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PCR과 전기영동을 이용한 DNA 증폭 및 분석2025.11.141. 중합효소연쇄반응(PCR) PCR은 특정 표적 유전물질을 증폭하는 검사법으로, 소량의 DNA로부터 염기 순서가 동일한 유전물질을 대량으로 증폭할 수 있다. 열변성(94℃), 결합(62℃), 신장(72℃)의 3단계를 반복하며, 각 사이클마다 DNA가 2배로 증폭되어 n회 반복 시 2의 n승배 증폭이 가능하다. 인간의 DNA 증폭을 통한 유전질환 진단, 세균·바이러스·진균의 감염성 질환 진단 등에 활용된다. 2. DNA 구조 및 복제 DNA는 두 뉴클레오타이드 선형 중합체가 반대 방향으로 이중나선 구조를 형성하며, 염기는 나선 내부...2025.11.14
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DNA 기술을 이용한 형질전환 및 PCR 실험2025.11.171. DNA 클로닝 및 형질전환(Transformation) DNA 클로닝은 DNA를 재조합하고 숙주 안에서 복제하는 과정이다. 대장균 형질전환을 위해 competent cell을 준비하고 플라스미드를 도입한 후 열충격(heat shock)을 가한다. X-gal/IPTG가 포함된 고체배지에서 배양하면 형질전환된 세포는 흰색 colony를, 형질전환되지 않은 세포는 파란색 colony를 형성한다. 이는 LacZ 유전자의 발현 여부에 따른 결과로, 외부 DNA가 삽입되면 LacZ 발현이 억제되어 β-galactosidase가 생성되지 ...2025.11.17
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겔 전기영동 (agarose gel electrophoresis) 실험 리포트2025.01.141. Agarose gel electrophoresis Agarose gel electrophoresis은 크기에 따라 핵산(DNA 또는 RNA) 조각을 분리하는 데 사용되는 전기영동 종류이다. 음전하를 띤 DNA/RNA는 전류가 가해질 때 agarose gel의 기공을 통해 gel의 양전하 말단으로 이동하고 이때 더 작은 조각이 더 빠르게 이동한다. 결과 밴드는 자외선(UV)을 사용하여 시각화할 수 있다. 2. Taq polymerase Taq polymerase는 호열성 박테리아인 Thermus aquaticus에서 추출한 열 ...2025.01.14
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PCR과 제한효소 절단 분석 결과2025.11.131. PCR (중합효소 연쇄반응) PCR은 DNA 샘플을 선택적으로 증폭하는 분자생물학 기법입니다. 열변성, 프라이머 결합, DNA 중합효소에 의한 신장 단계를 반복하여 특정 DNA 영역을 기하급수적으로 증폭합니다. 이 과정은 유전자 진단, 법의학, 질병 검출 등 다양한 분야에서 필수적인 도구로 사용되며, 정확한 온도 제어와 사이클 수 조절이 중요합니다. 2. 제한효소 절단 (Restriction Enzyme Digestion) 제한효소는 특정 DNA 서열을 인식하여 절단하는 단백질입니다. 제한효소 절단은 PCR 산물을 분석하기 위...2025.11.13
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분자생물학 실험 (A+)Agarose gel eelectrophoresis 결과보고서2025.01.041. Agarose gel electrophoresis Agarose gel electrophoresis는 DNA 분자를 분리하고 분석하는 기술입니다. 이 실험에서는 DNA 샘플을 아가로스 겔에 로딩하고 전기장을 가해 DNA 조각들을 크기에 따라 분리합니다. 이를 통해 DNA 조각의 크기와 양을 확인할 수 있습니다. 이 기술은 유전자 클로닝, DNA 서열 분석, 유전자 발현 분석 등 다양한 분자생물학 실험에 사용됩니다. 2. DNA 분리 및 분석 이 실험에서는 DNA 샘플을 아가로스 겔에 로딩하고 전기장을 가해 DNA 조각들을 크기...2025.01.04
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인천대학교 나노바이오실험(1) A 자료) 4. Plasmid perp & Gel Electrophoresis2025.01.041. Plasmid DNA 플라스미드 DNA는 세균의 세포 내에 염색체와는 별개로 존재하면서 독자적으로 증식할 수 있는 DNA이다. 유전공학에서는 세균 내 플라스미드를 세포 밖으로 빼내고 제한효소로 끊은 뒤, 필요로 하는 유전자를 삽입하여 이를 다시 세균에 넣어 배양하는 유전자재조합 기술을 사용한다. 2. Plasmid DNA 추출 방법 플라스미드 DNA를 추출하는 방법에는 크기 차이를 이용한 방법과 구조 차이를 이용한 알칼리 용해 방법(Alkaline Lysis method)이 있다. 알칼리 용해 방법은 높은 pH의 알칼리성 용액...2025.01.04
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SDS PAGE 실험보고서2025.05.041. SDS PAGE SDS PAGE란 Sodium Dodecyl Sulphate -Polyacrylamide Gel Electrophoresis의 줄임말로써, PAGE는 전기영동법을 지칭하는 말로서 사용되기도 하고, 때로는 겔 자체를 지칭하기도 한다. 이를 사용한 전기 영동법 역시 기본적 원리는 한천을 이용한 것과 같다. 허나 폴리아크릴아마이드 겔은 한천 겔에 비해 훨씬 촘촘한 다공성 물질이기 때문에 한천을 이용할 때에 비해 분자량이 작고 크기 차이가 작은 시료들을 분리할 때 이용한다. 따라서 또다른 고분자 물질이지만 핵산에 비해...2025.05.04
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전기 영동을 통한 DNA 분리 실험2025.05.011. 전기 영동 전기 영동은 물질을 분리하는 실험 방법의 한 종류로, 전기장을 걸어준 환경에서 물질들의 이동한 거리의 차이를 이용하여 물질을 구분하는 것이다. 전기 영동의 종류에는 Zone 전기 영동, 등전점 전기 영동, 겔 전기 영동 등이 있다. 겔 전기 영동은 전류를 흘려주어 전하를 띤 분자가 겔 내부에서 이동하여 분리되도록 하는 기법이다. 2. Agarose gel Agarose gel은 agarose 분자가 교차되어 있는 형태로, 3차원적인 그물 구조를 띤다. Agarose gel 내부에는 분자가 통과할 수 있는 구멍이 있어...2025.05.01
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SDS-PAGE를 통한 단백질 분리 실험2025.01.031. SDS-PAGE SDS-PAGE는 단백질을 분자량에 따라 분리하는 기법으로, 단백질을 SDS로 변성시켜 모든 단백질이 유사한 전하/분자량 비를 가지도록 만든 후 전기영동을 통해 분리한다. 이 실험에서는 SDS-PAGE의 원리와 사용되는 시약들의 특성을 이해하고, 실제로 단백질 분리 실험을 진행하여 결과를 분석하였다. 2. 단백질 변성 SDS는 단백질의 3차원 구조를 풀어 선형 구조로 만들어 주며, 단백질에 음전하를 부여한다. 이를 통해 단백질의 고유 전하와 상관없이 분자량에 따라 분리할 수 있게 된다. 실험에서는 단백질 시료를...2025.01.03
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Agarose gel 제작 및 DNA 전기영동 실험2025.11.181. DNA 전기영동(Electrophoresis) DNA 전기영동은 DNA가 음전하를 띠고 전기장에서 양극으로 이동하는 원리를 이용한 분석 기법이다. Agarose gel 매질에서 DNA는 크기에 따라 다른 속도로 이동하여 분리된다. TAE buffer를 사용하며, Tris는 양이온을 공급하고 Acetate는 pH를 조절하며 EDTA는 DNase를 억제한다. DNA의 이동속도는 크기, 형태, gel 농도, 전압, buffer 성분에 영향을 받는다. 2. Agarose gel 제작 1% Agarose gel은 1X TAE 용액 35...2025.11.18
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