[생명공학]미생물 접종 및 배양 - simple staining and microscopy

소개

미생물 접종 및 배양 & 단순염색과 현미경에 관한 생명공학실험 레포트(예비레포트)입니다.
직접 작성했습니다.
사진과 참고문헌 포함.
글자크기 10포인트로 10쪽 꽉 찬 분량

목차

1.실험목적
2.실험원리(배양,순수배양,염색,단순염색,그람염색,현미경의구조,사용법,광량과 상의형성, 해상력을 결정짓는 요인 등)
3.시약 및 기자재
4.실험방법
5.주의사항
6.참고문헌
7.고찰

본문내용

1. 실험 목적
-원균을 다량으로 증식하는 목적은 미생물학적으로 안정된 조건에서 순수배양한 균을 이용하여 많은 양의 종균을 만들기 위함이다. 미생물의 여러 가지 특성을 조사하기 위해서는 반드시 단일종의 미생물을 분리해 내야하며 단일 종의 미생물을 분리하는 방법에는 도말평판법(streak plate method)과 주입평판법(pure plate method)이 있다.
-단순염색 방법을 배우고, 광학현미경을 이용할 때 염색의 이점을 평가한다. 그리고 다양한 형태학적 모양과 세균세포들의 배열을 관찰한다.

2. 실험원리
♣배양(Culture)
미생물은 최적의 영양물질을 포함하고(배지) 최적의 외부조건(온도, pH, 호기섬, 또는 혐기성 등)하에서 생장 증식한다. 그래서 조건에 따라 그 배양방법이 다르다.
=> 집적 배양(Enrichment culture)
어떤 시료에서 목적으로 하는 미생물을 혼재하고 있는 다른 미생물보다 빨리 다량으로 얻 은 후에 순수분리를 한다. 목적하는 미생물에 적합한 배지에 시료의 소량(멸균수로 희석 한 것)을 넣고, 적온을 유지하여 목적하는 미생물의 생장번식을 왕성하게 하고 잡균의 생 장번식을 억제한다.
=> 호기성 배양법(호기성균, 통성혐기성균의 배양방법)
이것은 배지를 배양기 속에 넣어 두는 것만으로도 충분하다. 액체배양인 경우에는 산소를 충분히 공급하는 반응으로 진탕 또는 통기배양을 하는 경우가 있다.
=> 탄산가스배양법
임균, 수막염균 등 고농도의 이산화탄소를 필요로 하는 균의 배양에는 촛불배양법 (candle jar method)을 사용한다. 이것은 유리로 된 jar 속에 고형배지와 함께 초를 넣은 후 초에 불을 붙인 다음 파라핀으로 뚜껑을 덥고 밀폐하여 불이 꺼진 상태에서 배양하는 방법이다.
=> 혐기성배양법(혐기성균의 배양방법)
배지의 산화환원전위를 낮추기 위해 cysteine, thioglycollate, liver broth 등의 환원제 를 배지에 첨가한다. 또한 무산소의 환경을 만들기 위해서는 혐기성 jar를 흔히 사용한 다. jar 속의 산소제거는 jar 속의 산소를 진공 pump로 흡입하여 제거한 다음 탄산가스, 수소가스, 질소가스로 치환하는 방법(가스 치환법), 화학반응으로 산소를 제거하는 방법 (gas pak법)등이 있다. 특히 엄밀한 혐기배양법으로서는 roll tube법, 혐기성 globe box 법이 있다.

참고자료

· * 종합미생물학, 신일상사, 미생물면역분과위원회저, 2005년, 95~97쪽
· * 최신미생물학실험, 신광문화사, 박석기 외 5인 공저, 1995년, 25~27 37~41쪽
· * 최신일반미생물학실험, 일신사, 최영길 홍순우 공저, 1992년, 45 49쪽
· * 식품미생물학실험, 광문각, 민경찬 외 7인 공저, 2000년, 31~39 42 49~53쪽
· * 미생물실험법, 보문각, 서승교 이웅수 공저, 2005년, 60~61쪽