범위는 0.7㎎/ℓ 이상이다.(3) 이온크로마토그래피법의 측정원리이온크로마토그래프를 이용하여 염소이온의 정량하는 방법이 ... 로 한다- 써프레서용 재생액 (0.025N H2SO4): 황산 2.8ml를 물에 넣어 4L로 한다[이온크로마토그래피법 시료의 전처리]- 시료중에 입자상 물질등이 존재할 떠: 분리 ... 성분의 크로마토그램을 작성하여분석하는 고성능 액체 크로마토그래피의 일종으로서 물 시료종의 음이온(F-, Cl-, NO2-, NP3-,PO43-, Br- 및 DO42-)의 정성분석

리포트 | 6페이지 | 1,000원 | 등록일 2001.11.17

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[공업화학] 환원반응

알콜을 제조하고 목적물을 분리 정제한다.5. 실험 기구 및 장치● 각종 초자: 플라스크, 비이커, 피펫, 분액 깔대기, 크로마토그래피용 컬 럼 등...● 분석 기기: TLC, UV ... 된다. 흡착제는 가끔 가열해서 활성화시키지 않고 사용되기도 한다. 그때는 흡착되어 있는 물이 정지상으로 작용한다.얇은 막상태의 액체 정지상을 액-액 분배 크로마토그래피용으로 만들 수 ... 있다. 이 막은 보통 물이며, 칼럼 크로마토그래피와 같이 실리카겔이나 규조토와 같은 물질에 유지되어 있다. 실리카겔이나 규조토의 표면을 실라놀화 하여 무극성인 메틸기로 변화

리포트 | 14페이지 | 1,000원 | 등록일 2002.05.26

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PAH(다환성방향족탄화수소)와 POPS조약

해 온 용매들은 부적합하다. 추출된 시료는 보통 컬럼크로마토그래피, 특히 알루미나, 실리카겔 혹은 Sephadex LH-20 혹은 박층크로마토그래피로 정제한다. 동정 및 정량은 일반 ... 알카리 분해 한 후 액체-액체 분배로 추출한다. 다양한 환경 고형물에서는 초임계 유체 추출법이 사용되고 있으며, 추출의 효율은 사용 용매에 크게 의존하며 과거에 일반적으로 사용

리포트 | 19페이지 | 1,000원 | 등록일 2004.06.06

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재결정과 거르기

가 상당히 다르면 적당히 따뜻한 용매에 혼합물을 녹인 다음에 순수한 물질을 재결정할 수 있다. 이밖에도 추출, 크로마토그래피, 그리고 액체 혼합물의 경우에 사용하 는 증류도 많이 사용 ... 인 재결정법중 한가지인 재결정법을 이용한다.2.실험기구기구-전조기,가연교반기,전자저울,녹는점 측정장치, 뷰흐너 깔때기,감압플라스크,감압기비커,눈금실린더,유리젓게,온도계 거름종이 ... 결정구조를 완전 히 분열시킨 후에 다시 결정을 형성하게 함으로써 불순물이 용융액이나 용액 속에 남아 있게하여 순도(purity)를 높이는 방법이다.용융법(fusion method

리포트 | 4페이지 | 1,000원 | 등록일 2005.05.05

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[실험분석학] 이온 크로마토그래프법에 대하여

), 대기먼지, 하천수중의 이온성분을 정성, 정량 분석하는데 이용한다.2. 개요고성능 이온크로마토그래피에서는 저용량의 이온교환체가 충진되어 있는 분리관 중에서 강 전해질의 용리액을 이용 ... 적으로 사용하는 이온크로마토그래피는 (그림)과 같이 용리액조, 송액펌프, 시료주입장치, 분리관, 써프렛서, 검출기 및 기록계로 구성되며 분리관에서 검출기까지는 측정목적에 따라 다소 ... 이온 크로마토그래프법(Ion Chromatography)1. 원리 및 적용범위이 방법은 이동상으로는 액체를, 그리고 고정상으로는 이온교환수지를 사용하여 이동상에 녹는 혼합물을 고

리포트 | 9페이지 | 1,000원 | 등록일 2003.08.31

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[실험] 화공 기초 실험 - 추출

에서 서로 다른 분포 또는 분배평형을 이룬다. 모든 크로마토그래피법의 분리는 용질이 이동상과 고정상 사이에서 분배되는 정도의 차이에 따른다. 이론적으로는 System 내에서 각 성분 ... 은 평형상수 값을 가지며, 두 성분 A와 B가 분리되려면 K값의 차이가 커야 한다.크로마토그래피에서는 평형상수라 부르지 않고 분포계수, 또는 분배계수라 한다. 분포상수는 Kb, 분배상수

리포트 | 10페이지 | 2,000원 | 등록일 2004.06.05

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7~10학년 과학과(물질) 단원별 학습목표

를 이 물질을 분리해야 하는 경우 직접 실험을 설계할 수 있다.2. 크로마토그래피가 실제로 이용되는 예를 나열할 수 있다.10/12혼합물의 분리 방법 중 증류법이 원유의 분리나 행수

리포트 | 8페이지 | 1,000원 | 등록일 2007.02.14

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[아미노산과펩타이드]아미노산과 단백질 화학

한다. 아미노산 조성은 단백질을 산 또는 알칼리로 가수분해하여 이온교환 칼럼크로마토그래피 (column chromatography)를 이용한 아미노산 자동분석장치를 사용하여 조사 ... 법한 아미노산의 카르복시기와 인접한 아미노산의 α-아미노기는 다음과 같이 탈수 축합반응하여 peptide 결합(peptide bond)을 형성할 수 있다.Peptide에도 역시

리포트 | 24페이지 | 6,300원 | 등록일 2006.09.17 | 수정일 2020.07.26

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단백질 정량에 관한 실험보고서

《생화학 실험보고서》목차실험 일자.................................................................................................... 1실험 제목.................................................................................................... 1실험 목적.................................................................................................... 1실험 이론.................................................................................................. 11)단백질이란?2)우유단백질이란?3)Whey란?4) albumin5) tris6) 흡광도7)단백질 정량에 관하여..실험 방법.................................................................................................... 301)Whey 만들기2)colom걸기3)흡광도 측정하기실험 결과.................................................................................................. 31실험 토의.................................................................................................... 32참고 자료.................................................................................................... 32실험 일자 : 1차시도 4월 29일 2차시도 5월2일 3차시도 5월1 시킨 단백질에서 불순물을 제거 시킨다.4) 칼럼 크로마토그래피A. 원통상의 유리관에 충진제를 채워 혼합물 중 충진제와 상호작용 하는 것을 이용한다.B. 혼합물을 분리해 내는 방법이다.5) 이온 교환 크로마토그래피A. 단백질이 ph에 따라 하전 을 달리하는 성질을 이용하여 단백질을 분리해 내는 방법이다.6) 흡착 칼럼 크로마토그래피A. 어떤 물질에 대한 흡착력의 차이를 이용한 방법이다.7) 겔 여과 크로마토그래피A. 분자의 크기에 따라 분리해 낼 수 있는 방법이다.B. 유리관에 고분자 gel을 충진 시켜 gel의 구멍을 통과시킨다.C. 통과하는 단백질들의 진행속도 차에 의해 단백질을 분리하는 방법이다.8) 친화성 크로마토그래피A. 단백질의 어떤 물질과의 친화력을 이용한다.B. 선택적으로 단백질을 분리해 내는 방법이다.9) 전기영동A. 단백질분자의 전하를 이용한 분리, 분석법이다수많은 아미노산(amino acid)의 연결체이다. 천연아미노산에는 20종류가 있는데, 이 아미노산들이 펩티드 결합이라고 하는 화학결합으로 서로 연결되어 길게 측쇄형으로 된 것을 폴리펩티드(polypeptide)라고 한다. 단백질과 폴리펩티드는 같은 말이지만, 보통 분자량이 비교적 작으면 폴리펩티드라 하고, 분자량이 매우 크면 단백질이라고 한다. 그러나 이러한 구별은 엄격한 것이 아니어서 두 가지를 혼용하여 쓴다.다만, 폴리펩티드가 둘 또는 그 이상 모여서 하나의 집합체를 형성하고 있을 때는 반드시 단백질(protein)이라고 부른다. protein은 그리스어의 proteios(중요한 것)에서 유래된 것이다. 단백질은 생물체의 몸의 구성성분으로서, 또 세포 내의 각종 화학반응의 촉매 역할을 담당하는 물질로서, 그리고 항체(抗體)를 형성하여 면역(免疫)을 담당하는 물질로서 대단히 중요한 유기물이다.1. 구조단백질에 대한 화학적 ·생물학적 연구는 오래 전부터 이루어져 왔으나, 그 구조와 기능의 복잡성으로 인하여 비교적 최근에 와서 상세한 구조와 기능이 밝혀지기 시작하였다. 단백질을 구성하는 이 한 개의 안정된 3차원 구조를 가질 수 있다. (n개의 아미노산을 가지는 생성 가능한 폴리펩티드 사슬의 경우는 수는 20n) 이는 자연도테를 통해 현 단백질의 아미노산 서열은 매우 안정한 특정 형태와 기능수행에 적합한 화학적 성질을 가지도록 진화되었다.(3) 단백질의 종류1) 섬유상 단백질A. 구조 유지의 역할을 수행한다.B. 단순히 반복되는 구조를 가지고 있다.C. 주요한 두 가지 2차 구조가 존재한다.D. 알파헬릭스와 베타 판상 구조E. 펩티드 골격 중 아미드 기의 질소 원자와 카르보닐 기의 산소 원자 사이의 수소결합에의해 이루어 진다.F. 케라틴과 콜라겐 등이 여기에 속한다.G. 엘라스틴의 구조는 신축성을 가진다.2) 구상 단백질A. 3차 구조가 매우 복잡하게 나타나는 구조이다.B. 여러 가지 타입의 2차 구조를 하나의 폴리펩타이드 사슬 내에 가지고 있다.C. X선 해석을 통해 최초로 결정된 구상 단백질은 미오글로빈이다.a. X선 해석- 알파 헬릭스의 존재를 증명해 냈다.- 소수성 아미노산이 단백질 내부에 존재한다는 것을 증명해 냈다.- 구상 단백질은 조밀한 구조임을 증명해 냈다.- 다른 단백질들은 각기 다른 3차 구조를 가지고 있다는 것을 증명해 냈다.(4) 단백질의 변성1) 단백질 3차 구조는 약한 상호작용을 깨는 처리를 하여 구조가 파괴된 것을 의미한다.2) 단백질의 활성이 제거된다.3) 단백질의 기능은 구조와 연관성이 있다는 것을 나타내 준다.4) 구상 단백질의 접힘에 관여하는 성질들5) 2차 구조가 형성된 후 그들 사이의 회합작용6) 소수성의 아미노산 곁 사슬을 단백질의 내부로 밀어넣어 물로부터 격리시키려는 작용7) 될수있는데로 많은 수소결합과 이온결합을 형성하려는 작용2. 기능생물체의 구성성분으로서 매우 중요하다. 모든 세포의 세포막은 예외없이 단백질과 지질(脂質)로 구성되어 있으며, 핵이나 미토콘드리아 등 세포 내의 각종 구조물도 단백질과 지질로 구성되어 있다. 또, 세포의 원형질도 다량의 각종 단백질을 함유하고 있다.단백질은 세포 내에서열에 의해 응고되는 단백질로,우유를 가열하면 우유 표면에 얇은 막을 형성WPC(whey protein concentration)은 여러가지 식품가공시에 교질 형성 첨가물로 사용하며,총 유청 단백질 중 β- lactoglobulin함량이 유청단백질의 교질 형성 특성을 부여하며, WPC의72~76%가 단백질로 식품첨가물로써 안전하다는 이점이 있음.casein은 polypeptide상에서 친수성 부위와 소수성 부위가 뚜렷하게 구분되어 있어표면활성이 좋아 기포제, 유화제로서의 기능을 하며, 유청단백질은 소수성 부위와 친수성부위가 산재해 있으므로 유화제 기능보다는 기포제 기능이 casein보다 우수함.우유의 정상적인 산도하에서 casein 분자는 칼슘과 결합된 calcium caseinate로 되고,유즙내에 Ca-phosphate와의 복합체를 형성하여 colloid 상태로 분산되며, 장에서 소화되면서 칼슘의 흡수이용을 도와주는 기능을 가진 단백질로 알려지고 있음.우유의 산도를 pH 4.6 이하로 내리면 우유의casein 단백질이 응고되어 치즈를 만들 때에두부와 같이 엉기게 되며, 따라서 치즈는 농축된 단백질 급원이 되어 영양적 가치가 높음우유에는 주요 단백질 이외에 여러 가지 효소, 항체 등의 단백질과 비단백태 질소화합물등의 여러 종류가 있고 이들도 여러 가지 영양적 및 생물학적 기능을 가지고 있음락토페린(lactoferrin)이라는 철을 가진 단백질은 미생물을 억제하는 기능이 있다고알려져 있음.◎ 우유와 아미노산영양적인 기능이 매우 높은 필수아미노산을 많이 공급하며 특히 casein과 유청단백질을혼합하면 서로의 필수아미노산들이 보완되기 때문에 단백질의 가지는 상승됨우유단백질을 구성하는 아미노산의 종류는 19종인 것으로 알려져 있으며 류신(leucine),이소류신(isoleucine), 발린(valine) 등의 아미노산이 다른 단백질에 비하여 많음.식물성 단백질을 많이 섭취하는 사람에서 부족하기 쉬운 리신(lysine), 메티오닌(methionine) 등의 아미노산을 소비량은 구미 각국에 비하면 아직도 적은 편이다.우유는 그대로 마시는 것 외에 포타주(potage:되직한 수프) ·화이트 소스, 생선이나 내장 요리, 오믈렛 등의 조미에 이용된다. 가열하는 경우에 처음부터 넣거나 75 ℃ 이상으로 가열하면 우유의 약산성 때문에 단백질이 응고되어 마무리가 잘 안 되므로 조리의 마지막에 넣고 약한 불에서 잘 저으면서 가열하는 것이 요령이다.1) Whey란?유청(乳淸)이라고도 한다. 미황색의 액체로 수분이 대부분을 차지하며, 4∼5% 의 락토오스, 1% 이하의 단백질, 소량의 지방과 회분으로 되었다. 성분조성과 생산량은 치즈의 종류에 따라 다르다. 훼이에는 알부민 등 수용성 단백질이 비교적 많으므로 어린이용 분유의 원료로 많이 사용된다. 또한 훼이치즈 ·훼이버터 ·훼이분말 ·농축훼이 등으로 제조하여 제과원료나 발효원료로 이용된다.2) albumin글로불린과 함께 세포의 기초물질을 구성하며, 동식물의 조직 속에 널리 존재한다. 1907년 국제회의에서 제안된 분류법에 의하면 물에 잘 녹는 단순단백질(아미노산만으로 구성된 단백질)을 알부민이라고 총칭하도록 되어 있다. 그러나 현재는 단백질에 관한 연구도 진보되어 알부민 속에는 분자량 및 아미노산의 조성 등이 다른 여러 가지 단백질이 들어 있다는 것이 알려져 있다. 대표적인 알부민의 하나인 난백(卵白)알부민은 전에는 단순단백질이라고 생각되었으나, 아미노산 외에 당 ·인산을 포함한 복합단백질이라는 사실이 밝혀졌다.알부민은 물, 묽은 산 또는 알칼리, 묽은 염용액에 잘 녹으나, 알코올에는 녹지 않는다. 식물성 알부민은 황산암모늄의 반포화상태 이상에서 비로소 침전한다. 수용액은 70℃에서, 동물성 알부민은 50∼60℃에서 변성하여 비가역적으로 응고된다. 알부민은 다른 단백질보다 잘 염석(鹽析)되지 않는 성질이 있으며, 염석시키는 데는 농도가 큰 염용액을 써야 한다. 동물성 알부민에는 달걀의 오브알부민, 혈청알부민, 젖의 락토알부민, 간 및 근육 속의 알부민(미오겐) 등이 있으며, 식물성 알부민에한다.

리포트 | 33페이지 | 1,500원 | 등록일 2001.09.05

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[생명공학실험] 키틴조직에서 키틴분해효소의 분리

Ⅰ. 서 론1) 키틴.키토산이란?키틴은 새우.게등 갑각류, 투구풍뎅이.귀뚜라미.여치 등 곤충류, 기타 균류의 세포벽 등에 단백질과의 복합체로서 함유되어 있는 다당류로, N-Acetylglucosamine이 β-(1→4) Gluco side 결합으로 연결된 구조를 가지고 있다.한편, 키토산은, 키틴을 염알칼리로 처리함에 따라서 얻을 수 있는 키틴의 탈Acetyl체로, D-Glucosamine이 β-(1→4) 결합한 구조를 갖는다 (그림 1)그림 1. Chemical structures of cellulose, chitin, chitosanCH2OH CH2OH CH2OHH O H O H OOH H O OH H O OH H On n nH OH H NHCOCH3 H NH2Cellulose Chitin Chitosan게, 새우와 같은 갑각류의 껍질은 크게 나누면 단백질, 칼슘, 키틴질의 3가지 성분으로 구성되어있는데, 이 껍질로부터 일련의 처리공정을 거쳐 키틴을 추출한다. 게껍질등을 염산 및 가성소다로 처리하여, 탄산칼슘, 단백질, 기타 미량성분을 제거한 것을 키틴이라 하고, 이 키틴을 더욱더 탈아세틸화 처리하여 추출한 것이 키토산이다. 그러나 일반적으로 제조되는 키토산에는 잔류된 키틴이 5∼25% 정도 함유되어있는 이유로 키토산을 키틴 키토산이라 부르기도 한다. 키틴 키토산은 백색∼담황색∼담적색의 물질로 Cellulose와 매우 유사한 구조로서, 분자내에 존재하는 아미노기에 의한 강력한 분자간 결합력을 가진 안정한 천연고분자이다. 화학적 구조로 보면 키틴이나 키토산은 셀룰로오스와 비교할 때 많은 차이점을 볼 수 있다. 즉 키틴이나 키토산은 셀룰로오스의 -OH기 1개가 -NHCOCH3기나 -NH2기로 변화된 것에 불과하나 셀룰로오스와 비교할 때 많은 차이점을 보여준다.* 키틴 키토산의 화학명과 성상키틴(Chitin) → β-(1,4)-Poly-N-Acetyl-D-Glucosamine (C8H13NO5)n키토산(Chitosan) → β-(1,4)-Poly-D-Glucos양상을 보여주고 있으며, 인체적 합성측면에서 가장 높은 효율을 보여주고 있다. 옛날부터 가정 상비약으로 오징어 뼈를 건조하여 가루로 분쇄하여 보관하였다가 상처부위에 바르던 습관은 바로 Chitosan의 약리작용을 경험적으로 터득하고 있었던 것으로 판단된다. Chitosan의 사용에서 Chitosan의 탈아세틸화도(Degree of Deacetylation)에 따라서 Chitosan의 고유한 성질이 발현되나 이 탈아세틸화도의 중요성이 제대로 인식되지 못하고있다.* 탈아세틸화도(Degree of Deacetylation) → Chitin에서 Chitosan으로의 변환 정도갑각으로부터 얻어진 Chitin은 40%이상의 강한 알칼리용액 속에서 처리함으로써 Chitin의 NHCOCH₃기를 NH₂기로 변환시켜서 Chitosan을 제조할 수 있다. 알칼리처리에 의해서 NHCOCH₃기의 NH₂기로의 변환율을 탈아세틸화도 라고 정의하는데, 아직까지 탈아세틸화도가 100%에 달하는 Chitosan의 제조에 성공한 예는 아직 없다 한다.탈아세틸화 반응에서 가장 중요한 사실은 지극히 강한 알칼리용액속에서 Chitin이 처리되기 때문에 Chitin의 심각한 상해가 수반되어 세심한 기술적인 Know-How가 적용되지 않으면 Chitin의 분자쇄가 급속히 절단되어 변색이 수반된 분자량이 낮은 Chitosan밖에 얻을 수 없다. 분자량이높고 고백색도의 고순도 Chitosan을 얻기위해서는 Chitosan제조시 알칼리의 과격한 작용을 저지시켜줄 수 있는 방법이 요구된다. 아무리 강한 알칼리 조건이 부여된다할지라도 100%의 탈아세틸도를 갖는 Chitosan은 아직까지 얻어질 수 없으며 목적에 따라서 98∼99%까지도 제조를 하고있으나 일반적인 경우 탈아세틸화도가 80∼90%정도이다.4) 키토산의 물질 특성 키틴및키토산은 무미무취의 천연 고분자 다당체이며, 섭취후 약간 떫은맛의 여운이 느껴진지며 키틴과 키토산 모두 천연 식품첨가물로 사용되고 있으나, 건강식품용도로 주로 사용되는것은 키토산이나될 수 있는 기의 pKa로 pH의 효과를 알아볼 수 있다. 예를 들어 어떤 화합물, 즉 강산염에 서 pH는 상대적으로 덜 중요한 반면 아미노산 또는 단백질같이 잠재적으로 음이온과 양이온기를 가지는 분자에서는 pH의 변화가 극성 변화의 정도에 따라 순전하를 어느 정도 변화시킬 수 있다. 이러한 특성은 단백질과 유사한 혼합물들이 단지 pH 이동으로 순전하가 변함으로써 음 이온이나 양이온 교환체로 분류되므로 중요하다. 단백질의 순전하가 0이 되는 pH, 즉 isoelectric point (pI)를 안다면 이는 흡착이 일어나는 pH 조건을 선택하는데 있어서 시작점으로 사용할 수 있다.교환체와 용질분자(이온)사이에 필요한 전하량 조건이 이루어지면 흡착이 일어나며 그 이후에 탈착에 대하여 논할 수 있다. 탈착은 교환체로부터 하전된 용질 분자를 대치하기 위해 이동상에 경쟁적 이온을 추가함으로써 이루어진다. 어떤 경우에는 이온 교환이 하전된 분자를 용액으로부터 분리하는 기법으로 사용될 수 있으며 이런 경우 탈착 과정은 선택적일 필요가 없고 고농도의 염 이온을 사용할 수도 있다. 그러나 몇몇 하전된 화합물, 예를 들면 아미노산 분석 같은 경우는 이온 교환을 사용하는 것이 보다 일반적이다. 이런 경우, 각 이온들이 다른 속도로 탈착 분리되므로 선택적 탈착이 요구된다. 이 효과를 그림B에서 이온 교환체에 흡착된 세 가지 화합물에 대하여 나타내었다. 이 세 가지 화합물은 교환체에 대한 다른 친화력을 가지 고 있어서 염 농도의 적절한 선택으로 분리될 수 있다. 염 농도가 A인 경우 세 가지 모두 어느 정도 탈착되지 않으므로 칼럼에 남아있다. 반면 염 농도 C에서는 사실상 모두 흡착 제거되어 재빨리 용리 되지만 분리는 일어나지 않는다. 중간 농도 B에서는 흡착 속도가 달라 효과적인 분리가 된다.하전된 분자들은 이동상의 pH를 바꾸어 교환체로부터 용리될 수 있으며 전하의 이동과 관계 있는 용질 분자의 ratio 또는 이온 교환체 내의 이온 교환 자리가 감소한다 이러한 변화는 차례로 머이 때 buffer의 pH가 중요한데 이는 protein의 charge의 상태가 pH에 따라 변할 수 있기 때문이다. 우린 실험에서 pro tein이 가장 잘 용출된다고 조사된 pH 7.5의 buffer를 만들어 실험시 사용했다.우리 조의 결과를 보면 Anion상에서는 중성이나 (+)charge를 띄는 protein이 많았고, 작은 (-)charge를 띄는 protein들도 어느 정도 용출된 것을 알 수 있다. Cation상에서는 (-)charge를 띄는 protein들이 거의 대부분이었으며 용출시키려던 (+)charge를 띄는 protein은 거의 찾아볼 수 없었다. 분명 같은 sample을 가지고 실험했음에도 불구하고 Anion에서 용출되지 못한 protein들이 Cation에서 잡혀서 보일거란 예상은 빗나갔다. 사실 나도 이점이 젤 궁금하게 생각되었는데 어떤 실험과정이나 시료 또는 buffer의 문제점보다는 기계상의 washing의 상태나 binding시켜주는 시간 등에서 문제가 있었을 거라고 생각했다.* 서론에서도 기술했지만 키틴과 키토산의 경우는 음전하(－)를띠는 기존의 대부분의 식물섬유(또는식이섬유)와 달리, 용해상태에서 양전하(+)를 띄는 지구상 유일의 천연동물성 식물 섬유라는 특이한 구조를 가지고있다고 한다. (조교님 정확한 이유를 알고 싶습니다~)☞ 4주차 실험 → HIC (hydrophobic interaction chromatography)1) 소수성 상호반응 크로마토그래피 (hydrophobic interaction chromatography)물속에 소수성 물질이 들어오면 서로 뭉치려는 현상을 볼 수 있다. 예를 들면 헥세인(hexane) 2 분자가 물에 들어오면 자발적으로 서로 모이는 것을 볼 수 있다. 이러한 현상은 열역학적으로 자발적으로 일어나는 소수성 상호반응이다. 소수성 상호반응 크로마토그래피는 소수성 기능기를 갖는 지지체(matrix)와 어떤 분자간의 소수성 상호작용을 이용하여 분리하는 방법이다. 지지체는 친수성(hydrophi수성기를 가지고 있다고 설명할 수 있다. (데이타 값의 신뢰성 여부에 따라 결과는 다를 수 있다고 생각한다)☞ 5주차 실험 - protein 정량 (by Lorry and Folin method at mg level)1) Lowry-Folin method의 원리FolinCiocalteu시험법：텅스텐산나트륨, 몰리브덴산나트륨, 인산 등으로 되어 있는 단백질 정량시약（페놀시약이라 함）이 단백질중의 tyrosine, tryptophan, cysteine의 각 잔기와 반응해서 청남색을 나타낸다. 다시 감도를 높이기 위해서 이것과 Biuret반응을 조합한 Lowry법이 실제로 널리 쓰이고 있다. 또한 Biuret반응 자체도 정량의 목적으로 자주 쓰이는 방법이다. [4]*왜 570m에서 측정할까?--청남색의 흡수파장이 570mm에서 가장 잘 측정된다.*BSA(bovine servime albumin)--일반적으로 단백질 정량에 쓰이는 표준물질--standard curve를 잡을 수 있다.2) 실험방법먼저 BSA(1mg/1ml)용액과 물을 섞어 0 20% 40% 60% 80% 100%의 standard sample을 만든 후 O.D를 측정하여 standard curve를 얻는다. 다음 chromatography를 통해서 bind, nbind로 분리된 각각 2개의 sample을 원액과 10배 희석한 2가지 경우로 만들었다. 모든 시약을 정확히 가해주고 voltexing한 뒤에 O.D를 측정하여 standard curv e에 대입하여 정량값을 얻어내었다< Lowry - Folin 법에 의한 Preotein의 정량 >시료분리된 단백질sample원액10배 희석O.D 값정량값(㎎/㎖)O.D 값정량값(㎎/㎖)Anionbind0.0880.17030.0210.0406unbind0.1210.23420.0390.0755Cationbind0.0660.12770.0350.0677unbind0.0830.16060.0400.0774HICbind0.0600.11610.0340.0658unbind0[5]

리포트 | 21페이지 | 1,000원 | 등록일 2003.09.01

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[단백질] 단백질

특성 등의 성질을 이용.② 조직 또는 미생물 세포를 분쇄하여 조추출액(crude extract)에 유리시켜야 한다.③ 단백질의 분리법 종류a. 이온교환 크로마토그래피: 서로 다른 ... 하전을 가지고 있는 단백질을 분리.b. 사이즈 배제 크로마토그래피(겔여과): 단백질을 크기에 따라 분리큰 분자일수록 자유로이 통과해서 처음의 분획에 나타난다.c. 아피니티 크로마토 ... 은 대단히 큰 분자이다.3) 단백질의 특이적인 아미노산 조성.4) 아미노산 이외의 화학기를 가진 단백질.2. 단백질의 연구법1) 단백질의 분리·정제2) 단백질의 정량.3) 전기

리포트 | 9페이지 | 1,500원 | 등록일 2002.11.27

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