진행성 자궁내막증 환자의 자궁내막에서 추정줄기세포의 과다발현 (The hyperexpressions of putative stem cells in the eutopic endometrium of patients with advanced endometriosis)

서지정보

· 발행기관 : 대한산부인과학회
· 수록지 정보 : Obstetrics & Gynecology Science / 53권 / 3호 / 264 ~ 273페이지
· 저자명 : 최종렬, 주종길, 나용진, 고경래, 이홍구, 이규섭, 임용택

초록

목적: 최근 줄기세포가 자궁내막증의 병인에 관련될 것이라는 가설이 제시되었다. 이 연구의 목적은 자궁내막증 여성과 대조군 여성의 월경혈에서 채취한 자궁내막세포를 배양하여 줄기세포의 특성을 나타내는지 확인하고, 두 군 간에 줄기세포의 미분화표지자인 OCT-4와 CXCR4의 발현율에 차이가 있는지 알아보고자 한다.
연구 방법: 진행성 자궁내막증 여성 6명과 자궁내막증, 자궁선근증, 자궁근종이 없는 여성 10명을 대상으로 하였다. 자궁내막세포는 월경주기 2~4일 째에 월경혈에서 채취하여 약 2주 정도 배양하였으며, 이후 추정줄기세포를 Percoll density gradient method 방법으로 분리 및 배양하면서 세포의 특징을 관찰하였다. OCT-4와 CXCR4 발현율 차이는 real time RT-PCR을 이용하여 분석하였다.
결과: 자궁내막증 환자의 자궁내막세포들은 대조군에 비하여 형태학적으로 다른 특징을 나타내었는데, 이질적인 지지세포들과 3 μm 미만의 극소원형세포들과 약 5~15 μm의 과다염색질 원형세포들이 더욱 흔히 관찰되었다. 이후 3 μm 미만의 극소원형세포들만 다시 분리하여 배양한 결과, 자가 재생, 비대칭 분열, 군집 형성, 배아체 형성과 같은 줄기세포의 여러 특징들을 나타내었다. 3 μm 미만 극소원형세포들은 극소배아양 줄기세포와 유사한 특성을 나타내었는데, 적혈구보다 작은 세포가 움직이거나, 지지세포로 이동 혹은 부착하기도 하고, 세포 응집을 통해 구형세포를 형성하거나, 세포 융합을 통해 새로운 분화된 세포를 형성하기도 하였다. real time RT-PCR을 이용한 OCT-4와 CXCR4 검사에서는 자궁내막증 환자가 대조군에 비하여 각각 5.66배, 17.69배 높게 발현하였다 (P<0.05).
결론: 자궁내막증 환자의 자궁내막세포에서 줄기세포의 특성을 나타내는 3 μm 미만의 극소원형세포와 약 5~15 μm의 과다염색질 원형세포들이 더욱 흔히 존재하였으며, 자궁내막증 환자 군의 OCT-4와 CXCR4의 발현율은 통계학적으로 유의하게 높았다. 이는 줄기세포가 자궁내막증의 병인에 있어 주된 역할을 할 수도 있다는 것을 암시하며, 향후 OCT-4와 CXCR4가 자궁내막증의 진단 또는 경과관찰에 유용한 도구로 사용될 수도 있을 것으로 사료된다.

영어초록

Objective: Recently it has been proposed that stem cells may be associated with the pathogenesis of endometriosis. The purposes of this study are to investigate whether the eutopic endometrial cells of women with or without endometriosis show the characteristics of stem cells in vitro and have a difference of the expressions of the undifferentiated stem cell markers as OCT-4 and CXCR4.
Methods: A total of 6 women with advanced endometriosis and a total of 10 women without endometriosis, adenomyosis or leiomyoma were included in this study. The eutopic endometrial cells, which were obtained from the menstrual blood at menstrual cycle day 2 to 4, were cultured in vitro for approximately 2 weeks, subsequently the putative very small stem cells were separated by Percoll density gradient method and were cultured. The expressions of OCT-4 and CXCR4 were analyzed by real time RT-PCR.
Results: The eutopic endometrial cells of the group of endometriosis compared with the control group showed the different morphological characteristics in vitro; more commonly heterogeneous supportive cells, very small round cells less than 3 μm and 5~15 μm sized hyperchromatic round cells. After the separation of very small round cells by Percoll density gradient method, these cells showed the several characteristics of stem cells; self-renewal, asymmetric cell division, colony formation and embryoid body-like formation. Also These cells showed the similar characteristics of very small embryonic-like stem cells; the mobile cells smaller than erythrocyte, the cell migration or adhesion to supportive cells, the sphere formation by cell aggregation and the formation of new differentiated cell by cell fusion. The expressions of OCT-4 and CXCR4 in the group of endometriosis are respectively 5.66 times and 17.69 times as high as the control group (P<0.05).
Conclusion: The very small round cells less than 3 μm and 5~15 μm sized hyperchromatic round cells, which showed the several characteristics of stem cells in vitro, were more common in eutopic endometrial cells of patients with endometriosis and the expressions of OCT-4 and CXCR4 were significantly higher. This study suggests that stem cells might play a key role in the pathogenesis of endometriosis and OCT-4 and CXCR4 might be used as a tool for diagnosis or follow-up.

참고자료

· 없음