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Taq 중합효소와 Annealing temperature의 특징 및 최적화2025.11.171. Taq 중합효소의 특징 Taq 중합효소는 Thermus aquaticus에서 추출한 효소로 열 안정성이 뛰어나다. 95°C에서 40분 가열 후에도 50% 활성을 유지하며, 최적 활성 온도는 70~74°C, 최적 pH는 8.2~9.0이다. 3' → 5' exonuclease 활성이 없어 9000개 중 1개 빈도로 오류가 발생한다. 3' 말단에 아데닌을 추가하여 A overhang을 형성하므로 TA cloning이 가능하다. 이러한 특성들이 PCR의 효율성과 특이성을 높이는 데 중요한 역할을 한다. 2. Annealing temp...2025.11.17
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RT-PCR 실험 레포트: 원리, 방법 및 결과 분석2025.11.171. PCR(중합효소 연쇄반응)의 원리 및 역사 PCR은 소량의 시료로 DNA를 증폭시켜 대량의 표적 유전 정보를 얻는 방법으로, 1985년 캐리 멀리스에 의해 개발되었다. DNA의 특정 부분을 복제·증폭시키는 기법으로 변성, 결합, 신장의 3단계로 진행되며, 지정 영역의 DNA를 2ⁿ배만큼 증폭시킨다. 현재 생명과학 분야에서 필수적으로 이용되며, 코로나-19 검출 등 다양한 분야에 활용되고 있다. 2. RT-PCR의 종류 및 특징 RT-PCR은 RNA 바이러스 검출을 위해 역전사 반응을 시행하는 방법으로, 1-step RT-PCR...2025.11.17
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PCR과 아가로스 겔 전기영동 실험2025.11.171. PCR (중합효소 연쇄반응) PCR은 DNA 중합효소를 이용해 시험관 내에서 DNA 상의 특정 염기서열을 빠르게 증폭하는 기술입니다. 극히 소량의 DNA만으로도 증폭이 가능하며, denaturation, annealing, extension의 3단계가 1 cycle을 구성합니다. 이 실험에서는 35 cycle이 진행되어 이론상 2^35개의 DNA가 생성됩니다. Pre-denaturation 단계에서 template DNA를 단일가닥으로 분리하고, denaturation에서 이중가닥 DNA의 수소결합을 파괴합니다. Anneali...2025.11.17
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PCR 예비레포트: 중합효소 연쇄반응 원리와 실험2025.11.171. PCR (중합효소 연쇄반응) PCR은 세포의 복제도구를 이용해 원하는 DNA의 특정부위를 단시간에 수백만배로 증폭하는 기술입니다. 온도 cycling을 통해 프라이머가 증폭대상 DNA에 결합하고 중합된 뒤 떨어지는 과정을 반복하면서 특정 부위의 DNA를 기하급수적으로 합성합니다. 증폭에 필요한 시간은 약 2시간으로 짧고, 실험 과정이 단순하며 자동기계를 이용해 증폭시킬 수 있습니다. PCR은 극소량의 DNA나 RNA를 대량으로 증폭하여 유용한 정보를 얻을 수 있어 다양한 분야에 활용됩니다. 2. DNA 구조와 복제 DNA는 유...2025.11.17
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