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대장균에서 재조합 단백질 생산 및 정제2025.01.131. 재조합 단백질 생산 대장균 BL21(DE3) 균주는 재조합 단백질 고발현에 널리 사용되며, lac 프로모터와 T7 프로모터를 이용하여 IPTG 유도 하에 단백질을 발현할 수 있다. 본 실험에서는 pET28a 벡터를 사용하여 His-tag 융합 단백질을 생산하고, Ni-NTA 친화성 크로마토그래피와 FPLC를 통해 단백질을 정제하는 방법을 익혔다. 2. 단백질 분석 SDS-PAGE를 통해 단백질 크기별 분리와 정제 과정을 확인하였고, Bradford assay로 단백질 농도를 정량하였다. 또한 DES와 OASS 효소 활성 측정을...2025.01.13
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NCBI의 유전자 서열 분석 및 단백질 삼차원 구조 모델링2025.01.231. NCBI 데이터베이스 NCBI에서 제공하는 다양한 데이터베이스(Genome, BioProject, BioSystems 등)에 대해 설명하고, 이를 통해 유전자 정보와 서열을 분석할 수 있음을 설명하였다. 2. 유전자 돌연변이 유전자 돌연변이의 개념과 종류(염기 치환, 결실, 삽입, 중복, 역위, 반복 확장 등)에 대해 설명하였다. 3. SOD1 유전자 SOD1 유전자의 기능, 발현, 관련 질병 등에 대해 자세히 설명하였다. 4. 서열 정렬 BLAST와 MSA 기법을 사용하여 SOD1 단백질 서열을 다른 생물종과 비교 분석하고,...2025.01.23
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SDS-PAGE and Protein Analysis2025.01.211. SDS의 역할 및 SDS-PAGE 원리 SDS(Sodium Dodecyl Sulfate)는 계면활성제로서 친수성과 소수성 부분을 모두 지니고 있으며, 단백질을 변성할 수 있는 물질이다. SDS-PAGE는 이러한 SDS의 특성을 토대로 하여 단백질을 분자량에 따라 band 형태로 분리하는 실험이다. 단백질은 그 구조와 전하, 분자량이 모두 다르기 때문에 SDS를 통해 단백질의 구조와 전하를 모두 일정하게 한 뒤 분자량에 의해서만 분석을 진행한다. 2. Gel에 들어가는 시료의 역할 Acrylamide와 N,N'-Methylene...2025.01.21
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Wnt/β-catenin signaling activation full report2025.01.141. Wnt 신호 전달 경로 Wnt 신호 전달 경로는 세포 운명 결정, 세포 이동, Ca2+ 유입, 기관 형성 등 다양한 세포 반응을 조절하는 경로입니다. Axin, PP2A, APC, CK1, GSK3로 구성된 파괴 복합체는 β-catenin 단백질의 분해를 조절하여 Wnt 신호 전달을 조절합니다. β-catenin은 Wnt 신호 전달에서 다양한 역할을 하는 단백질로, 유전자 발현 조절과 세포 간 부착 조절에 중요한 역할을 합니다. 2. Lithium chloride (LiCl) Lithium chloride (LiCl)는 파괴 ...2025.01.14
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박테리아 세포로부터 플라스미드 정제하기 - 분자생물학 실험 예비보고서2025.01.041. 플라스미드 정제 이 실험에서는 박테리아 세포로부터 플라스미드를 정제하는 과정이 설명되어 있습니다. 플라스미드는 박테리아 세포 내에 존재하는 작은 원형 DNA 분자로, 유전자 조작 실험에 많이 사용됩니다. 이 실험에서는 플라스미드를 추출하고 정제하는 단계별 과정이 자세히 기술되어 있습니다. 2. 분자생물학 실험 이 자료는 분자생물학 실험의 일환으로 진행된 것으로, 유전자 조작 및 분석을 위한 기본적인 실험 기법들이 소개되어 있습니다. 플라스미드 정제 외에도 전기영동, 제한효소 처리 등 다양한 분자생물학 실험 기법들이 포함되어 있...2025.01.04
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[유전학] transfection method와 T7E12025.05.031. Transfection 방법 Transfection은 세포 내로 외부의 DNA나 RNA가 인위적으로 전달되는 과정을 의미한다. 핵산이 세포 내부로 들어가려면 세포막을 통과해야 하는데 이 방법에는 화학적, 생물학적, 물리학적 방법들이 이용된다. 대표적인 물리학적 방법으로는 Electroporation과 biolistics(유전자 총)이 있으며, 화학적 방법으로는 cationic lipid transfection이 있다. 각각의 방법들은 장단점이 있어 실험 목적과 이용하는 세포에 따라 선택하게 된다. 2. 새로운 Transfect...2025.05.03
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[만점 레포트] 연세대학교 생화학실험(1) 14주차 생쥐 비장에서 면역세포 분리 후 면역염색 및 유세포 분석2025.05.041. 면역세포 분리 생쥐 비장에서 면역세포를 분리하는 실험을 수행했습니다. 비장은 림프조직의 일종으로, 면역세포가 많이 존재하는 기관입니다. 이 실험에서는 비장에서 림프구, 대식세포, 수지상세포 등의 면역세포를 분리하고 이를 면역염색 및 유세포 분석을 통해 확인했습니다. 2. 면역염색 분리한 면역세포에 대해 면역염색을 실시했습니다. 면역염색은 세포 표면의 특정 단백질을 형광물질로 표지하여 세포를 구분하는 기법입니다. 이를 통해 B 림프구, T 림프구, 대식세포, 수지상세포 등 다양한 면역세포 아집단을 구분할 수 있습니다. 3. 유세...2025.05.04
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SDS PAGE 실험보고서2025.05.041. SDS PAGE SDS PAGE란 Sodium Dodecyl Sulphate -Polyacrylamide Gel Electrophoresis의 줄임말로써, PAGE는 전기영동법을 지칭하는 말로서 사용되기도 하고, 때로는 겔 자체를 지칭하기도 한다. 이를 사용한 전기 영동법 역시 기본적 원리는 한천을 이용한 것과 같다. 허나 폴리아크릴아마이드 겔은 한천 겔에 비해 훨씬 촘촘한 다공성 물질이기 때문에 한천을 이용할 때에 비해 분자량이 작고 크기 차이가 작은 시료들을 분리할 때 이용한다. 따라서 또다른 고분자 물질이지만 핵산에 비해...2025.05.04
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SDS-PAGE 이론2025.05.071. SDS-PAGE SDS-PAGE는 Sodium Dodecyl Sulfate- Polyacrylamide gel electrophoresis의 약자이다. SDS는 음이온성 계면활성제의 일종으로 단백질의 가용화제로서 이용되고 있으며 단백질의 전기영동에서 SDS-PAGE법이 가장 일반적인 방법으로 이용된다. SDS-PAGE의 원리는, 단백질을 구성하는 아미노산에 의해서 +,- 상관없이 어느쪽이건 전하를 띄지만 SDS가 결합함으로써 일시적으로 단백질이(-)하전을 띄어 모든 분자를 양극으로 이동시키고, gel의 pore 사이즈에 의해서...2025.05.07
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진핵세포의 단백질 합성에 대한 심화 탐구2025.01.091. 단백질 합성 관여 세포 소기관 핵은 모든 진핵생물에서 발견되며, 유전자가 변형되지 않게 유지하여 유전자 발현을 조절함으로써 세포의 활성을 조절하는 역할을 한다. 리보솜은 단백질을 합성하는 세포 소기관으로, mRNA와 결합하여 번역 과정이 이루어진다. 소포체와 골지체는 단백질 합성 및 가공 과정에 관여한다. 2. 단백질 합성 과정 단백질 합성 과정은 전사, 번역의 두 단계로 이루어진다. 전사 과정에서 DNA의 유전자 정보가 mRNA로 복사되고, 번역 과정에서 mRNA의 정보에 따라 리보솜에서 폴리펩타이드 사슬이 합성된다. 이후 ...2025.01.09
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