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분자생물학 실험 (A+) Agarose gel eelectrophoresis 예비보고서2025.01.041. Agarose gel electrophoresis Agarose gel electrophoresis는 DNA 분자를 분리하고 분석하는 데 사용되는 기술입니다. 이 기술을 사용하면 DNA 조각의 크기와 순수도를 확인할 수 있습니다. 전기영동 과정에서 DNA 분자는 음전하를 띠고 있어 양극으로 이동하게 됩니다. 이때 작은 DNA 조각은 빨리 이동하고 큰 DNA 조각은 느리게 이동하게 됩니다. 이를 통해 DNA 조각의 크기를 확인할 수 있습니다. 2. DNA 분리 및 분석 DNA 분리 및 분석은 분자생물학 실험에서 매우 중요한 과정...2025.01.04
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제한효소 절단 및 아가로스 젤 전기영동 실험2025.11.181. 제한효소(Restriction Enzyme) 제한효소는 박테리아와 고세균에서 발견되는 효소로, 외부 DNA를 인식하고 분해하는 보호 메커니즘이다. 각 제한효소는 4~6개의 염기쌍으로 이루어진 특정 서열만 인식하여 절단한다. 예를 들어 EcoR I은 특정 서열에서만 DNA를 절단한다. 제한효소 반응은 적절한 반응조건(염 농도, pH, 온도 등)에서 DNA와 효소를 배양하여 수행되며, 1 Unit는 지정된 완충액과 온도에서 1시간 동안 λ DNA 1㎍을 완전히 분해하는 양을 의미한다. 2. 아가로스 젤 전기영동(Agarose Ge...2025.11.18
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RNA 분리 및 cDNA 합성, 실시간 PCR을 이용한 개화시기 측정2025.11.121. RNA 분리 (RNA Isolation) 생명과학 실험에서 세포나 조직으로부터 RNA를 추출하는 기본적인 분자생물학 기법입니다. 이 과정은 세포를 용해시키고 단백질과 DNA를 제거하여 순수한 RNA를 얻는 것을 목표로 합니다. 추출된 RNA는 이후 역전사 반응이나 유전자 발현 분석 등 다양한 실험의 기초 재료로 사용됩니다. 2. cDNA 합성 (cDNA Construction) mRNA를 주형으로 하여 역전사효소(reverse transcriptase)를 이용해 상보적 DNA(complementary DNA)를 합성하는 과정입...2025.11.12
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10_PAGE를 이용한 단백질 검정 보고서2025.01.181. 단백질의 구조와 기능 단백질은 수백에서 수만 개의 아미노산으로 이루어진 중합체이다. 아미노산은 아미노기와 카복실기를 가지고 있는 단량체로, 곁사슬의 성질에 따라 소수성, 친수성, 염기성, 산성 등으로 구분된다. 단백질은 1차, 2차, 3차, 4차 구조를 가지며, 이러한 구조에 따라 다양한 기능을 수행한다. 단백질은 효소, 구조 단백질, 운동 단백질, 신호 단백질, 수용체 단백질, 수송 단백질, 방어 단백질, 저장 단백질 등 다양한 종류가 있다. 2. 단백질 합성 과정 단백질 합성은 mRNA, 리보솜, tRNA를 이용하여 이루어...2025.01.18
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HEK293T 세포 계대배양 및 핵산 추출 실험2025.11.171. HEK293T 세포 계대배양 HEK293T 세포는 SV40 T 항원을 발현하는 형질전환 세포로, 높은 단백질 발현을 유도한다. 계대배양은 trypsin-EDTA를 이용하여 세포를 배양용기에서 분리하고, centrifuge로 세포를 수집한 후 새로운 배지에 옮기는 과정이다. 세포는 부착단백질과 결합할 때 길게 늘어난 형태를 보이다가, trypsin 처리 후 구형으로 변한다. 8일간의 배양 관찰 결과 시간이 지날수록 배지에 세포가 증식하여 빈 공간이 감소하는 것을 확인할 수 있다. 2. Genomic DNA 추출 Genomic D...2025.11.17
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플라스미드 DNA 정제 실험 예비레포트2025.11.171. 플라스미드 DNA 정제 박테리아 세포로부터 플라스미드 DNA를 정제하는 것은 유전자 재조합 실험의 기본 과정이다. 플라스미드 DNA는 세균의 유전체 DNA에 비해 매우 작고, 유전체 DNA는 선형이 되는 반면 플라스미드 DNA는 원형의 CCC(공유결합 닫힌 원형) 구조를 가진다는 차이점을 이용하여 정제한다. 1979년 번보임과 돌리 등이 개발한 알칼리 세포용해법이 현재 널리 사용되고 있다. 2. 알칼리 세포용해법 알칼리 세포용해법은 3단계로 구분된다. 첫째, 대장균 세포를 완충액에서 안정화시킨다. 둘째, 알칼리와 SDS 용액을...2025.11.17
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유기물의 성질과 분리를 통한 일반화학실험2025.01.031. 유기물의 용해도 많은 유기물들은 분자 내에 작용기를 가지고 있어 수용액의 특성에 따라 물에 대한 용해도가 달라질 수 있습니다. 벤조산은 중성이나 산성 수용액에서는 난용성이지만 염기성 수용액에서는 카복실산이 중화되어 카복실산 음이온으로 전환되어 극성이 커지므로 물에 잘 녹습니다. 2. 유기물 혼합물의 분리 벤조산과 아세트아닐라이드의 혼합물을 각각 산성과 염기성으로 분리할 수 있습니다. 혼합물을 염기 수용액으로 처리하면 벤조산은 해리되면서 녹고, 해리되지 않은 불용성 아세트아닐라이드는 수용액 중에 고체로 남게 됩니다. 혼합물을 여...2025.01.03
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Agarose gel electrophoresis2025.05.141. Gel electrophoresis의 원리 Gel electrophoresis는 전기 영동으로, 단백질, 핵산과 같이 전하를 가진 물질이 전기장 존재 환경에서 반대쪽 극을 향해 움직이는 성질을 이용해서 물질을 분리한다. 분자의 이동속도에 영향을 주는 요인은 입자 요인(전하량, 크기, 모양)과 환경 요인(pH, 점성도, 이온 농도, 이온 세기, gel 종류)이 있다. 전기 이동도(μ)를 통해 입자의 이동속도를 이해할 수 있으며, gel의 농도가 높아질수록 미세한 구멍의 크기가 작아져 분자의 이동 속도가 느려진다. 2. Agaro...2025.05.14
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[A+레포트] DNA 제한효소 예비레포트2025.01.221. 제한효소 제한효소는 생물이 자기 세포에 다른 종류의 DNA가 들어오면 이를 파괴하는 기능을 가진 효소이다. 유전공학에서는 재조합 DNA를 만들기 위해 사용되는 특수한 효소로 알려져 있다. 제한효소에는 크게 3종류가 있으며, 모두 특정한 DNA 염기 배열을 인식한다. 유전공학에서 잘 사용되는 것은 II형 제한효소이며, 절단부위가 인식부위의 가운데 위치하는 것이 특징이다. 2. 아가로스 겔 전기영동 전기영동은 DNA와 같은 전하를 띠는 물질들을 전기적으로 일정한 방향으로 이동시켜 분리하는 기술이다. DNA는 인산기에서 H+를 방출...2025.01.22
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전기영동을 이용한 단백질의 관찰(생화학실험)2025.01.161. 전기영동 전기영동은 전극 사이의 전기장 하에서 용액 속의 전하가 반대 전하의 전극을 향하여 이동하는 화학현상이다. 겔 전기영동법은 전기영동 현상을 단백질 분석에 응용한 초기 형태로, 단백질 크기에 따라 분리가 가능하다. 전기영동 실험에서는 SDS 처리를 통해 단백질의 전하를 균일하게 만들어 오직 크기에 따른 분리가 이루어지도록 한다. 또한 isoelectric focusing과 2D 전기영동법 등 다양한 전기영동 기법이 있다. 2. 겔 제조 겔은 acrylamide와 bisacrylamide를 혼합하여 중합 반응을 통해 만든다...2025.01.16
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