생물 자원에서 기능성 물질 분리 사례

소개

생물자원에서 항산화, 항암, 항균 작용을 가진 물질을 GC나 HPLC 등의 기기분석을 통하여 분석하는 방법을 논문을 사례로 하여 작성한 레포트입니다. 발표를 위주로 하기 위하여 작성한 레포트이기 때문에 세세한 첨부설명이 들어있습니다.

목차

사례 1. 포도 송이가지에서 레스베라트롤의 분리 정제
사례 2. 매실추출물로부터 항균물질의 분리
사례 3. 머루 종자 에탄올 추출물로부터 항산화활성물질 분리

본문내용

사례 1. 포도 송이가지에서 레스베라트롤의 분리 정제
- 항산화 물질로 알려진 레스베라트롤(Resveratrol)은 스틸벤 계열의 물질로 야채 및 과일류 식물 등에서 합성되며 UV조사, 금속이온, 병원균 감염 등과 같은 생물학적, 비생물학적 스트레스와 외부 자극으로부터 자신을 보호하기 위해서 합성된다. Resveratrol은 파이토알렌신계열의 폴리페놀 물질로 지방 과산화 억제 및 프리 라디칼 소거 기능과 같은 항산화 작용, cycloxygenase 저해 등의 함염증 작용, 암세포 성장 억제 및 암 예방 효능, 혈소판 응집억제, 심혈관질환 방지, 신경보호작용 및 수명 연장 등의 효과가 보고되고 있다.
이 연구의 목적은 포도착즙 공장에서 얻어지는 포도송이 가지 부산물로부터 기능성 물질인 Resveratrol을 추출, 정제하여 건강보조식품 및 향장품 재료로 사용함으로써 제품의 부가가치를 향상시키는 것을 목적으로 한다.

Fig. 2. 포도송이 가지에서 resveratrol의 분리 과정

▶ 분리방법 : Open column 및 prep-HPLC를 이용한 resveratrol의 정제
- 포도송이가지를 80% 에탄올을 이용하여 2회 초음파 추출한 용액을 4000 rpm에서 15 분 원심분리한 후 상등액을 취하여 물과 에탄올을 완전 농축시켜 증류수에 용해시킨 다음 ethylacetate로 분액한 후 이 층을 농축한다. 이 농축물에 메탄올을 가하여 silica gel로 코팅한다. 이 시료를 silica gel Merck #7734로 제조된 open column에 분말형태로 로딩한 후 n-hexane과 ethylacetate 로 용매 조성을 변경하면서 resveratrol을 분리 정제하였다.

- resveratrol의 순도를 높이기 위해 silica gel을 충진한 open column을 사용하여 다양한 용매로 분별하였다. Ethylacetate(EtOAc) 추출물 19.39 g을 open column에 로딩하여 Solvent A, B로 순차적으로 용출한 뒤 10개의 fraction으로 나누었으며, 이때 F4는 재결정분획이고 모액은 F3이다. Resveratrol이 포함된 F8을 30×300 mm 크기의 Yamazen column에 Merck silica gel #9385를 충진하여 prep-HPLC로 용출하였다. 이 때 flow rate는 5mL/min으로 solvent C 30 min, solvent D 1 h 후 solvent E에서 sfr.8을 얻었으며, sfr.1에서 sfr.7은 F7에 합하였고, sfr.9는 F9에 합하였고, sfr.10는 F10에 합하여 F1에서 F10까지의 분획물을 분취하여 건조시켜 보관하였다. 이 때 분취된 resveratrol을 HPLC로 분석한 결과 99% 이상의 고순도로 정제되었음을 알 수 있었다.

참고자료

· 없음