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박테리아에서의 DNA 분리2025.01.231. Plasmid DNA 분리 이 실험에서는 박테리아에서 Plasmid DNA를 분리하는 과정을 이해하는 것이 목적입니다. Plasmid DNA는 박테리아의 염색체 DNA와는 별도로 존재하는 작은 원형 DNA 분자입니다. Plasmid DNA 분리법을 사용하여 박테리아 DNA를 분리하는 단계별 과정을 수행하였습니다. 2. 박테리아 배양 실험 방법에 따르면 ampicillin이 포함된 LB 배지에 박테리아 colony 1개를 넣고 37°C에서 12~16시간 동안 배양하였습니다. 이를 통해 박테리아를 증식시켜 DNA 추출을 위한 충분...2025.01.23
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[유전학] 세포배양 방법 및 과정 분석2025.05.031. 세포 배양 세포 배양은 일반적인 자연환경과는 다른 통제된 조건에서 세포가 성장하는 과정을 총칭한다. 세포가 살아있는 조직에서 분리가 된다면 생존할 가능성이 낮아지기 때문에 신중하게 제어된 조건을 유지해줄 필요가 있다. 이 조건은 세포의 유형에 따라 다르지만 일반적으로 아미노산, 탄수화물, 비타민, 무기질 등의 필수 영양소와 호르몬, 항생제 등이 필요하고 이를 적절하게 공급하기 위한 배지가 있는 적절한 용기로 구성 되어야한다. 2. 세포 배양 방법 세포 배양을 하기 위해서는 배양할 세포를 얻어와야 하는데 그 방법에는 크게 두가지...2025.05.03
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원핵세포 배양 및 관찰 실험보고서2025.05.041. 원핵세포 원핵세포는 원핵생물을 구성하고 있고 개체가 단 하나로만 이루어진 단세포이다. 원핵세포는 하나의 염색체만 가지고 있고 진핵세포와 다르게 유사분열을 하지 않으며, 진핵세포보다 요구하는 영양분이 까다롭지 않아 세포배양에 주로 쓰인다. 또한 원핵세포는 다른 세포와 달리 세포주기가 매우 짧아 번식과 증식이 빠르다. 2. 세포배양 세포배양은 생물학 연구 전체에서 가장 유용한 기술이다. 세포배양의 장점은 단일 배양세포를 대량으로 얻을 수 있고 그 중 돌연변이의 관찰도 비교적 용이한 것이다. 초기의 조직배양은 명확하지 않은 물질이 ...2025.05.04
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RNA 추출 및 정량 실험 결과 보고서2025.01.041. RNA 추출 실험의 목적은 Trizol을 이용하여 RNA를 추출하고 정제하는 방법을 익히고, 추출된 RNA의 품질과 양을 확인하는 것입니다. 실험 방법으로는 6-well plate에 세포를 준비하고, PBS로 세척한 후 Trizol을 처리하여 RNA를 추출하는 과정이 포함됩니다. 이를 통해 RNA 추출 및 정량 기술을 습득할 수 있습니다. 1. RNA 추출 RNA 추출은 생물학 및 의학 연구에서 매우 중요한 과정입니다. RNA는 유전 정보를 전달하고 단백질 합성에 관여하는 핵산으로, 세포의 다양한 기능을 이해하는 데 필수적입니...2025.01.04
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E. coli와 Yeast의 Cell Culture2025.05.061. Prokaryote Prokaryote는 핵막이 없는 원핵생물을 의미하며, 단세포생물일 경우가 많고 주로 무성 생식 방법인 Binary Fission을 통해 번식한다. 이외에도 진핵생물인 Fungi에 속하는 이스트의 몇 가지 종도 Binary Fission을 한다. 2. Binary Fission Binary Fission은 가장 간단한 생식 방법 중 하나로, DNA 복제 후 세포 분열을 통해 두 개의 동일한 딸세포가 형성된다. 이러한 Binary Fission은 미생물의 유전적, 환경적 요소에 따라 생식 주기가 결정되며, 이...2025.05.06
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세포 계수 및 배양접시 seeding2025.01.021. Hemocytometer를 이용한 세포 계수 Hemocytometer는 혈액 중의 적혈구, 백혈구, 호산구 등의 세포를 세기 위해 고안된 현미경 슬라이드입니다. Hemocytometer의 격자 구조와 틈새 높이를 이용하여 세포 현탁액의 농도를 계산할 수 있습니다. 또한 trypan blue 염색을 통해 살아있는 세포와 죽은 세포를 구분할 수 있습니다. 이를 통해 실험에 필요한 적절한 농도의 세포를 준비할 수 있습니다. 2. 세포 계수 방법 Hemocytometer 외에도 flow cytometry, CFU counting, s...2025.01.02
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세포 계대배양 실험2025.01.021. 세포 계대배양 세포 배양 시 한정된 공간에서 세포 증식이 제한되므로, 계대배양을 통해 새로운 공간을 제공하여 세포가 지속적으로 분열할 수 있도록 한다. 또한 실험에 사용되는 세포의 일관성을 보장하기 위해 유전적 특성이 동일한 세포주를 지속적으로 대를 이어 배양한다. 계대배양 시 세포를 분리하는 방법으로는 enzymatic dissociation과 physical dissociation이 있으며, 세포의 특성을 고려하여 적절한 방법을 선택해야 한다. 2. Trypsin의 작용 원리 Trypsin은 단백질 분해효소로, 세포가 다른...2025.01.02
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LDH assay2025.01.231. 단백질 정제 실험 주제에서 다루고 있는 LDH assay는 단백질 정제 과정에 대한 내용을 포함하고 있습니다. 단백질 정제는 다양한 종류의 단백질이 섞여 있는 샘플에서 원하는 단백질을 분리하는 작업입니다. 크로마토그래피, SDS-PAGE, Western blot 등의 방법을 통해 단백질의 순도를 점차 높여나가는 과정이 설명되어 있습니다. 2. 효소 활성 측정 이 실험에서는 LDH(Lactate Dehydrogenase)라는 효소의 활성을 측정하는 방법에 대해 설명하고 있습니다. 효소 활성은 반응 속도, 특정 활성, 수율 등으로...2025.01.23
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이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(DNA plasmid transfection, Immunoprecipitation)2025.01.231. DNA plasmid transfection DNA plasmid transfection 실험의 목적은 고분자-유전자 복합체를 이용하여 동물 세포에 plasmid DNA를 넣어 세포의 형질을 전환하는 것이다. 이를 위해 먼저 단백질 A에 대한 염기서열 옆에 epitope tag인 V5 폴리펩타이드에 대한 염기서열을 같이 붙여서 플라스미드 DNA를 세포 내에 넣어준다. 그러면 플라스미드가 핵내에 들어가서 DNA 역할을 할 수 있고, 이후 벡터 DNA가 mRNA로 전사되어 V5가 붙은 단백질 A가 발현된다. 2. Immunopre...2025.01.23
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세포 계대배양 Cell subculture 및 cell thawing 프로토콜2025.01.241. 세포 계대배양 세포 계대배양은 세포를 새로운 배양 용기로 옮겨 배양하는 과정입니다. 이 프로토콜에서는 세포 해동, 세포 계수, 세포 계대배양 등의 단계를 자세히 설명하고 있습니다. 세포 배양 시 배지, 혈청, 항생제의 비율과 사용량, 배양 온도 및 CO2 농도 등의 조건을 잘 관리해야 합니다. 2. 세포 해동 세포를 액체 질소 탱크에서 꺼내어 37°C 수조에서 1-2분 내에 해동시킵니다. 해동된 세포를 배지가 든 falcon 튜브에 옮기고 원심분리하여 상층액을 제거한 뒤 새로운 배지를 넣어 세포를 현탁합니다. 이후 세포 수를 ...2025.01.24
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