면역학 실험 보고서 - 레포트

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<면역학 실험 보고서>
1.Date: 2011.3.22 2.Team: 6조(양정언,최용암,김지선,염준태) 3.Name: 양정언
4.Topic: 생쥐의 면역기관 관찰
5.purpose: 생쥐 해부를 통해서 생체 내 각 조직과 기관들의 형태 및 위치를 관찰할 수 있다. 생쥐를 해부하여 림프절과 비장을 관찰 및 추출하고 림프구를 직접 분리해 본다.
6.Materials: 생쥐, 해부대, 해부침(12개), 핀셋, 가위, 70%에탄올, 티슈, 100mm petri-dish(2개), 60mm petri-dish(2개), slide glass, cover glass, 적혈구 용혈 용액, 15ml튜브(2개), 배양배지, 세포 여과기, Micropipette, 원심분리기, 현미경
7.Method:
① 생쥐를 경추 탈구로 죽인다.
② 쥐를 해부대 위에 배가 위쪽으로 향하게 놓고 다리를 벌려 핀으로 고정한다.
③ 쥐의 가죽부분만 먼저 자르고 편다.
④ 해부도에 소개된 림프절의 위치를 확인한다.
⑤ 복막을 자르고 내부의 Mesenteric림프절과 비장을 확인하고 추출한다.
⑥ 미리 배양배지 8ml을 넣어둔 2개의 100mm peri-dish에 추출한 조직을 넣는다.
⑦ 비장과 림프절에서 면역세포를 추출한다.
-각 조직을 slide glass를 이용해 smearing기법으로 림프구를 추출
-세포 현탁액을 여과기를 통과 시켜 큰 잔여물을 거르면서 15ml 튜브에 모음
⑧ 1200 rpm, 5분간 원심분리 후 상층액은 제거한다.
⑨ 림프절 추출군은 새로운 배양배지 5ml로 부유시킨 후 60mm petri-dish에
옮긴다.
⑩ 비장추출군은 적혈구 용혈용액 5ml로 부유시키고 상온에서 10분간 배양한다.
1200 rpm,5분간 원심분리 후 상층액을 제거 하고 새로운 배양배지 5ml로 부유시킨 후 60mm petri-dish에 옮긴다.
⑪ 각각의 조직으로부터 분리한 세포를 현미경으로 관찰 한다.
9. Discussion
*림프절의 구조와

참고자료

· -림프절, 비장의 기능
· http://health.search.naver.com/search.naver?where=health_detail&sm=tab_txc&ie=utf8&query=%EB%B9%84%EC%9E%A5
· http://health.search.naver.com/search.naver?where=health_detail&sm=tab_txc&ie=utf8&query=%EB%A6%BC%ED%94%84%EC%A0%88
· -비장의 세포조성
· http://bric.postech.ac.kr/myboard/read.php?Board=exp_qna&id=183050
· -쥐 해부및 림프절 적출 실험리뷰
· http://50jinjin.blog.me/150102928395