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RNA 분리 및 cDNA 합성, 실시간 PCR을 이용한 개화시기 측정2025.11.121. RNA 분리 (RNA Isolation) 생명과학 실험에서 세포나 조직으로부터 RNA를 추출하는 기본적인 분자생물학 기법입니다. 이 과정은 세포를 용해시키고 단백질과 DNA를 제거하여 순수한 RNA를 얻는 것을 목표로 합니다. 추출된 RNA는 이후 역전사 반응이나 유전자 발현 분석 등 다양한 실험의 기초 재료로 사용됩니다. 2. cDNA 합성 (cDNA Construction) mRNA를 주형으로 하여 역전사효소(reverse transcriptase)를 이용해 상보적 DNA(complementary DNA)를 합성하는 과정입...2025.11.12
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밀도 이용 RNA 추출 실험 보고서2025.05.141. RNA 추출 이 보고서는 RNA 추출 실험에 대해 설명합니다. RNA는 DNA와 달리 일부 정보만을 활용하는 유전 물질로, 단백질 합성에 중요한 역할을 합니다. 실험에서는 Trizol, Chloroform, Isopropanol 등의 시약을 사용하여 RNA를 추출하고 정제하는 과정을 자세히 설명하고 있습니다. 또한 RNA 추출 과정에서 사용되는 시약들의 특성과 작용 원리, RNA 안정성 유지를 위한 DEPC 처리 등에 대해서도 자세히 다루고 있습니다. 2. RNA 구조와 종류 보고서에서는 RNA의 다양한 종류와 구조에 대해 설...2025.05.14
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RNA 추출 실험: 원리, 방법 및 순도 분석2025.11.171. RNA 추출 원리 및 중심원리 DNA의 유전정보는 DNA → RNA → 단백질 순서로 전달되는 중심원리(Central Dogma)를 따른다. DNA의 정보가 RNA로 전달되는 과정을 전사(transcription), RNA에서 단백질이 합성되는 과정을 번역(translation)이라 한다. RNA 획득은 유전자 발현의 양상과 메커니즘 연구에 필수적이며, cDNA 제작 및 RT-PCR 등의 실험 수행을 위해 필요하다. RNA는 DNA와 유사한 물리화학적 성질을 가지며, 세포 분쇄, 단백질 분해 제거, RNA 농축 및 검정 순서를...2025.11.17
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RNA 추출 및 정량 실험 결과보고서2025.11.111. RNA 추출 방법 Trizol, phenol, GITC를 이용한 homogenization으로 시작하여 chloroform을 통한 phase separation, isopropanol을 이용한 RNA 침전, 75% EtOH를 이용한 세척 과정을 거친다. Trizol은 산성 phenol로 단백질과 지질을 분해하고 GITC는 RNase를 억제한다. Chloroform은 유기용매로 phenol을 유기층으로 분리시키며, 원심분리를 통해 aqueous phase(RNA), interphase(DNA), organic phase(단백질,...2025.11.11
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[생물공정실험] 2주차 RNA extraction and quantification 예비보고서2025.04.261. Gene Expression 유전자 발현은 유전자에 암호화된 정보가 단백질을 암호화하는 RNA를 만들거나 다른 기능을 수행하는 비암호화 RNA를 만드는데 사용되는 과정이다. RNA와 단백질이 만들어지는 시기와 장소를 제어하는 스위치 역할을 하고 산물이 얼마나 많이 만들어지는지 결정하는 역할을 한다. DNA에서 RNA로 전사, 단백질로의 번역을 통해 세포에 존재하는 단백질의 양을 결정하게 된다. 세포에 있는 mRNA 분자의 양과 유형은 세포의 기능을 나타낸다. RNA 전사는 단일 mRNA 분자에서 많은 단백질을 만들 수 있기 때...2025.04.26
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세포배양, DNA, RNA 추출 실험2025.11.141. 세포배양 (Cell Culture) 세포배양은 자연환경 외부의 통제된 조건에서 세포가 성장하는 과정이다. HEK 293T cell은 부착성 세포로 plate 바닥에 붙어 자라며, 계대배양을 통해 세포를 유지한다. Trypsin-EDTA를 사용하여 세포를 분리하고, 배지를 교체하며 세포를 배양한다. 세포는 초기 3일간 지연기를 거친 후 증식을 시작하여 plate를 채우고, 영양분 부족으로 정상기에 도달한 후 사멸기에 진입한다. 2. Genomic DNA 추출 (gDNA Isolation) Genomic DNA 추출은 세포용해, ...2025.11.14
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세포생리학실험_cell culture, Genomic DNA Isolation_genomic DNA 추출, total RNA 추출, 전기영동2025.01.131. 세포 배양 HEK 293T 세포를 DMEM 배지와 FBS를 사용하여 배양하였다. 세포는 처음에는 동글동글한 모양이었지만 점차 바닥에 붙어 자라나면서 별모양의 형태를 띠었다. 배지의 색이 점점 노란색으로 변하면서 세포가 죽기 시작하였다. 이를 통해 세포가 일정 횟수의 분열을 한 후 노화되는 과정을 관찰할 수 있었다. 2. Genomic DNA 추출 HEK293T 세포에서 genomic DNA를 추출하였다. 세포를 용해시킨 후 단백질과 RNA를 제거하는 과정을 거쳐 순수한 DNA를 분리하였다. 전기영동 결과 DNA 밴드가 마커보다...2025.01.13
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HEK293T 세포 계대배양 및 핵산 추출 실험2025.11.171. HEK293T 세포 계대배양 HEK293T 세포는 SV40 T 항원을 발현하는 형질전환 세포로, 높은 단백질 발현을 유도한다. 계대배양은 trypsin-EDTA를 이용하여 세포를 배양용기에서 분리하고, centrifuge로 세포를 수집한 후 새로운 배지에 옮기는 과정이다. 세포는 부착단백질과 결합할 때 길게 늘어난 형태를 보이다가, trypsin 처리 후 구형으로 변한다. 8일간의 배양 관찰 결과 시간이 지날수록 배지에 세포가 증식하여 빈 공간이 감소하는 것을 확인할 수 있다. 2. Genomic DNA 추출 Genomic D...2025.11.17
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RT PCR (reverse transcription) / 100점 면역학실험 레포트 (원리, 시약, RNA 추출, cDNA 합성)2025.05.051. mRNA, transcription, translation 세포가 균의 침입을 인식하면 염증을 일으키는데, 이때 mRNA의 유무를 통해 세균 침입 여부를 알 수 있다. mRNA는 단백질 합성을 지시하는 전사체이며, 전사는 DNA를 주형으로 RNA를 합성하는 과정이고, 번역은 mRNA의 염기서열을 바탕으로 단백질을 합성하는 과정이다. 2. PCR, RT-PCR, real-time PCR PCR은 특정 DNA fragment를 증폭하는 기술이며, RT-PCR은 RNA를 DNA로 역전사하여 증폭하는 방법이다. Real-time PC...2025.05.05
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생물공정실험 예비보고서_RNA Extraction and Quantification2025.01.071. 유전자 발현과 조절 유전자 발현 경로는 전사와 번역으로 나뉘며, 전사 개시, 전사 후 가공, 번역 단계에서 조절될 수 있다. 전사 활성은 크로마틴 구조 변화, 전사인자 결합 등으로 조절되며, 전사 후에는 mRNA 가공, 번역에서는 mRNA 사용 속도 조절 등으로 이루어진다. 2. TRIzol을 이용한 RNA 추출 TRIzol 시약은 페놀-구아니딘 이소티오시아네이트로 구성되어 세포막을 파괴하고 RNase를 억제하여 RNA를 선택적으로 추출할 수 있다. 세포 용해액을 원심분리하면 RNA가 수용층에 존재하게 되며, 이후 isopro...2025.01.07
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