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PCR을 이용한 DNA 복제와 DNA 전기영동 보고서2025.01.181. PCR(중합효소 연쇄반응) PCR은 1983년 K. B. Mullis가 고안한 방법으로, DNA를 대량으로 증폭할 수 있는 기술이다. PCR에 필요한 재료로는 복제하고자 하는 DNA, Taq DNA 중합효소, dNTPs, 프라이머, DNA 중합효소용 완충용액, MgCl2 등이 있다. PCR 과정은 변성, 결합, 중합 단계로 이루어지며, 이를 30회 이상 반복하면 DNA 총량이 기하급수적으로 증가한다. PCR은 친자 확인, 병원균 검출, 유전자변형식품 검사, 유전자 지도 작성, 범인 식별 등 다양한 분야에 활용된다. 2. DNA...2025.01.18
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DNA 추출2025.04.281. DNA 구조 DNA는 Deoxyribonucleic Acid의 약자로 nucleotide의 중합체인 두개의 긴 가닥이 서로 꼬여 이중나선 구조를 이루고 있는 고분자 화합물이다. DNA의 구조를 살펴보면 한 분자당 polynucleotide 사슬 2개로 구성되어 있으며, 각 가닥은 네가지 종류의 nucleotide로 구성되어 있고, 이 두 가닥은 nucleotide의 염기부위 간 수소결합을 통해 결합한다. 2. DNA 추출 과정 바나나를 소금, 물과 함께 믹서기로 갈아서 걸러주어 세포벽을 파괴하고 DNA가 중성을 띠게 만들어주어...2025.04.28
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[생화학실험] A+, PCR 및 agarose gel 전기영동 실험2025.01.071. PCR (Polymerase Chain Reaction) PCR은 원하는 DNA band만을 증폭 가능하며, 이때 DNA polymerase가 사용된다. 30-40 cycle 정도 반복하여 증폭하고자 하는 표적 DNA의 한 DNA 사슬 3'말단에 상보적인 것과 그 반대 사슬의 3'말단에 상보적인 2개의 특정 올리고데옥시뉴클레오티드를 합성하고, 이를 원하는 절편을 함유한 변성된 한 가닥의 표적 DNA와 혼성화 반응 시킨다. DNA polymerase는 Taq DNA polymerase를 사용하며, 이는 열에 안정성이 있는 DNA...2025.01.07
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[일반생물학실험] Plasmid DNA - 전기영동2025.01.031. DNA 전기영동 DNA 전기영동은 DNA를 크기에 따라 분리하는 기술입니다. DNA는 인산기를 가지고 있어 전기영동 완충용액에서 음전하를 띠게 되며, 전류를 흘려주면 양극 쪽으로 이동하게 됩니다. DNA 분자량이 클수록, agarose 농도가 높을수록, 전압이 낮을수록 이동속도가 느려집니다. 또한 DNA 구조에 따라서도 이동속도가 달라집니다. 전기영동 후 ethidium bromide로 염색하면 UV 조사 시 형광을 발하여 DNA를 확인할 수 있습니다. 1. DNA 전기영동 DNA 전기영동은 생명과학 분야에서 매우 중요한 기술...2025.01.03
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[A+ 보장!] 연세대 의대 의예과 1학년 General Biology 실험 레포트 Genomic DNA extraction2025.01.141. DNA 클로닝 DNA 클로닝은 제한 효소를 이용하여 특정한 유전자를 절단하는 과정에서 시작한다. 제한 효소는 특정한 염기들의 서열을 인식하고 이를 절단하는 기능을 수행한다. 또한 제한 효소는 종류에 따라 점착 말단과 무딘 말단을 형성한다. 다음으로 표적 유전자를 벡터에 삽입해야 하며, 이 과정에서 DNA 연결 효소가 사용된다. 마지막으로 재조합 플라스미드를 박테리아에 다시 도입한다. 2. 젤 전기영동 젤 전기영동은 동일한 DNA를 찾는 과정에서 유용하게 사용된다. 동일한 DNA를 동일한 제한 효소로 처리한다면 동일한 길이의 D...2025.01.14
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DNA - EtBr 염색, Methylene blue 염색2025.05.111. DNA 구조 DNA는 이중나선 구조로 구성되어 있으며, 두 가닥의 DNA가 거의 공통된 축의 주위를 오른쪽으로 감고 있다. 이 구조는 DNA에 있는 화학 결합이 비틀림을 만들어내며, 그 결과 안정성을 가지게 해준다. 또한 이중나선 구조 안쪽에 있는 염기를 보호하기에 적절하다. 최근에는 다양한 유전자 치료법에서 잘못된 염기서열을 교정할 때 두 가닥의 상보성을 활용하기도 한다. 2. DNA 염색 방법 DNA 염색 방법에는 EtBr(Ethidium bromide)과 Methylene blue 염색 방법이 있다. EtBr은 DNA의 ...2025.05.11
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새로운 박테리아 종 동정을 위한 DNA 추출2025.05.081. DNA 추출 과정 본 실험에서는 미지 균주의 DNA를 추출하는 과정을 수행하였다. 균주를 PBS에 현탁하고 원심분리하여 세척한 뒤, lysozyme과 SDS를 처리하여 세포를 용균시켰다. 이후 PCI, chloroform을 이용하여 단백질과 불순물을 제거하고 에탄올 침전을 통해 DNA를 회수하였다. 최종적으로 0.1x SSC 완충액에 녹여 DNA 농도를 측정하였다. 그러나 260/280, 260/230 비율이 이상적인 수준에 미치지 못하여 순수한 DNA 추출에는 어려움이 있었던 것으로 나타났다. 2. DNA 추출 시약의 역할 ...2025.05.08
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일반화학실험 '전기 영동' 예비 레포트(pre_report) A+ 자료2025.01.201. 전기영동 전기영동의 원리를 이해하고 이를 이용하여 DNA의 크기를 확인해 본다. 전기영동은 전류를 흘려보낼 수 있는 장치 안에 담겨있는 용액 속에 전하를 띈 입자를 넣은 뒤, 전기장을 형성시켜 입자를 이동시키는 방법이다. DNA, RNA, 단백질과 같은 물질들은 전하를 띄고 있어 전기영동 방법을 적용할 수 있으며 분리가 가능하다. 전기영동법에서 자주 사용되는 지지매질로 Agrose Gel을 사용하는 겔 전기 영동법과 Polyacrylamide gel을 사용하는 전기 영동법(Polyacrylamide gel, PAGE)이 있다....2025.01.20
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PCR 기법을 이용한 DNA 복제와 DNA 전기영동 실험 보고서2025.05.141. PCR (중합효소 연쇄 반응) PCR은 1983년 K.B.Mullis에 의해 고안된 방법으로, 검출을 원하는 특정 표적 유전자를 증폭하는 기술이다. PCR을 통해 미량의 DNA 시료에서 목적 DNA 영역을 수시간에 20만~50만배로 증폭할 수 있으며, 이는 현재 유전물질을 조작하는 거의 모든 과정에서 사용되고 있다. PCR은 인간의 DNA를 증폭하여 유전질환을 진단하거나, 세균이나 바이러스의 DNA를 증폭하여 감염성 질환을 진단하는 데 사용될 수 있다. 2. DNA 전기영동 DNA 전기영동은 크기, 전하 또는 구조가 다른 DN...2025.05.14
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세포생리학실험_cell culture, Genomic DNA Isolation_genomic DNA 추출, total RNA 추출, 전기영동2025.01.131. 세포 배양 HEK 293T 세포를 DMEM 배지와 FBS를 사용하여 배양하였다. 세포는 처음에는 동글동글한 모양이었지만 점차 바닥에 붙어 자라나면서 별모양의 형태를 띠었다. 배지의 색이 점점 노란색으로 변하면서 세포가 죽기 시작하였다. 이를 통해 세포가 일정 횟수의 분열을 한 후 노화되는 과정을 관찰할 수 있었다. 2. Genomic DNA 추출 HEK293T 세포에서 genomic DNA를 추출하였다. 세포를 용해시킨 후 단백질과 RNA를 제거하는 과정을 거쳐 순수한 DNA를 분리하였다. 전기영동 결과 DNA 밴드가 마커보다...2025.01.13
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