총 3,438개
-
GFP 단백질과 단백질 정량(Protein Measurements)2025.01.221. 단백질 정량 단백질 정량 방법 중 Lowry assay와 Extinction coefficient assay를 통해 단백질을 정량하고, 비교하는 과정에서 흡광도와 표준곡선의 의미를 이해하고자 수행한 실험이다. 단백질은 아미노산의 중합체로, 아미노산 사이에 펩타이드 결합이 반복되며 단백질이 형성된다. 이번 실험에서 사용한 단백질의 농도를 정량하는 방법은 특정 아미노산 또는 단백질의 흡광도를 이용하는 Extinction coefficient assay와 표준곡선식과 750 nm에서의 흡광도를 이용하는 Lowry assay이다. 2...2025.01.22
-
단백질 정제2025.01.231. 재조합 단백질 발현 재조합 단백질 기법은 정제하려고 하는 단백질의 유전자를 플라스미드 벡터에 삽입한 후, 이 플라스미드 벡터를 다시 세포에 도입하면 그 세포가 도입된 외부 유전자를 마치 원래 자기가 가지고 있던 유전자인 것처럼 발현을 하는 방법이다. 이번 단백질 정제실험에서 사용하는 플라스미드인 pET28a Vector는 kanamycin이라는 항생제에 대한 저항성을 부여하는 유전자인 KanR을 갖고 있어, 배양액에 kanamycin 항생제를 넣어놓고 그곳에 대장균을 넣으면 KanR을 갖고 있는 플라스미드인 pET28a Vec...2025.01.23
-
단백질의 분리(생화학실험)2025.01.161. 단백질 단백질이란 생화학에서 생물의 몸을 구성하는 고분자 유기 물질이다. 수많은 아미노산의 연결체로 이루어져 있으며, 생물체 내의 구성 성분, 세포 안의 각종 화학반응의 촉매 역할(효소), 항체를 형성하여 면역을 담당하는 등 여러 가지 형태로 중요한 역할을 수행한다. 2. 단백질 추출 단백질을 추출하기 위해서는 버퍼를 넣고 세포나 조직을 깨뜨려줄 필요가 있다. 세포 및 조직을 깨트리는 방법에는 homogenization, sonication, french pressure cell, grinding, glass bead vort...2025.01.16
-
10_PAGE를 이용한 단백질 검정 보고서2025.01.181. 단백질의 구조와 기능 단백질은 수백에서 수만 개의 아미노산으로 이루어진 중합체이다. 아미노산은 아미노기와 카복실기를 가지고 있는 단량체로, 곁사슬의 성질에 따라 소수성, 친수성, 염기성, 산성 등으로 구분된다. 단백질은 1차, 2차, 3차, 4차 구조를 가지며, 이러한 구조에 따라 다양한 기능을 수행한다. 단백질은 효소, 구조 단백질, 운동 단백질, 신호 단백질, 수용체 단백질, 수송 단백질, 방어 단백질, 저장 단백질 등 다양한 종류가 있다. 2. 단백질 합성 과정 단백질 합성은 mRNA, 리보솜, tRNA를 이용하여 이루어...2025.01.18
-
SDS-PAGE를 이용한 단백질의 분석2025.01.231. SDS-PAGE SDS-PAGE는 SDS가 단백질에 일정 간격으로 결합하여 charge density를 일정하게 하고, 단백질을 변형시켜 모든 단백질이 일정 모양(선형)을 갖게 함으로써 단백질이 전기장에서 크기(분자량)에만 의존적으로 분리되게 한다. Stacking gel과 Resolving gel의 pH 차이로 인해 단백질이 크기별로 분리된다. Coomassie blue 염색을 통해 단백질 band를 확인할 수 있다. 2. 단백질 정제 실험 결과, sample2에서 Naa30 protein의 사이즈에 해당하는 protein ...2025.01.23
-
단백질 풀림 실험 결과2025.05.091. 단백질 풀림 이번 실험에서는 단백질이 접힌 상태를 유지하는지, 풀리는지에 대해 판별하였다. 여러 종류의 시약들을 가하며 단백질의 풀림을 결정하였다. urea, 비눗물, HCl, NaOH, 에탄올 용액을 가했을 때 단백질이 풀렸다는 사실을 알 수 있다. 온도를 변화시키며 단백질의 풀림을 결정하였다. 단백질을 가열하면 수소결합과 소수성 상호작용이 파괴되고, 단백질을 냉각하면 소수성 상호작용이 약화되며 폴리펩타이드 사슬이 풀리게 된다. 2. chaotropic agent urea와 guanidine hydrochloride는 cha...2025.05.09
-
BRADFORD 단백질 정량법을 이용한 온도변화에 따른 유청단백질의 농도 측정(추가실험)2025.05.121. Bradford 단백질 정량법 Bradford 단백질 정량법은 쿠마시블루와 단백질의 특정 아미노산의 결합력을 이용하여 단백질을 정량하는 방법입니다. 쿠마시블루 G-250 염색약이 산성 환경에서 단백질(염기성 및 방향족 곁 사슬을 갖는 아미노산)과 결합하면 푸른색으로 변하게 됩니다. 이 과정에서 단백질의 소수성 부위가 노출되어 염색약과 반데르발스 힘으로 비공유결합을 이루고, 양전하를 띠는 아민기와 염색약의 음전하 부위가 이온결합을 이루면서 단백질과 염색약의 결합이 더욱 강화됩니다. 2. 온도에 따른 단백질 변성 이 실험에서는 프...2025.05.12
-
단백질 레포트2025.05.081. 단백질 단백질이란 무엇일까? 단백질은 아미노산이 펩타이드 결합을 하여 생긴 여러 개의 아미노산으로 이루어진 고분자 화합물이다. 단백질은 신체 내에서 세포를 구성하고 생체 내 물질대사의 촉매 작용을 하여 생명 현상을 유지하는 물질로서, 사람의 3대 영양소 가운데 하나이다. 단백질 섭취가 과다하거나 부족하면 건강에 해로울 수 있으므로 균형 잡힌 식단으로 섭취하는 것이 중요하다. 2. 단백질 섭취 단백질은 신체에 필수적인 영양소이지만 과다 섭취하면 암, 당뇨 등 성인병을 유발할 수 있다. 반대로 단백질 섭취가 부족하면 물질대사에 문...2025.05.08
-
단백질의 변성2025.01.041. 단백질의 구조 단백질은 신체를 이루는 주성분으로, 몸에서 물 다음으로 많은 양을 차지한다. 단백질의 구성단위 물질은 아미노산이며, 아미노산 사이의 펩타이드 결합에 의해 단백질이 형성된다. 단백질의 구조는 크게 1차 구조, 2차 구조, 3차 구조, 4차 구조의 4가지로 나뉜다. 1차 구조에서 4차 구조로 나아갈수록 단백질이 점점 접히게 된다. 2. 단백질의 변성 단백질의 변성이 일어나면 3차 또는 4차 구조의 기능을 하는 단백질이 1차 구조로 풀리게 되고, 변성이 된 단백질은 제대로 된 기능을 할 수 없게 된다. 2차, 3차, ...2025.01.04
-
세포 용해를 통한 단백질 추출2025.01.021. 세포 용해 방법 세포 용해(또는 세포 파괴)에 사용되는 다양한 물리적, 화학적 방법을 살펴보고, RIPA 용해 완충액을 사용하여 세포를 파괴하고 세포 단백질을 얻을 수 있다. RIPA 용해 완충액은 세포막, 핵막, 단백질 결합을 모두 분해할 수 있는 강한 계면활성제를 포함하고 있어 세포질, 핵 단백질 등 다양한 단백질을 추출할 수 있다. 2. 단백질 추출 과정 배양 중인 MCF-7 세포를 DPBS로 세척하고 세포 긁개로 세포를 모아 원심분리하여 세포 펠릿을 얻었다. 이 세포 펠릿에 RIPA 용해 완충액을 처리하여 세포를 용해하...2025.01.02
1 / 344
