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단백질 분석(SDS-PAGE & Fluorescence)2025.05.141. SDS-PAGE SDS-PAGE는 Sodium dodecyl sulfate - polyacrylamide gel eletrophoresis의 약자로, 5~250 kDa 사이의 단백질을 분리할 때 사용되는 방법입니다. SDS는 단백질에 결합하여 전하의 영향을 배제하고 크기에 의해 이동속도가 결정되도록 합니다. 또한 DTT와 같은 reducing agent는 단백질의 disulfide bond를 변성시켜 linear한 1차 구조로 만듭니다. SDS-PAGE 후 단백질을 확인하기 위해 Coomassie Briliant Blue, s...2025.05.14
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박테리아 세포로부터 플라스미드 정제하기 - 분자생물학 실험 예비보고서2025.01.041. 플라스미드 정제 이 실험에서는 박테리아 세포로부터 플라스미드를 정제하는 과정이 설명되어 있습니다. 플라스미드는 박테리아 세포 내에 존재하는 작은 원형 DNA 분자로, 유전자 조작 실험에 많이 사용됩니다. 이 실험에서는 플라스미드를 추출하고 정제하는 단계별 과정이 자세히 기술되어 있습니다. 2. 분자생물학 실험 이 자료는 분자생물학 실험의 일환으로 진행된 것으로, 유전자 조작 및 분석을 위한 기본적인 실험 기법들이 소개되어 있습니다. 플라스미드 정제 외에도 전기영동, 제한효소 처리 등 다양한 분자생물학 실험 기법들이 포함되어 있...2025.01.04
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생명공학실험 genomic dna preparationc 예비레포트2025.05.031. DNA (Deoxyribonucleic Acid) DNA는 자연계에 존재하는 2종류의 핵산 중 디옥시리보오스를 함유한 것의 총칭을 말하며, 디옥시리보핵산(Deoxyribonucleic Acid)의 약칭이다. DNA는 뉴클레오타이드의 중합체인 2개의 긴 가닥이 서로 꼬여 있는 이중나선구조로 고분자 화합물이다. DNA의 기본 단위는 뉴클레오타이드이며, 뉴클레오타이드는 염기, 당, 인산으로 구성된다. 2. DNA preparation 종류 DNA에는 Genomic DNA, Plasmid DNA, Phage DNA, cDNA (com...2025.05.03
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생명과학실험1 Immunoprecipitation (IP)2025.01.171. Immunoprecipitation (면역침강법, IP) 면역침강법은 항원-항체 반응을 이용하여 원하는 단백질을 분리하고자 하는 실험이다. 단백질은 특정한 항체에만 결합하는 항체 특이성을 가지고 있으므로, 검출하고자 하는 target protein도 특정한 종류의 항체와만 결합하게 된다. 항원-항체 복합체가 바닥에 가라앉도록 하기 위해서 먼저 항체와 Bead를 붙이고, bead와 결합한 항체가 다시 단백질과 결합하여 단백질-항체-Bead 복합체를 형성하게 된다. 이 복합체가 원심분리를 통해 침강하게 되면서 원하는 단백질을 분리...2025.01.17
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생화학 실험 보고서 - 단백질 분리2025.01.271. 단백질 분리 이번 실험에서는 MCF-7 세포를 이용하여 동물 세포에서의 단백질 분리 과정을 이해하고 단백질 분석 및 연구를 위한 준비를 하였습니다. 단백질 분리를 위해서는 세포를 깨뜨리고 안정적인 버퍼 환경을 만드는 것이 중요합니다. 다양한 방법으로 세포를 파괴할 수 있으며, 이번 실험에서는 scraper를 사용하여 MCF-7 세포를 깨뜨리고 RIPA 버퍼와 protease 억제제를 첨가하여 단백질을 추출하였습니다. 최종적으로 원심분리를 통해 상층액에 분리된 단백질을 -80°C에 보관하였습니다. 1. 단백질 분리 단백질 분리는...2025.01.27
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플라스미드 DNA의 분리 및 정제 방법2025.01.041. 플라스미드 DNA 분리 플라스미드 DNA는 세균 세포에서 분리할 수 있으며, 일반적인 total cell DNA 분리 방법과 유사하다. 세포를 배양하여 수확하고 세포 추출물을 만든 후, 단백질을 제거하고 에탄올 침전으로 DNA를 농축할 수 있다. 그러나 플라스미드 DNA 분리에는 세균 염색체 DNA와의 분리가 중요한 차이점이다. 플라스미드는 세균 염색체에 비해 크기가 작고 구조적 차이가 있어 이를 이용하여 분리할 수 있다. 2. 플라스미드 미니프레프 방법 플라스미드 DNA를 소량으로 분리하는 대표적인 방법으로는 알칼리 용해법,...2025.01.04
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양이온 교환 크로마토그래피 (결과+ 예비)레포트2025.01.031. 양이온 교환 크로마토그래피 양이온 교환 크로마토그래피는 음이온이 달려있는 고정상과 양이온화된 시료 간의 정전기적 인력을 이용하여 양이온화된 시료를 분리해내는 방법입니다. 시료의 pH가 등전점보다 낮은 경우 양의 알짜전하가 강해 양이온 교환 크로마토그래피로 분리하기에 유리합니다. 양이온화가 덜 된 시료일수록 빨리 빠져나오고, 양이온화가 많이 될수록 늦게 빠져나옵니다. 양이온 교환 크로마토그래피는 암 치료, 단백질 정제, 도핑 테스트, 섬유 및 제약 산업 등 다양한 분야에서 활용되고 있습니다. 2. 이온 교환 크로마토그래피 이온 ...2025.01.03
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박테리아에서 DNA 분리2025.01.271. plasmid DNA 분리 실험 목적은 plasmid DNA 분리에 대해 이해하고, 그 과정 중 하나인 plasmid mini-preparation에 대해 알아보는 것이다. plasmid DNA 분리법의 공통적인 세 단계는 overnight culture, mini preparation, 순수한 plasmid DNA 분리 과정이다. mini-prep은 plasmid DNA를 소량 분리하는 방법으로, 알칼리 조건에서 세포를 파괴시켜 DNA만을 분리하는 것이다. 2. plasmid DNA 분리 시약 실험에 사용된 시약은 LB 배지...2025.01.27
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Plasmid DNA 분리 예비레포트2025.04.261. 플라스미드 DNA 플라스미드는 생장에 필수적인 염색체이며 DNA에서 물리적으로 분리 돼 있는 대표적인 에피솜 DNA분자입니다. 플라스미드는 유전자 클로닝, 유전자 전달, 외래 유전자 또는 재조합 유전자 발현, 유용 단백질 생산, 백신 상산 등으로 활용될 수 있습니다. 플라스미드 DNA는 염색체 DNA와 달리 작은 환형 DNA이기 때문에 변성 후 회복이 상대적으로 빨리 이루어집니다. 이를 이용하여 플라스미드 DNA를 분리하고 정제할 수 있습니다. 2. 플라스미드 DNA 분리 원리 플라스미드 DNA 분리의 핵심 원리는 변성된 DN...2025.04.26
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박테리아 세포로부터 플라스미드 정제2025.11.131. 플라스미드 정제 박테리아 세포로부터 플라스미드를 분리하고 정제하는 과정으로, 세포 용해, 단백질 제거, DNA 침전 등의 단계를 포함합니다. 플라스미드는 박테리아에서 자연적으로 발견되는 작은 원형 DNA 분자로, 유전자 공학 및 생명공학 연구에 광범위하게 사용됩니다. 2. 박테리아 세포 배양 플라스미드 정제를 위한 전제 조건으로, 플라스미드를 함유한 박테리아 세포를 배양하여 충분한 양의 세포를 확보하는 과정입니다. 일반적으로 LB 배지에서 배양되며, 항생제 선택 마커를 사용하여 플라스미드 보유 세포만을 선별합니다. 3. DNA...2025.11.13
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