[미생물학실험]계단희석을 통한 세균수 측정

소개

세균수를 측정해보고 나서 작성한 실험보고서입니다
여러 세균수 측정법 중 계단희석법을 이용한 실험이었습니다
이론 부분에는 계단희석법 뿐만 아니라 여러가지 세균수 측정법 및 성장곡선, 미생물 성장관련 내용을 다루었습니다
많은 도움 되세요^^
내용요약 부분에 숫자뒤에는 단위가 있는데 기호라 내용요약에서는 안보이는 것입니다
아울러 좋은 평가도 부탁드립니다

목차

1. 실험제목 계단 희석법을 이용한 세균 수의 측정
2. 실험목적

3. 서론
1 미생물의 증식 및 성장
(1) 미생물의 증식방법
(2) 성장동력학(Growth Kinetics)
(3) 미생물의 생육곡선 (Growth curve)
(4) 동력학(Kinetics)
(5) 희석(Dilution)
2 세균의 균수측정법
=직접법=
(1) 전균수측정
(2) 배양에 의한 생균수 측정법
(3) 혼탁도에 의한 균량측정법
♣ Serial dilution agar plate Analysis 혼합 희석 평판 배양법
=간접법=
(4) 화학적 방법

4. 실험재료 및 방법
실험재료
실험방법
5. 실험결과
6. 실험결과
7. 참고문헌

본문내용

Ⅱ. 세균의 균수측정법
세균의 균수측정법은 vaccine제조, 균증식의 상태파악, 일정조건을 유지하기 위하여 측정되며 직접 균수를 측정하는 법과 간접으로 측정할 수 있는 방법이 있다. 또한 생균수만 측정하는 법, 생균,사균 모두를 측정하는 법 등이 있으며 실제 이 같은 균의 측정방법에 균수계산법, 배양법, 비탁법 등이 이용된다.

=직접법=
(1) 전균수측정
1) 균수계산판에 의한 계측법
혈구계산기(hemocytometer)와 똑같은 모양으로 미세한 구획으로 된 세균전용의 계산판이다. 깊이 0.02, 면적 1/400의 계산실(1/20,000)로 된 Petroff-Hauser세균계산판이 사용된다. 측정하고자 하는 균약을 한 방울 떨어뜨려 직접 400배로 검경한다. 계측되는 균의 농도범위는 1㎖당 ～108 사이이고 107 이하에서는 불확실하다.

2) Coulter counter에 의한 계측법 (전균수측정)
식염 등 전해질액에 생균을 부유시키고 전기가 흐르고 있는 가는 구멍의 관을 통과하면 가는 구멍이 있는 관은 그것 자체에 큰 저항을 가지나, 세균통과를 하는 것에 의해 세균의 체적분만 전해액이 치환되고 보다 저항이 증가하고, 세균의 체적에 비례한 전압 pluse(맥박)가 생긴다. 이 전압 pluse(맥박)의 크기와 수를 전기적으로 측정이 될 수 있는 coulter counter의 사용에 의해 세균수를 측정한다.

3) Flow cytometry
세포표면을 다양한 항체로 labeling하여 coulter counter를 이용하여 세균 수를 측정한다.

(2) 배양에 의한 생균수 측정법
1) 주가 평판법 (pour plate method)
피검균액을 10배 계단희석으로 적당히 희석한 것 1㎖를 멸균된 petri dish에 넣고 사전에 배지를 멸균 후 45～20 로 유지시킨 한천배지 20～25㎖를 가하여 잘 혼합하여 평판으로 굳힌다. 적정시간 배양한 후 한천층 내에 생긴 전집락수를 계산하며 1평판배지에 약 100～300개 정도의 집락이 생기도록 적당히 희석하여야 한다. 일정면적 내에 집락의 수에서 전체 집락수를 비례에 의하여 산출한다. Wolffugel 또는 그것에 준한 집락계산기(colony counter)를 쓰면 편리하다. 전기적으로 수를 기록하는 것과 같은 장치가 고안되어 있다.
검체 1㎖ 내 집락의 수에 희석배수를 곱하면 원래 균액의 균수를 알 수 있다.

참고자료

· 신현성,이규식 공저, 2000, 일반 미생물학, 개정판, 형설출판사, 서울
· Cappuccino, 2005, Microbiology, 7th, PEARSON, San Francisco