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크로마토그래피 분리 결과 보고서2025.04.261. 크로마토그래피 크로마토그래피는 물질 분리 기술로, 이동상과 고정상의 상호작용을 이용하여 혼합물을 분리한다. 본 실험에서는 크로마토그래피의 원리를 이해하고 분석 방법을 익히며, 관의 입자 간, 입자 내 공극률을 계산하여 원리를 이해하였다. Column chromatography를 이용하여 두 물질의 혼합물을 분리하고 흡착등온인자, 공극률, 용질 이동 이론을 이용하여 선택도를 계산하였다. 또한 용질의 물질전달 과정에서 무용 부피의 영향을 이해하였다. 2. 아미노산 분리 아미노산은 분자량과 구조가 유사하기 때문에 이들의 분리가 매우...2025.04.26
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CHO 세포 현탁 배양 실험 결과 보고서2025.01.041. CHO 세포 특성 이 실험의 목적은 CHO 세포의 특성을 알아보고, 직접 현탁 배양된 세포의 생존율을 Hemocytometer와 Countess II를 이용하여 측정하는 것입니다. CHO 세포는 포유류 세포주로, 생물공정 실험에 널리 사용되는 세포주입니다. 이 실험을 통해 CHO 세포의 특성과 현탁 배양 시 세포 생존율을 확인할 수 있습니다. 2. 현탁 세포 배양 실험 방법에 따르면, 먼저 CHO 세포가 배양되어 있던 플레이트의 오래된 배지를 버리고 FBS로 세척하였습니다. 그 후 세포 계수를 위해 EP tube에 옮겨 담았습...2025.01.04
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[생화학실험] (A+) Using gel filtration to study ligand-protein interactions 예비 결과레포트2025.05.031. 효소 효소는 기질과 결합해서 효소-기질 복합체를 형성하여 화학 반응의 활성화 에너지를 낮춤으로써 물질대사의 속도를 증가시키는 생체 촉매이다. 효소는 일반적으로 단독으로 또는 더 큰 복합체로 작용하는 구상 단백질이며, 아미노산의 서열은 효소의 촉매 활성을 결정하는 구조를 지정한다. 2. gel filtration chromatography Gel filtration chromatography는 size-exclusion chromatography(SEC)라고도 부르며, 단백질의 크기에 따라 분리․정제할 수 있는 분석 기법이다. ...2025.05.03
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생명과학실험1 단백질 정제 및 기능 분석을 위한 DEAE sepharose anion exchange chromatography2025.01.171. 단백질 정제 이 실험에서는 E.coli에서 추출한 alkaline phosphatase(AP) 단백질을 DEAE sepharose anion exchange chromatography를 이용하여 정제하는 과정을 다루고 있습니다. AP는 E.coli의 outer membrane과 inner membrane 사이에 존재하는 periplasmic space에 위치하며, osmotic shock을 통해 추출할 수 있습니다. 추출된 AP 단백질 혼합물은 열처리, 투석, ion exchange chromatography 등의 과정을 거쳐...2025.01.17
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BRADFORD 단백질 정량법을 이용한 온도변화에 따른 유청단백질의 농도 측정(추가실험)2025.05.121. Bradford 단백질 정량법 Bradford 단백질 정량법은 쿠마시블루와 단백질의 특정 아미노산의 결합력을 이용하여 단백질을 정량하는 방법입니다. 쿠마시블루 G-250 염색약이 산성 환경에서 단백질(염기성 및 방향족 곁 사슬을 갖는 아미노산)과 결합하면 푸른색으로 변하게 됩니다. 이 과정에서 단백질의 소수성 부위가 노출되어 염색약과 반데르발스 힘으로 비공유결합을 이루고, 양전하를 띠는 아민기와 염색약의 음전하 부위가 이온결합을 이루면서 단백질과 염색약의 결합이 더욱 강화됩니다. 2. 온도에 따른 단백질 변성 이 실험에서는 프...2025.05.12
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단백질의 검출2025.01.271. 단백질의 기능과 구조 이번 실험에서는 단백질의 기능과 구조를 이해하고, 단백질의 정성 분석법에 대해 배웠습니다. 실험을 통해 단백질의 존재 유무를 확인하였고, 뷰렛 반응과 Bradford Assay 반응의 특성을 비교하였습니다. 뷰렛 반응은 색 변화가 미미하여 관찰하기 어려웠지만, Bradford Assay 반응은 빠르고 민감도가 높아 확실한 색 변화를 관찰할 수 있었습니다. 이를 통해 단백질 검출 실험에서 Bradford Assay 반응이 더 효과적임을 알 수 있었습니다. 2. 단백질의 정성 분석법 이번 실험에서는 단백질의 ...2025.01.27
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생화학 실험/실습 보고서 (아미노산의 적정)2025.01.231. 아미노산 적정 이 실험의 목적은 미지의 아미노산 용액을 염기성 용액으로 적정하여 적정 곡선을 통해 어떤 아미노산인지 확인하는 것입니다. 실험 방법은 0.2M NaOH 용액을 제조하고 pH 미터를 보정한 후, 0.1M 미지 아미노산 용액 A 10mL에 NaOH 용액을 0.5mL씩 떨어뜨리면서 pH를 측정하여 적정 그래프를 그리고 대략적인 pKa값과 당량점, 사용한 아미노산이 Lysine, Phenylalanine, Aspartic acid 중 하나인지 확인하는 것입니다. 1. 아미노산 적정 아미노산 적정은 아미노산의 농도를 정확...2025.01.23
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식품효소학 과제 - 선행논문을 참고하여 효소관련 논문주제 찾기2025.01.291. 효소(enzyme) 효소는 소모 없이 화학반응을 촉매(촉진)하는 단백질로, 세포의 많은 소기관에 존재하며 DNA 복사, 단백질 합성, 음식물 소화, 세포 부위 재활용 등 다양한 생화학 반응에 관여한다. 효소는 식품 가공, 건강기능식품, 의약품 등 다양한 분야에서 이용되고 있다. 2. Lipase Lipase는 지방을 가수분해하여 지방산과 글리세롤을 생성하는 효소로, 식품 산업에서 유지 및 유제품 분야에 널리 이용된다. 동물, 식물, 미생물 유래 Lipase가 있으며, 미생물 Lipase가 가장 다양하게 연구되고 있다. Lipa...2025.01.29
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레닌저 생화학 정리노트 Ch03. 아미노산 펩타이드 단백질2025.05.101. 아미노산 아미노산은 아미노기와 카복실기를 포함하고 있으며 두 작용기는 a-carbon에 의하여 연결됩니다. a-carbon은 4개의 치환기(substitunents)를 가지기 때문에 사면체(tetrahedral)이며 손대칭 중심(chiral center)입니다. 아미노산은 R기의 특성에 따라 5가지 기본 그룹으로 나뉘어질 수 있습니다: 비극성 지방족, 방향족, 극성 비전하, 양전하, 음전하. 아미노산은 최소 2개의 이온화 가능한 양성자를 가지고 각각의 pKa 값을 가지며, 화학적 환경이 pKa에 영향을 줍니다. 아미노산은 낮은...2025.05.10
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SDS-PAGE를 이용한 단백질의 분석2025.01.231. SDS-PAGE SDS-PAGE는 SDS가 단백질에 일정 간격으로 결합하여 charge density를 일정하게 하고, 단백질을 변형시켜 모든 단백질이 일정 모양(선형)을 갖게 함으로써 단백질이 전기장에서 크기(분자량)에만 의존적으로 분리되게 한다. Stacking gel과 Resolving gel의 pH 차이로 인해 단백질이 크기별로 분리된다. Coomassie blue 염색을 통해 단백질 band를 확인할 수 있다. 2. 단백질 정제 실험 결과, sample2에서 Naa30 protein의 사이즈에 해당하는 protein ...2025.01.23
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