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[미생물공학실험]미생물 배양 배지 제작 및 세균배양2025.01.231. 미생물 배양 미생물을 인공적으로 증식시키는 것을 배양이라고 한다. 진균, 세균, 랩토스피라 등은 무세포 배지에서 배양되지만 리케치아, 바이러스는 무세포 배지에서는 증식되지 않으므로 살아 있는 세포를 필요로 한다. 세균을 배양할 때에는 균종에 따라 각각 최적조건의 배지 선택이 중요하다. 2. 배지 분류 배지란 적당한 영양성분을 혼합해서 무균상태의 액체 또는 고체로 만든 인공적인 증식환경을 말한다. 배지는 물리적 상태에 따라 액체, 고형, 반고형 배지로 분류되며, 배지 사용 목적에 따라 증식용 배지, 증균 배지, 분리 배지, 성상...2025.01.23
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미생물 분류학 실험보고서: 16S rRNA를 이용한 미생물 동정2025.11.151. 미생물의 순수배양 및 분리 방법 미생물 순수배양은 한천배지에서 단일 종만 존재하는 상태에서 배양하는 과정입니다. 도말평판법은 백금으로 균을 찍어 평판배지 위에서 지그재그로 연속 도말하여 균의 수를 점진적으로 감소시키는 방법이고, 주입평판법은 희석한 시료를 45℃의 한천배지와 섞어 배양하는 방법입니다. 표면도말법은 희석된 시료를 한천배지에 도말하여 집락을 측정하는 방법으로, 액체배지에서는 희석법을 사용하여 연속적으로 희석된 배지에 접종합니다. 2. 중합효소연쇄반응(PCR)과 16S rRNA 분석 PCR은 특정 표적 유전물질을 증...2025.11.15
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세포 배양 시 배지 교체 방법2025.01.081. 세포 배양 세포 배양은 생명체를 구성하는 조직으로부터 세포를 분리한 후 체외(in vitro) 환경에서 배양하는 것을 의미한다. 세포를 지속해서 배양하기 위해서는 세포를 떼어내어 세포 현탁액으로 만들고, 희석하여 새로운 배양용기에 plating하게 되는데 이를 계대배양(subculture)이라고 한다. 세포 배양에서 media 교체는 세포의 생존에 중요한 영향을 미치는데, 이는 media에 영양소가 풍부하게 들어있어 세포 증식에 필수적이며, 동시에 세포의 대사 활동으로 인해 발생한 노폐물이 배출되어야 하기 때문이다. 2. PB...2025.01.08
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박테리아 세포로부터 플라스미드 정제 결과2025.11.131. 플라스미드 정제 박테리아 세포로부터 플라스미드를 분리하고 정제하는 과정입니다. 플라스미드는 박테리아에서 염색체 외에 존재하는 작은 원형 DNA 분자로, 유전자 공학 및 생명공학 연구에서 중요한 도구로 사용됩니다. 정제 과정에는 세포 용해, 단백질 제거, DNA 추출 및 정제 단계가 포함되며, 최종적으로 순수한 플라스미드 DNA를 얻을 수 있습니다. 2. 박테리아 세포 배양 플라스미드 정제를 위해 박테리아 세포를 배양하는 단계입니다. 박테리아는 플라스미드를 포함하고 있으며, 충분한 양의 플라스미드를 얻기 위해 적절한 배양 조건에...2025.11.13
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Colony PCR 실험 결과 및 분석 보고서2025.11.141. Colony PCR 원리 및 방법 Colony PCR은 DNA 추출이나 플라스미드 정제 없이 세균 colony에서 직접 원하는 insert를 포함하는 플라스미드를 선별하는 방법이다. 미생물 colony를 template로 사용하여 비용 절감과 시간 단축의 장점이 있으나, 목적 DNA의 돌연변이를 탐지할 수 없어 거짓 양성 결과 확률이 높다는 단점이 있다. 2. PCR 실험 오차 원인 및 개선 방안 실험 오차는 클린 벤치 미사용으로 인한 오염, 이쑤시개 재사용으로 인한 colony 오염, 피펫팅 과정의 거품 발생으로 인한 DNA...2025.11.14
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재조합 DNA 구성 및 대장균에서의 GFP 발현2025.11.121. 재조합 DNA 구성 재조합 DNA는 서로 다른 출처의 DNA 단편을 결합하여 새로운 DNA 분자를 만드는 기술입니다. 제한효소를 이용하여 DNA를 절단하고 DNA 리가제로 연결하는 과정을 통해 목적하는 유전자를 벡터에 삽입합니다. 이 기술은 유전공학의 기초가 되며 단백질 생산, 유전자 치료 등 다양한 분야에 응용됩니다. 2. GFP 형질전환 GFP(Green Fluorescent Protein)는 녹색 형광 단백질로, 자외선 또는 청색광에 노출되면 녹색 형광을 발합니다. GFP 유전자를 대장균에 형질전환하면 형광 단백질을 생산...2025.11.12
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박테리아에서의 DNA 분리2025.01.231. Plasmid DNA 분리 이 실험에서는 박테리아에서 Plasmid DNA를 분리하는 과정을 이해하는 것이 목적입니다. Plasmid DNA는 박테리아의 염색체 DNA와는 별도로 존재하는 작은 원형 DNA 분자입니다. Plasmid DNA 분리법을 사용하여 박테리아 DNA를 분리하는 단계별 과정을 수행하였습니다. 2. 박테리아 배양 실험 방법에 따르면 ampicillin이 포함된 LB 배지에 박테리아 colony 1개를 넣고 37°C에서 12~16시간 동안 배양하였습니다. 이를 통해 박테리아를 증식시켜 DNA 추출을 위한 충분...2025.01.23
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멸균 시 미생물이 죽으면서 오랜 시간이 지나면 성장 배지가 자랄 수 없는 것을 보여주는 영문레포트2025.05.121. 멸균 멸균은 실험에 사용되는 배지와 기구를 미생물로부터 완전히 제거하는 과정이다. 미생물이 죽으면 배지에서 더 이상 자랄 수 없게 된다. 2. 배지 배지는 미생물을 배양하기 위해 필요한 영양분과 성분들로 구성된다. 고체 배지와 액체 배지로 나뉘며, 다양한 종류의 배지가 사용된다. 3. 멸균 방법 멸균 방법에는 열 멸균, 화학 멸균, 방사선 멸균 등이 있다. 각 방법마다 장단점이 있으며, 실험 목적과 대상에 따라 적절한 방법을 선택해야 한다. 4. 무균 기술 무균 기술은 실험 과정에서 미생물 오염을 방지하기 위한 기술이다. 실험...2025.05.12
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반응능 세포(Competent Cell) 제조 실험2025.11.171. 유전자 재조합 기술 특정 유전자가 클로닝된 재조합 플라스미드 DNA를 세포 내에 도입하여 특정 유전자를 다량 확보하거나 발현시켜 원래의 생명체가 만들지 않는 특정 단백질을 생산하는 기법입니다. 표적 DNA를 공여 세포로부터 분리한 후 제한효소로 절단하고, 벡터 DNA와 연결하여 재조합 DNA를 만든 후 숙주세포에 도입하여 형질전환시키는 과정으로 진행됩니다. 2. 반응능 세포(Competent Cell) 유전자 도입에 사용되는 숙주세포로, 외부의 DNA를 받아들일 수 있도록 인위적으로 만들어진 세포입니다. 대장균이 가장 널리 사...2025.11.17
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비생장속도의 측정2025.01.151. 미생물 비성장속도 측정 이 실험은 광전비색계를 사용하여 액체 배양 중 미생물의 균체 양을 측정하는 방법을 다룹니다. 또한 흡광도를 이용하여 기질 농도를 계산하고 Monod 식을 적용하여 비성장속도를 구하는 것이 목적입니다. Lambert-Beer 법칙에 따르면 배양액의 흡광도는 균체 농도에 비례하므로, 이를 이용하여 균체 수나 양을 구할 수 있습니다. Monod 식은 제한된 영양분 농도와 미생물 성장 간의 관계를 나타내는 수학적 모델로, 비성장속도와 기질 농도 간의 관계를 설명합니다. 1. 미생물 비성장속도 측정 미생물의 비성...2025.01.15
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