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현대생물학실험2: 형질전환, PCR, 전기영동2025.11.171. 형질전환(Transformation)과 Competent Cell 형질전환은 외부 DNA가 세포 내부로 들어와 세포의 형질이 바뀌는 현상이다. Competent cell은 외부 DNA를 받아들일 수 있는 상태의 박테리아 세포로, CaCl2 처리와 열충격을 통해 인위적으로 제조된다. DH5α 대장균을 사용하여 log phase(OD600=0.4~0.6)에서 CaCl2와 glycerol로 처리하면 형질전환 효율이 10^9 CFU/μg에 도달한다. 형질전환 효율은 (CFU on plate/pg DNA) × 10^6 × (total ...2025.11.17
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극성지질 추출 및 박층크로마토그래피 실험2025.11.151. 운동성 검사(Motility Test) 반고체 배지(0.4% agar)를 이용하여 미생물의 운동성을 관찰하는 실험이다. 천자접종 후 배양하면 호기성 세균은 표면 부근에서 잘 자라고, 혐기성 세균은 하단에서 자란다. 이 실험에서 접종한 획선 부위의 주변으로 균이 퍼져 자란 것을 확인하여 해당 균이 운동성을 가진 호기성 세균임을 알 수 있었다. 2. 동결보존(Freeze Preservation) 미생물 균주를 -80℃에서 장기간 보존하는 방법이다. Optimal medium broth와 50% glycerol을 1:1 비율로 혼합...2025.11.15
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그람염색과 식품의 균수 측정 실험2025.11.181. 그람염색(Gram Staining) 1884년 덴마크 미생물학자 Christian Gram이 고안한 감별염색법으로 세균을 그람양성과 그람음성으로 구분한다. 핵심은 탈색 과정으로, crystal violet이 탈색제에 의해 제거되는지 여부가 결정된다. 그람양성균은 두꺼운 peptidoglycan층(20~28μm)으로 CVI 복합체가 제거되지 않아 보라색을 유지하고, 그람음성균은 얇은 peptidoglycan층(2~7μm)과 지질층으로 CVI가 제거되어 safranin 대조염색 후 붉은색으로 나타난다. 2. Spreading 접종...2025.11.18
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미생물 배지 배양(PDA, TSA 배지)2025.05.111. 미생물 배양 방법 실험에서는 배양의존적인 방법으로 TSA와 PDA media를 사용하였다. TSA(Trypticase Soy Agar)는 다양한 유기체의 영양 배지가 되며, 대부분의 그람 박테리아의 성장을 지원하는 범용 비선택적 성장배지이다. PDA(Potato Dextrose Agar)는 진균의 왕성한 증식을 촉진시키는 역할을 하며, 세균 증식을 저해하기 위한 항생제를 보강할 수 있다. 배양의존적 방법은 살아있는 미생물을 평가할 수 있지만, 일부 종의 성장을 억제하고 복제 시간이 다양한 종이 효율적으로 경쟁하여 결과가 편향될...2025.05.11
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미생물 동정 3 - SIM test, Catalase test, 내염성 test - 예비레포트2025.01.241. SIM test SIM test는 미생물의 황화수소 생성, 인돌 생성, 운동성 등을 확인하는 실험입니다. 황화수소 생성은 배지에 황이 포함되어 있을 때 미생물이 이를 환원하여 황화수소를 생성하는 것을 확인합니다. 인돌 생성은 트립토판을 기질로 하여 미생물이 인돌을 생성하는지 확인합니다. 운동성은 반고체 배지에서 미생물의 운동성을 확인합니다. 2. Catalase test Catalase test는 미생물이 과산화수소를 분해할 수 있는지 확인하는 실험입니다. 과산화수소를 분해하면 산소가 발생하게 되므로, 이를 통해 미생물의 ca...2025.01.24
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[화공생물공학기초실험 A+예비레포트] 유산균 음료로부터 미생물 분리 평판 계수법2025.01.121. 유산균 분리 및 배양 이 실험에서는 유산균 음료에서 유산균을 분리하고 평판 계수법을 이용하여 유산균의 수를 측정하였습니다. 유산균은 젖산발효를 통해 유기물을 분해하는 미생물로, 식품 및 의약품 제조에 널리 이용되고 있습니다. 실험에서는 BCP 배지와 MRS 배지를 사용하여 유산균을 선택적으로 배양하고 정량하였습니다. 또한 무균 조작법, 멸균 기법, 미생물 계수법 등의 기본적인 미생물학 실험 기술을 익힐 수 있었습니다. 2. 미생물 생장 곡선 미생물의 생장 곡선은 크게 4단계로 나뉩니다. 첫 번째는 유도기로, 새로운 배지에 접종...2025.01.12
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미생물학 실습 평판계수법과 catalase test 레포트2025.01.031. 평판계수법 평판계수법 실험에서 학생들이 진행한 실험의 결과에 문제가 생겨서 결과확인이 미뤄졌다. 따라서 평판계수법 실험에 문제가 있었던 것을 알 수 있다. 그 원인을 생각해보면, 처음에 agar가 다 마르지 않은 배지를 사용하여 실험을 진행했다. 평판계수법을 통해 구한 E.coli 개수를 구하여 CFU/ml 단위를 기록하였다. 2. catalase test catalase test에서는 S.aureus와 E.coli를 도말한 슬라이드 글라스 둘 다 거품이 생성된 조가 있는 반면에 S.aureus만 거품이 생성된 조가 있었다. ...2025.01.03
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[유전학] 세포배양 방법 및 과정 분석2025.05.031. 세포 배양 세포 배양은 일반적인 자연환경과는 다른 통제된 조건에서 세포가 성장하는 과정을 총칭한다. 세포가 살아있는 조직에서 분리가 된다면 생존할 가능성이 낮아지기 때문에 신중하게 제어된 조건을 유지해줄 필요가 있다. 이 조건은 세포의 유형에 따라 다르지만 일반적으로 아미노산, 탄수화물, 비타민, 무기질 등의 필수 영양소와 호르몬, 항생제 등이 필요하고 이를 적절하게 공급하기 위한 배지가 있는 적절한 용기로 구성 되어야한다. 2. 세포 배양 방법 세포 배양을 하기 위해서는 배양할 세포를 얻어와야 하는데 그 방법에는 크게 두가지...2025.05.03
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2022년 1학기 서울대 생물학실험 모듈 3 실험보고서2025.01.231. 형질전환 본 실험에서는 재조합된 플라스미드로 대장균을 형질전환하고, PCR과 전기 영동을 통해 형질전환의 결과를 DNA 수준에서 확인하고자 하였다. 여러 종의 플라스미드를 대장균에 도입해 형질전환을 유도했으며, colony PCR을 통해 도입된 플라스미드를 대량으로 복제한 후 확인했다. 2. PCR PCR은 DNA 중합 효소와 프라이머를 이용해 DNA의 특정 부분을 대량으로, 인공 환경에서 복제하는 기술이다. PCR을 통해 실험에서 활용되는 DNA를 대량으로 복제해 사용할 수 있으므로 PCR 기술은 유전 공학에서 매우 중요하다...2025.01.23
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그람염색법을 통한 세균의 관찰 추가 탐구보고서2025.01.291. 그람염색법 그람염색법은 세균을 관찰하는 대표적인 방법으로, 항산성 세균과 비항산성 세균을 구분할 수 있다. 항산성 세균은 붉은색으로, 비항산성 세균은 청색으로 염색된다. 이 방법은 병원성이 낮은 균주를 사용하여 안전하게 실험할 수 있으며, 결핵균과 같은 고위험 균주를 다룰 때는 주의가 필요하다. 2. 미생물 배양법 미생물 배양법에는 고체 배양법, 액체 배양법, 기체 배양법이 있다. 고체 배양법은 미생물의 성장과 분리가 용이하고, 액체 배양법은 대량 생산이 가능하며, 기체 배양법은 공기 중 미생물을 분리할 수 있다. 각 방법의 ...2025.01.29
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