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Plasmid DNA의 제한효소 절단 및 전기영동2025.01.221. 플라스미드 DNA 플라스미드는 vector의 한 종류로, 염색체와는 독립적으로 존재하는 원형의 DNA이다. 스스로 복제할 수 있고, 유전될 수 있으며 외부의 유전자를 포함해 전달될 수 있다. 2. 제한효소 제한효소는 DNA를 자를 수 있는 효소를 말하는데, DNA 분자의 특정한 염기서열에 결합해 DNA를 절단한다. 이렇게 절단된 DNA 조각은 전기영동을 통해 분리될 수 있다. 3. 전기영동 전기영동은 슬러리 내의 전하를 가진 입자들에 전기를 가하게 되면 각자 가진 전하의 반대되는 극성을 띠는 쪽으로 이동하는 현상을 말한다. 이...2025.01.22
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PCR 기반 Specific Human DNA 증폭 및 검출 결과 보고서2025.01.151. PCR 기반 Specific Human DNA 증폭 및 검출 이 보고서는 PCR 기술을 사용하여 특정 인간 DNA를 증폭하고 검출하는 실험 결과를 설명합니다. 실험에서는 구강 상피 세포에서 DNA를 추출하고, 특정 프라이머를 사용하여 DNA를 증폭한 후 전기영동을 통해 분석했습니다. 실험 결과, 두 개의 샘플에서 250bp 부근에서 강한 발현이 관찰되었으며, 이 중 하나는 wild type, 다른 하나는 mutant type의 DNA인 것으로 확인되었습니다. 이 실험을 통해 PCR의 기본 원리와 UV-transilluminat...2025.01.15
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DNA 클로닝 및 PCR 실험을 통한 DNA 기술 이해2025.11.161. DNA 클로닝 및 형질전환 DNA 클로닝은 원하는 DNA를 조작하고 복제하여 많은 복제 DNA를 얻는 기술입니다. 형질전환은 외부 유전자를 세포 내로 넣어 숙주세포가 새로운 유전형질을 갖게 되는 과정입니다. E.coli의 형질전환은 화학적 형질전환과 전기천공법으로 나뉘며, 화학적 형질전환은 CaCl2를 처리하여 세포벽을 중성화하고 heat shock을 통해 DNA 이동을 촉진합니다. Plasmid는 origin, MCS, lacZ 유전자, ampicillin resistance gene으로 구성되어 있습니다. 2. PCR(중합...2025.11.16
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[A+] 서강대학교 일반생물학실험1 실험 11. Plasmid DNA의 제한효소 절단 및 전기영동 풀레포트2025.01.021. DNA 운반체 (Vector) DNA 운반체인 vector는 종류가 다양하며, DNA의 유지와 복제가 가능한 DNA분자이다. 그 중 plasmid는 가장 널리 쓰이는 vector이며, circular구조의 이중가닥 형태를 갖는다. plasmid는 bacteria 또는 몇몇 eukaryotic cell에 존재하는 DNA molecules로 extrachromosomal circular, double stranded의 특징을 갖는다. Chromosomal DNA와는 독립적으로 자가복제가 가능하며 일반적인 bacteria genom...2025.01.02
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PCR과 제한효소를 이용한 ABO식 혈액형 판별2025.11.171. 제한효소(Restriction Enzyme) 제한효소는 주로 세균이 보유한 DNA를 절단할 수 있는 효소로, 외부에서 유입된 DNA의 특정 염기서열을 인식하여 절단함으로써 세균이 자신을 보호하는 수단이다. 진핵세포 DNA의 클로닝, 탐침 제작 및 표지, 핵산 구조 분석 연구에 필수적으로 사용되며, 본 실험에서는 KpnI 효소와 AluI 효소를 사용하여 ABO식 혈액형을 판별하였다. 2. 전기영동(Electrophoresis) 전기장의 영향으로 전하를 띤 물질이 유동성 매체에서 이동하는 원리를 이용한 기법이다. DNA는 인산기로...2025.11.17
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형질 전환 실험: 원핵 세포의 유전자 조작2025.11.141. 형질 전환(Transformation) 형질 전환은 외부에서 만들어진 plasmid를 plasmid가 없는 원핵 세포에 삽입하여 새로운 유전형질을 나타내게 하는 과정입니다. 제한효소를 이용하여 plasmid의 특정 부위를 절단하고 원하는 염기서열을 삽입합니다. Competent cell을 CaCl₂로 처리하여 외부 DNA를 쉽게 받아들일 수 있는 상태로 만들고, 42°C heat-shock과 ice bucket 처리를 통해 plasmid를 세포 내로 도입합니다. 이 과정은 인슐린 생산 등 의약품 개발에 광범위하게 활용됩니다. ...2025.11.14
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레닌저 생화학 정리노트 Ch08. 뉴클레오타이드와 핵산2025.05.101. 뉴클레오타이드와 핵산 뉴클레오타이드는 DNA와 RNA의 구성요소로 유전정보를 포함하는 분자 저장고가 되며, ATP는 에너지 통화 및 중요한 조절신호로 세포 대사에서 중심적인 역할을 합니다. 뉴클레오타이드와 핵산은 특징적 염기와 오탄당을 가지고 있으며, 퓨린기와 피리미딘기로 구분됩니다. DNA는 이중나선 구조를 가지며 수소결합에 의해 상보적으로 결합하고, RNA는 단일가닥 구조로 다양한 3차원 구조를 가집니다. 뉴클레오타이드와 핵산은 비효소적 변환을 겪으며, 돌연변이, 탈아미노화, 탈퓨린화, 방사선 및 화학적 손상 등이 발생할 ...2025.05.10
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효모 유전자 녹아웃(Gene Knockout) 실험 보고서2025.11.141. 유전자 녹아웃(Gene Knockout) 유전자 녹아웃은 특정 유전자의 기능을 분석하기 위해 그 유전자를 무력화하는 기술입니다. 기능적 단백질에 대한 유전정보를 삭제하는 효소를 이용하여 DNA 단편을 절단하며, 주로 상동 재조합에 의해 진행됩니다. 본 실험에서는 효모의 MET2 유전자를 마커 유전자인 URA3로 치환하여 녹아웃을 수행했습니다. 이 과정을 통해 MET2 유전자가 메티오닌 생합성에 관여함을 확인할 수 있었습니다. 2. 상동 재조합(Homologous Recombination) 상동 재조합은 상동인 두 개의 DNA ...2025.11.14
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분자생물학실험 Gene cloning_TAE buffer 제작2025.04.271. TAE buffer 제작 TAE buffer 제작(30ml 50X TAE buffer)의 목적, 재료, 방법 등을 자세히 설명하고 있습니다. TAE buffer는 DNA 전기영동에 사용되는 완충액으로, Tris, acetic acid, EDTA 성분으로 구성됩니다. 제작 방법은 각 성분의 양을 계산하여 증류수와 혼합하고 멸균하는 과정으로 이루어집니다. 2. PCR(중합효소 연쇄반응) PCR은 DNA 증폭 기술로, DNA 중합효소를 사용하여 원하는 DNA 염기서열을 대량으로 증폭시킬 수 있습니다. PCR에 필요한 주요 요소는 주...2025.04.27
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미생물학 분류 및 식별 기법2025.11.171. 미생물 분류학(Taxonomy) 미생물 분류학은 식별(identification), 분류(classification), 명명법(nomenclature)의 세 가지 영역으로 구성된다. 식별은 유기체의 특징을 나타내는 과정이고, 분류는 비슷하거나 관련 있는 집단끼리 유기체를 배열하는 과정이며, 명명법은 이름을 할당하는 것이다. 3역 6계 체계에서는 16S rRNA 염기서열 분석을 바탕으로 bacteria, archaea, eukarya 세 가지 영역으로 모든 유기체를 분류한다. 2. 박테리아 식별 기법 박테리아 식별에는 이분법적 ...2025.11.17
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