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배지제조와 균분리 실험일지2025.11.181. 배지의 정의 및 주요 성분 배지는 미생물을 생존시키고 증식시키기 위한 인공적 증식환경이다. 주요 성분으로는 펩톤(단백질 분해물), 육즙성분(쇠고기 추출물), 효모추출물, 한천(고형화제), 젤라틴 등이 있다. 펩톤은 세균대사에 필요한 탄소원과 질소원을 제공하며, 한천은 배지를 고형화시키는 중요한 성분이다. 이들 성분은 배지의 사용목적, 성분, 물리적 성상에 따라 다양하게 조합된다. 2. 배지의 분류 및 종류 배지는 성분의 성상에 따라 자연배지, 합성배지, 반합성배지로 분류되며, 물리적 성상에 따라 액체배지, 고체배지, 반고체배지...2025.11.18
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[미생물공학실험]미생물 배양 배지 제작 및 세균배양2025.01.231. 미생물 배양 미생물을 인공적으로 증식시키는 것을 배양이라고 한다. 진균, 세균, 랩토스피라 등은 무세포 배지에서 배양되지만 리케치아, 바이러스는 무세포 배지에서는 증식되지 않으므로 살아 있는 세포를 필요로 한다. 세균을 배양할 때에는 균종에 따라 각각 최적조건의 배지 선택이 중요하다. 2. 배지 분류 배지란 적당한 영양성분을 혼합해서 무균상태의 액체 또는 고체로 만든 인공적인 증식환경을 말한다. 배지는 물리적 상태에 따라 액체, 고형, 반고형 배지로 분류되며, 배지 사용 목적에 따라 증식용 배지, 증균 배지, 분리 배지, 성상...2025.01.23
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대장균 형질전환을 위한 Competent Cell 제조2025.11.141. Competent Cell 제조 낮은 온도에서 세포막 인지질의 유동성을 감소시키고, 염화칼슘으로 세포막의 음전하를 감소시켜 competent cell을 제조한다. 제조된 competent cell은 글리세롤에 현탁시켜 cell stock으로 보관된다. Competent cell은 외부 DNA 삽입이 용이하도록 화학적으로 처리된 대장균 세포로, 형질전환에 필요한 수용성 세포이다. 2. 형질전환 및 대장균 사용 이유 형질전환은 외부 DNA를 세포 내에 삽입하여 세포의 형질을 변환시키는 유전자 재조합 방법이다. 대장균을 사용하는 이...2025.11.14
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[충남대] 분자생물, 생화학 실험 보고서12025.01.281. 대장균 배양 실험에서는 대장균(Escherichia coli, E. coli.)을 이용하여 실험을 진행하였다. 대장균은 정온동물의 창자에서 많이 볼 수 있는 박테리아로 단백질 발현에 대해 가장 일반적인 숙주이다. 대장균은 실험실에서 보관과 배양이 용이하다는 장점이 있어 주로 사용하는 원핵생물 모델이며, 자가복제를 하는 DNA 고리인 Plasmid DNA를 가지고 있다. 이는 DNA vector(운반체)로써 유전자 재조합 기술의 중요한 재료이다. 2. 배지 제조 실험에서는 TB(Terrific broth) 배지를 사용하였다. T...2025.01.28
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The great plate count anomaly 실험보고서2025.11.151. The great plate count anomaly Staley와 Konopka가 제시한 용어로, agar media에 군집을 형성하는 자연 환경의 세포 수와 현미경 검사를 통해 셀 수 있는 세포의 규모 차이를 설명한다. 이는 해양 생태계에서 잘 연구된 현상으로, 배양 배지에서 자라는 미생물의 수와 실제 환경에 존재하는 미생물의 수 사이의 불일치를 나타낸다. 2. 배지의 재료에 따른 분류 천연배지는 화학조성이 확실히 알려져 있지 않은 천연물로 만들어진 배지(감자한천, 오트밀 배지, 볏짚 배지 등)이다. 합성배지는 화학조성이 ...2025.11.15
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미생물 비성장속도 측정 실험 결과 보고서2025.11.161. Lambert-Beer의 법칙 용액 내 물질 농도를 측정하는 법칙으로, 분광광도계를 사용하여 물질이 특정 파장에서 빛을 흡수하는 정도를 측정함으로써 물질의 농도를 결정한다. A = ε × c × l 식으로 표현되며, 액체 배지 내 균체 농도와 흡광도 간의 비례 관계를 이용해 균체 배양 및 양적 분석을 수행할 수 있다. 일반적으로 흡광도가 0.2~0.8일 때 균체의 양과 선형 관계를 보인다. 2. Monod 식 미생물의 성장을 설명하는 모델로, 액체 배지에서 미생물이 사용하는 기질 농도와 미생물의 성장속도 간의 관계를 표현한다....2025.11.16
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병원성 미생물 실험 보고서(황색포도상구균, 바실러스 세레우스, 리스테리아, 살모넬라)2025.01.221. 황색포도상구균 실험 결과 BPA배지와 NA배지에서 모두 콜로니가 나타났지만, 투명한 띠로 둘러싸인 광택이 있는 검정색 집락이 나타나야 하는데 그렇지 않았기 때문에 황색포도상구균이 아닌 것으로 의심된다. 2. 바실러스 세레우스 실험 결과 MYP배지와 NA배지에서 모두 콜로니가 나타났지만, 분홍색 콜로니가 나타나야 하는데 노란색 콜로니가 나타났기 때문에 바실러스 세레우스균이 아닌 바실러스의 다른 종인 것으로 의심된다. 3. 리스테리아 실험 결과 TSA배지에서 콜로니가 나타났지만 Oxoford agar 배지에서는 콜로니가 나타나지 ...2025.01.22
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표면 오염도 검사 - 일반세균수2025.05.051. 표면 오염도 검사 표면 오염도 검사는 100cm^2의 면적이 필요하며 도마, 작업대, 앞치마, 위생복 등 면적에 대한 검사 시 사용한다. 일반세균은 표준한천배지를 사용해 35~37°C에서 24±2시간 배양했을 때 배지에 집락을 형성하는 모든 세균을 총칭하며 식품 및 의약품의 제조·가공·운반·저장 등의 과정이 식품 공전 기준에 맞게 위생적이었는지를 판단할 수 있는 지표로서 사용한다. 2. 일반세균수 측정 일반세균수 측정에는 표준평판배지를 사용하는데 이는 특정 세균의 배양을 위해 특정한 영양소로 만들어진 배지가 아닌 모든 세균에게...2025.05.05
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미생물 콜로니 관찰 실험 보고서2025.11.141. 미생물 배지 실험실 조건에서 미생물을 배양하기 위해 사용되는 배지는 영양분의 종류에 따라 자연배지와 합성배지로 구분되며, 사용목적에 따라 선택배지와 분별배지로 나뉜다. 자연배지는 감자, 토마토, 우유 등 자연산물로 만들어지고, 합성배지는 여러 화합물로 구성된다. 선택배지는 특정 미생물만 배양하기 위해 그 미생물이 이용할 수 있는 영양물질을 포함하며, 분별배지는 특정 미생물을 다른 종류와 구별하기 위해 생화학적 지시약을 첨가한다. 2. 콜로니 성장 및 형태 변화 2일차와 3일차 배지를 비교하면 하루 사이에 콜로니의 형태에 큰 변...2025.11.14
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현대생물학실험2: 형질전환, PCR, 전기영동2025.11.171. 형질전환(Transformation)과 Competent Cell 형질전환은 외부 DNA가 세포 내부로 들어와 세포의 형질이 바뀌는 현상이다. Competent cell은 외부 DNA를 받아들일 수 있는 상태의 박테리아 세포로, CaCl2 처리와 열충격을 통해 인위적으로 제조된다. DH5α 대장균을 사용하여 log phase(OD600=0.4~0.6)에서 CaCl2와 glycerol로 처리하면 형질전환 효율이 10^9 CFU/μg에 도달한다. 형질전환 효율은 (CFU on plate/pg DNA) × 10^6 × (total ...2025.11.17
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