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제한효소 처리 DNA 전기영동 보고서2025.05.051. 제한효소 제한효소는 세균이 가지고 있는 DNA를 자르는 효소이다. 외부 바이러스의 DNA를 절단하여 자기를 보호하기 위한 수단으로 사용된다. 제한효소는 그 종류마다 4개 또는 6개의 염기서열을 인식하여 DNA를 절단하며, 이러한 특징 때문에 DNA 클로닝 등에 사용되고 있다. 2. 전기영동 전기영동은 전기장의 영향으로 전하를 띄는 물질이 유동성 매체에서 이동하는 원리를 이용한 기술이다. DNA는 음의 전하를 띄고 있기 때문에 전기를 걸어주면 양전하 쪽으로 이동하게 된다. DNA 가닥의 길이에 따라 이동 속도가 달라지므로, 이를...2025.05.05
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Plasmid DNA의 제한효소 절단 및 전기영동2025.01.221. 플라스미드 DNA 플라스미드는 vector의 한 종류로, 염색체와는 독립적으로 존재하는 원형의 DNA이다. 스스로 복제할 수 있고, 유전될 수 있으며 외부의 유전자를 포함해 전달될 수 있다. 2. 제한효소 제한효소는 DNA를 자를 수 있는 효소를 말하는데, DNA 분자의 특정한 염기서열에 결합해 DNA를 절단한다. 이렇게 절단된 DNA 조각은 전기영동을 통해 분리될 수 있다. 3. 전기영동 전기영동은 슬러리 내의 전하를 가진 입자들에 전기를 가하게 되면 각자 가진 전하의 반대되는 극성을 띠는 쪽으로 이동하는 현상을 말한다. 이...2025.01.22
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바이러스 RNA 추출 및 PCR 실험 보고서2025.11.141. RNA 추출 및 정제 바이러스 RNA 추출을 위해 HeLa 세포에 HRV1B를 감염시킨 후 세포를 용해하여 RNA를 분리했다. VB lysis buffer로 세포를 용해하고 AD buffer로 RNA에 염을 결합시켜 침전시킨다. VB column tube의 양전하 필터를 이용해 음전하를 띤 RNA를 분리하고, W1 buffer와 Wash buffer로 세척한 후 Nuclease-free water로 용출했다. 나노드랍을 사용하여 RNA 농도를 측정한 결과 대조군 227.8ng/ul, 실험군 195.2ng/ul로 측정되었다. 2...2025.11.14
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DNA 제한효소 실험 결과 분석2025.11.161. 제한효소(Restriction Enzyme) DNA 제한효소는 특정 염기서열을 인식하여 DNA를 절단하는 효소이다. 실험에서 사용된 EcoRI는 5'-GAATTC-3' 서열을, HindIII는 5'-AAGCTT-3' 서열을 인식하여 각각 절단한다. 이들 효소는 분자생물학 연구에서 DNA 조작의 기본 도구로 사용되며, 특정 위치에서만 DNA를 절단하는 특이성을 가진다. 2. 전기영동(Electrophoresis) 전기영동은 DNA 절편을 크기별로 분리하는 기술이다. 실험에서는 아가로스 겔을 사용하여 제한효소로 절단된 DNA 절편...2025.11.16
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연세대(미래) 13주차. DNA분리2025.05.031. DNA 구조 DNA는 인산기, deoxyribose, 4종류의 질소염기로 구성되며, 두 개의 DNA 가닥이 서로 마주보고 있는 상태에서 당-인산-당 골격이 바깥쪽에 위치하고, 두 사슬의 염기들이 수소결합에 의해 쌍을 이루고 있다. A는 항상 T와, G는 항상 C와 쌍을 이루는 상보적인 염기쌍 구조를 가진다. 2. 중심원리 중심원리에 따르면, DNA를 주형으로 하여 RNA를 복사해내는 전사 과정과, 전사된 mRNA가 세포질에서 번역되어 단백질로 전환되는 번역 과정이 있다. 원핵세포의 경우 전사와 번역이 동시에 일어날 수 있다. ...2025.05.03
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제한효소를 이용한 DNA절단 및 전기영동 실험2025.11.131. 제한효소와 DNA절단 제한효소는 특정한 염기서열을 인식하여 DNA를 절단하는 효소이다. 실험에서 사용된 EcoR1과 HindⅢ 같은 제한효소들은 각각 다른 염기서열을 인식하여 DNA를 절단한다. 절단된 DNA의 말단 모양에 따라 blunt end(직선으로 잘린 경우)와 sticky end(ㄴ방향에서 ㄱ방향으로 꺾여서 잘린 경우)로 분류된다. 2. Sticky end와 Blunt end의 특성 Sticky end는 핵산 한가닥의 염기들이 노출되어 있어 상보적인 염기와 수소결합할 준비가 되어있다. 반면 blunt end는 직선으로...2025.11.13
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일반생물학실험 REPORT_Plasmid mini-prep2025.05.101. 플라스미드 플라스미드는 세균을 비롯해 많은 생물들이 염색체 외에 추가로 갖고 있는 DNA 조각으로 크기가 상대적으로 작고 스스로 복제할 수 있는 능력이 있어 클로닝할 때 유용한 벡터로 활용되고 있다. 숙주의 성장과 생식과정에 필수적이지는 않지만 종류에 따라 항생물질 등에 대한 저항성 유전자, 접합에 관여하는 유전자, 새로운 대사를 가능하게 하는 유전자들을 가지고 있어 숙주세포에 선택적 이점을 갖게 해주기도 한다. 2. 제한 효소 제한 효소 또는 제한 내부핵산 가수분해 효소는 이중 가닥 DNA 분자의 특정한 염기서열을 인식하여 ...2025.05.10
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제한효소를 이용한 플라스미드 절단 실험2025.11.171. 제한효소(Restriction Enzyme) 제한효소는 특정 DNA 서열을 인식하여 절단하는 효소이다. 본 실험에서는 Hind III과 Xbal 두 가지 제한효소를 사용하여 플라스미드를 절단했다. 37℃에서 1시간 반응시켜 플라스미드를 특정 위치에서 절단하는 원리를 이해하고, 절단 반응에서 버퍼, 효소 농도, 반응 시간 등의 조건을 고려하는 것이 중요함을 학습했다. 2. 전기영동(Gel Electrophoresis) DNA 분자를 크기에 따라 분리하는 기법으로, 0.8X agarose gel을 사용하여 절단된 플라스미드를 분석...2025.11.17
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제한효소를 이용한 DNA 절단 및 전기영동 분석2025.11.171. 제한효소(Restriction Enzyme) 제한효소는 주로 세균이 보유한 DNA 절단 효소로, 외부 바이러스의 DNA를 절단하여 자기 보호 기능을 한다. 종류에 따라 4개 또는 6개의 염기서열을 인식하여 비점착성 또는 점착성 말단을 생성한다. 같은 효소로 절단된 부위는 동일한 끝을 가지므로, 표적DNA와 플라스미드를 같은 제한효소로 자르고 ligase로 결합시켜 재조합 DNA를 만들 수 있다. DNA 클로닝 등 분자생물학 연구에 광범위하게 사용된다. 2. 전기영동(Electrophoresis) 전기장의 영향으로 전하를 띤 물...2025.11.17
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Nester's Microbiology Chapter 13: 바이러스 복제와 감염2025.11.171. 바이러스의 구조와 소독제 저항성 비봉투 바이러스는 봉투 바이러스보다 소독제에 더 강한 저항성을 가진다. 봉투 바이러스는 지질 봉투가 소독제에 의해 손상되면 숙주 세포에 침입할 수 없게 되지만, 비봉투 바이러스는 봉투의 유무와 관계없이 감염을 일으킬 수 있기 때문이다. 캡시드는 단백질로 구성되어 있으며, 꼬리 섬유는 숙주 세포 표면의 수용체에 부착하는 역할을 한다. 2. 박테리오파지의 복제 주기 T4 파지는 용균성 주기만 반복하며 용원성 특성이 없다. 반면 람다 파지는 용원성 주기를 반복하다가 숙주 유전자 손상 등의 위험이 발생...2025.11.17
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