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플라스미드 DNA 정제2025.01.121. 플라스미드 DNA 분리 플라스미드 DNA는 재조합 DNA 조작을 위한 운반체 DNA로 사용되며, 대장균에 플라스미드를 삽입하는 과정을 Bacterial Transformation이라고 한다. 대장균 세포에는 플라스미드 DNA와 염색체 DNA가 독립적으로 존재하므로, 플라스미드 DNA를 따로 분리하는 과정을 Purification of plasmid DNA라고 한다. 알칼리 용해법(Alkali lysis)은 높은 pH의 알칼리성 용액을 사용하여 세포벽과 세포막을 용해시킨 후, 산성 용액을 처리하여 플라스미드 DNA만을 분리해내는...2025.01.12
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[병리학] 09 종양2025.01.231. 종양의 정의와 분류 종양의 정의와 분류에 대해 설명할 수 있다. 양성종양과 악성종양의 차이를 설명할 수 있다. 종양의 발생 모조직에 따라 상피성 종양과 비상피성 종양, 혼합종양으로 분류할 수 있다. 종양을 구성하는 조직이나 성질을 나타내는 말 뒤에 '종(-oma)'을 붙여 명명할 수 있다. 2. 종양의 형태학적 특징 종양의 육안적 형태와 조직학적 형태를 설명할 수 있다. 종양의 분화도와 비정형성을 이해하고 양·악성 종양을 구분할 수 있다. 3. 종양의 발생과 성장 종양의 발생 기전, 성장 방식, 전이 경로 등을 설명할 수 있다...2025.01.23
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Agarose gel 제작 및 DNA 전기영동 실험2025.11.181. DNA 전기영동(Electrophoresis) DNA 전기영동은 DNA가 음전하를 띠고 전기장에서 양극으로 이동하는 원리를 이용한 분석 기법이다. Agarose gel 매질에서 DNA는 크기에 따라 다른 속도로 이동하여 분리된다. TAE buffer를 사용하며, Tris는 양이온을 공급하고 Acetate는 pH를 조절하며 EDTA는 DNase를 억제한다. DNA의 이동속도는 크기, 형태, gel 농도, 전압, buffer 성분에 영향을 받는다. 2. Agarose gel 제작 1% Agarose gel은 1X TAE 용액 35...2025.11.18
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Colony PCR 실험 결과 및 분석 보고서2025.11.141. Colony PCR 원리 및 방법 Colony PCR은 DNA 추출이나 플라스미드 정제 없이 세균 colony에서 직접 원하는 insert를 포함하는 플라스미드를 선별하는 방법이다. 미생물 colony를 template로 사용하여 비용 절감과 시간 단축의 장점이 있으나, 목적 DNA의 돌연변이를 탐지할 수 없어 거짓 양성 결과 확률이 높다는 단점이 있다. 2. PCR 실험 오차 원인 및 개선 방안 실험 오차는 클린 벤치 미사용으로 인한 오염, 이쑤시개 재사용으로 인한 colony 오염, 피펫팅 과정의 거품 발생으로 인한 DNA...2025.11.14
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아조염료 합성 실험 결과보고서2025.11.121. 아조염료(Azo Dyes) 합성 아조염료는 아조기(-N=N-)를 포함하는 유기화합물로, 디아조화 반응과 짝짓기 반응을 통해 합성된다. 방향족 아민을 아질산염으로 디아조화한 후 페놀이나 나프톨과 같은 짝짓기 성분과 반응시켜 다양한 색상의 염료를 생성한다. 아조염료는 섬유 산업에서 광범위하게 사용되며 높은 색상 안정성과 다양한 색상 표현이 가능하다. 2. 디아조화 반응(Diazotization) 디아조화 반응은 1차 방향족 아민을 아질산염(NaNO2)과 산성 조건에서 반응시켜 디아조늄염을 생성하는 과정이다. 이 반응은 저온에서 진...2025.11.12
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구순열과 구개열의 원인, 병태생리, 진단 및 치료2025.11.161. 구순열과 구개열의 원인 구순열과 구개열은 유전인자와 환경인자가 혼합된 다양한 원인으로 초래된다. 일란성 쌍생아에서 이란성 쌍생아보다 발생 빈도가 더 높게 나타난다. 이는 유전적 요인이 질환 발생에 중요한 역할을 함을 시사한다. 2. 구순열과 구개열의 병태생리 배아기에 중배엽의 결손 및 증식이상으로 상악골과 상악전구골 돌기 부전에서 기인된다. 윗입술의 결합은 태생 7~8주 사이에, 연구개와 경구개의 융합은 태생 7~12주 사이에 일어난다. 두 질환은 태생기 동안 다른 시기에 발생하는 발생학적으로 다른 기형이다. 3. 구순열과 구...2025.11.16
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단백질 정량법 비교: BCA와 Bradford 분석2025.11.161. BCA Assay (Bicinchoninic Acid Assay) BCA assay는 562nm 파장에서 흡광도를 측정하여 단백질을 정량하는 방법입니다. 보랏빛 착물 생성량이 증가할수록 흡광도 값이 커지며, 흡광도와 단백질 양이 비례합니다. Working Reagent는 MA, MB, MC를 25:24:1의 부피비로 혼합하여 제조하며, 60°C에서 1시간 반응시킵니다. 본 실험에서 미지시료의 평균 농도는 1.196 μg/ml로 측정되었습니다. 2. Bradford Assay Bradford assay는 Coomassie bri...2025.11.16
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DNA 제한효소2025.01.151. 제한효소 제한효소는 세균이 박테리오파지의 공격을 받으면 생산하는 효소로 이중 나선의 DNA의 특정한 염기서열을 인식해 그 부분의 절단에 있어 촉매작용을 하는 효소이다. 대부분의 제한효소는 인식자리(recognition site) 또는 제한 자리(restriction site)라는 특정한 염기서열이 있는 자리에서 DNA를 절단한다. 제한효소는 회문이라는 양 사슬의 5'부터 3' 방향으로 똑같은 서열을 가진 DNA의 부위를 인식해 작용한다. 제한효소가 DNA를 절단하면 이중 가닥 중 한 가닥이 돌출된 형태를 띠는데 이를 점착 말단...2025.01.15
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Cell Culture and Cell Counting using a hemocytometer 보고서2025.01.211. 세포 배양 세포 배양은 동물이나 식물에서 채취한 세포를 인공적으로 조성된 환경에서 성장시키는 과정입니다. 세포 배양에는 세포 배양 플라스틱, 세포 배양 배지, 트립신 등이 사용됩니다. 세포 배양 시 무균 상태를 유지하고 각 세포 유형에 맞는 환경을 제공해야 합니다. 2. 세포 계수 세포 계수는 세포의 수를 측정하는 과정입니다. 트립판 블루 염색법을 이용하여 살아있는 세포와 죽은 세포를 구분할 수 있습니다. 혈구 계산기, 유세포 분석기, 쿨터 계수기 등 다양한 방법으로 세포를 계수할 수 있습니다. 3. NIH-3T3 세포 배양 ...2025.01.21
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Plasmid DNA의 제한효소 절단 및 전기영동2025.01.221. 플라스미드 DNA 플라스미드는 vector의 한 종류로, 염색체와는 독립적으로 존재하는 원형의 DNA이다. 스스로 복제할 수 있고, 유전될 수 있으며 외부의 유전자를 포함해 전달될 수 있다. 2. 제한효소 제한효소는 DNA를 자를 수 있는 효소를 말하는데, DNA 분자의 특정한 염기서열에 결합해 DNA를 절단한다. 이렇게 절단된 DNA 조각은 전기영동을 통해 분리될 수 있다. 3. 전기영동 전기영동은 슬러리 내의 전하를 가진 입자들에 전기를 가하게 되면 각자 가진 전하의 반대되는 극성을 띠는 쪽으로 이동하는 현상을 말한다. 이...2025.01.22
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